探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫组化检测在前列腺诊断中的应用

陈咏梅

南通市第二人民医院病理科，江苏南通 226002

前列腺癌（prostatic carcinoma,prostatic cancer,PCa）属于临床上较为常见的一种恶性肿瘤，老年男性是主要的发病群体，在很多西方国家PCa发病人数居男性恶性肿瘤疾病的第一位[1-3]。而近年来随着人们生活习惯的变化，我国PCa其发病率也呈逐年上升的趋势[4]。PCa早期的临床症状并不典型，且发病较隐匿，很多患者在确诊时大多已经发展至晚期，因而早期的有效诊断与及时治疗对于保证患者的生命健康至关重要[5-6]。目前，临床上常通过血清前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）检测及前列腺穿刺活检来进行前列腺疾病的鉴别与诊断，而PCa患者的早期诊断率也在逐年上升[7]。前列腺穿刺活检属于临床PCa诊断比较可靠的方法，而穿刺活检其获取的样本量极为有限，加之一些病变早期不够典型，单纯依靠HE染色或者光镜镜检，基于微小的可疑性病灶来给出前列腺癌的良恶性诊断，这对任何一个病理医生来说难度都是相当大的[8]。随着医疗及科学技术的不断发展，免疫组化技术在临床上的运用越来越广泛[9-11]。本文选取2021年2月—2022年2月南通市第二人民医院收治的202例行早期穿刺及电切的前列腺患者为研究对象，探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫组化技术检测在前列腺病理诊断中的应用价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院收治的202例行早期穿刺及电切的前列腺患者为研究对象，所选病例均经医院医学伦理委员会批准。其中良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia, BPH）组患者171例，年龄44～75岁，平均（58.26±7.12）岁；血清中PSA含量0～10 μg/L。前列腺癌（PCa）组患者31例，年龄45～74岁，平均（58.22±7.14）岁；血清中PSA含量均＞4 μg/L。两组的年龄、血清PSA含量等比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①参与治疗前未使用任何有关前列腺的药物以及化疗等；②患者未合并其他原发性的恶性肿瘤疾病；③患者不具有传染性疾病；④患者的病历资料齐整；⑤对研究知情并签署知情同意书。

排除标准：①患者合并患有其他类型的生殖系统相关性疾病；②患者具有肝肾功能障碍；③患者依从性较差。

1.3 方法

对两组活检样本中的肿瘤标志物进行检测，包括Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin，并统计其阳性的检出情况。对患者其穿刺的活检样本进行收集，并以10%的甲醛予以固定，将组织实施常规处理以后再给予石蜡包埋。对制备好的相应蜡块予以切片，要求切片厚度控制在2 μm，随后对各切片给予免疫组化染色。而后分别对Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin进行一抗染色，将细胞核或是胞浆中有棕黄色颗粒判定为染色阳性。借助光学显微镜，以其中的5个视野开展阳性细胞的比例计数，如果阳性细胞的比例在10%以上，则认定是表达阳性。

1.4 观察指标

对两组样本中Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等前列腺标志物相应阳性表达情况进行比较，以病理确诊结果作为金标准，统计各免疫指标诊断效能以及联合诊断效能。其中灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；特异度=真阴性例数/（假阳性例数+真阴性例数）×100%；准确度=（真阳性例数+真阴性例数）/总例数×100%。

1.5 统计方法

采用SPSS 20.0统计学软件处理数据，符合正态分布的计量资料以（±s）表示，组间差异比较以t检验，计数资料以频数（n）及率表示，组间差异比较以χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者各检测指标的表达量比较

与BPH组患者相比，PCa患者Ki67、P504s、LIMK1及Cofilin指标的表达水平显著更高，而p63表达量显著更低，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组患者各检测指标的表达量比较(±s)

表1 两组患者各检测指标的表达量比较(±s)

检测指标Ki67 p63 P504s LIMK1 Cofilin BPH组（n=171）2.32±0.57 6.80±1.85 2.43±0.85 2.05±0.61 2.28±0.73 PCa组（n=31）7.20±1.47 0.87±0.24 6.93±1.29 8.14±2.33 8.40±1.65 t值32.266 16.678 24.804 29.340 33.781 P值＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 各免疫指标单独及联合诊断的诊断效能比较

Ki67、p63、LIMK1指标单独检测PCa的灵敏度均达到90%以上；而P504s和Cofilin指标单独检测的灵敏度分别为83.87%、87.10%；Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin5项指标联合检测的灵敏度、特异度和准确度均较高，分别达到96.77%、98.24%和98.02%。见表2。

表2 各免疫指标单独及联合诊断诊断结果比较

3 讨论

前列腺癌属于临床上较为严重的男性恶性肿瘤性疾病，在我国其发病人数较西方国家偏少，但近年来随着人们生活习惯的变化及人口老龄化趋势的加重，前列腺癌的发病率呈逐年上升的趋势[12-14]。PSA属于临床上鉴别与诊断PCa最常用的肿瘤标志物，对于PCa的早期诊断具有积极的作用和价值。然而PSA仅具备组织的特异性，缺乏肿瘤的特异性，因而PCa及前列腺炎等疾病的相关手术治疗均有可能会造成PSA水平上升，而导致假阳性的出现。

前列腺穿刺活检属于临床上用于PCa鉴别与诊断的金标准，同时PCa与其他类型的肿瘤性疾病不同，其具有特有的形态以及生物学特征。PCa的核异型性、坏死、核分裂以及血管淋巴管等相关恶性指标对于疾病的鉴别与诊断往往影响较小，很少有明显的核异型性，也不会有单核或是多核的瘤巨细胞出现[15]。临床上对于PCa的鉴别与病理诊断注重腺体结构是否出现异常以及肿瘤细胞所表现出的异形性或是浸润现象。因PCa其病理形态比较复杂，加之前列腺病变的病理形态差别很小，导致光镜下PCa的病理诊断较为困难，通常需辅助以免疫组化协助检查。

本次研究结果显示，与BPH组患者相比，PCa患者其Ki67、P504s、LIMK1及Cofilin指标的表达水平显著更高，而p63表达量显著更低，这与相关的研究结果相似。何进等[16]报道了Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin的PCa诊断阳性率，分别为79.31%、79.31%、82.76%、89.66%、86.21%，本次结果略高于该报道结果。同时统计分析各项指标的诊断效能显示，Ki67、p63、LIMK13项指标单独检测PCa的灵敏度均达到90%以上；而P504s和Cofilin指标单独检测的灵敏度分别为83.87%、87.10%；Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin5项指标联合检测的灵敏度、特异度和准确度均较高，分别达到96.77%、98.24%和98.02%。证实了前列腺癌各相关标志物包括Ki67、p63、P504s、LIMK1以及Cofilin指标的联合检测，能够显著提升前列腺癌的早期检出率。进一步说明可以由免疫组化技术对标志物阳性表达进行检测，有助于明确患者的临床分期，以制订具有针对性的临床治疗方案，提升患者的治疗效果，并改善其预后[17]。

综上所述，Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等各前列腺癌的标志物均具有一定的阳性及阴性检出率，Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等指标联合检测在前列腺癌的鉴别和诊断中具有积极的病理诊断意义，在临床上具有广阔的推广价值。