血清IgG4和IgGR在IgG4桥本甲状腺炎中的应用

王海滨,赵 娇,石新慧,刘英丽

解放军总医院第四医学中心,北京 100048

桥本甲状腺炎(HT)是一种甲状腺自身免疫性疾病,又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎,而抗甲状腺球蛋白抗体(Tg-Ab)和抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)是HT重要的自身免疫性抗体,也是该病诊断的关键性实验室指标[1-2]。疾病初期HT 患者的甲状腺功能多处于正常阶段,但随着病程的发展,甲状腺组织逐渐受到破坏进而出现甲状腺功能亢进现象,而在病程后期甲状腺功能多呈减退的表现[3-4]。HT具有许多特殊临床表现,除较为常见的HT合并毒性弥漫性甲状腺肿之外,还包括IgG4桥本甲状腺炎(IgG4 HT)、桥本脑病和多发性内分泌腺自身免疫综合征等[5-7],而IgG4 HT属于免疫球蛋白G4相关性疾病(IgG4-RD)的范畴。通常认为,血清IgG4水平、IgG4与IgG比值(IgGR)有助于IgG4-RD的诊断,治疗方案的确定及疾病预后的判断[8-9]。在大多数IgG4-RD患者体内,血清IgG4抗体水平和IgGR均可出现升高,并且血清IgG4水平的下降常可反映免疫炎症得到良好控制,故而其常作为IgG4-RD的重要疗效评估指标[10]。然而,IgG4 HT的诊断依赖于甲状腺穿刺组织病理中找到IgG4阳性的浆细胞为标准,有关血清中IgG4水平和IgGR等指标在IgG4 HT诊断和治疗方面的作用,尤其是对IgG4 HT不同甲状腺功能状态下指标的应用价值研究则鲜有报道。本研究通过选取甲状腺功能正常、甲状腺功能亢进和甲状腺功能减退的IgG4 HT患者,分析其血清甲状腺自身抗体、IgG4、IgG水平和IgGR等免疫指标,从而探讨这些指标在IgG4 HT疾病的相关临床应用前景。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年1月至2022年4月来本院就诊的101例IgG4 HT患者作为研究对象,平均年龄(57.46±11.81)岁,其中男性26例,女性75例。此外,选择同期41例表观健康者(男性10例,女性31例)作为正常对照组。IgG4 HT诊断标准:需满足HT的诊断标准[11],并且同时满足甲状腺病理组织学检查存在淋巴细胞、浆细胞浸润、纤维化;IgG4阳性浆细胞浸润情况(即IgG4/IgG阳性浆细胞比值>40%,且有IgG4阳性浆细胞每高倍镜视野大于10个)。确诊的IgG4 HT患者结合其临床表现和促甲状腺刺激激素(TSH)结果,将IgG4 HT分为HT甲状腺功能亢进组(简称HT甲亢组)33例、HT甲状腺功能正常组(简称HT正常甲功组)36例和HT甲状腺功能减退组(简称HT甲减组)32例。纳入标准:研究对象符合上述IgG4 HT诊断标准并签署知情同意书。排除标准:(1)合并有肿瘤,急性心脏、肝或肾等重要器官疾病;(2)近期实施过手术、存在外伤情况;(3)孕、产妇;(4)急性或亚急性甲状腺炎、甲状腺高功能性腺瘤等甲状腺疾病;(5)合并其他甲状腺疾病;(6)近1个月服用治疗甲状腺相关药物。

1.2仪器与试剂 Roche E601电化学发光仪、Roche C701全自动生化分析仪,TSH测定试剂盒,TPO-Ab测定试剂盒,Tg-Ab测定试剂盒,以及IgG测定试剂盒均购自罗氏诊断产品(上海)有限公司。IgG4测定试剂盒购自中元汇吉生物技术股份有限公司。

1.3方法 分别留取受试者空腹静脉血3～4 mL,3 000 r/min,离心10 min以获得血清备检。按仪器操作手册和试剂说明书要求,分别检测血清中的TSH、TPO-Ab、Tg-Ab、IgG和IgG4项目。IgGR计算公式为IgG4/IgG×100%。

2 结 果

2.1各组血清TSH、IgG4、IgG和IgGR水平比较 各组年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。HT甲亢组、HT正常甲功组和HT甲减组血清TSH水平与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组、HT正常甲功组、HT甲减组TSH水平与HT甲亢组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HT正常甲功组和HT甲减组血清IgG4和IgGR水平与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);HT正常甲功组和HT甲减组血清IgG4和IgGR水平与HT甲亢组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HT甲亢组和HT甲减组IgG水平高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组血清TSH、IgG4、IgG和IgGR水平比较

2.2各组TPO-Ab、Tg-Ab和IgG4阳性率比较 各组性别比较差异无统计学意义(P>0.05)。HT甲亢组、HT正常甲功组和HT甲减组TPO-Ab和Tg-Ab阳性率与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HT正常甲功组和HT甲减组IgG4阳性率与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);HT甲减组IgG4和TPO-Ab阳性率高于HT甲亢组,差异有统计学意义(P<0.05);HT甲减组TPO-Ab阳性率高于HT正常甲功组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 各组TPO-Ab、Tg-Ab和IgG4阳性率比较[n(%)]

2.3血清IgG4、IgG和IgGR检验项目ROC曲线分析 ROC曲线分析显示,IgG4的曲线下面积(AUC)最大,达到0.72(95%CI:0.64～0.81),当以1.28 g/L为截断值,灵敏度为0.61,且特异度最高为0.98。另外,IgGR的AUC为0.68(95%CI:0.59～0.76),当取12.00%作为截断值时,灵敏度为0.48,特异度为0.95。再以 Logit(P)作为IgG4和IgGR的联合检验变量,进行多变量 ROC曲线分析,建立回归方程Logit(P)=-1.652 + 5.550IgG4-42.393IgGR。IgG4+IgGR联合检测的AUC为0.74(95%CI:0.66～0.82),当以0.96 为截断值,灵敏度为0.56,特异度为0.90。见图1、表3。

表3 血清IgG4、IgG和IgGR的ROC曲线分析

3 讨 论

IgG4-RD是近年来新被定义的一种由免疫介导的慢性炎症伴纤维化的疾病,其主要病理表现为受累组织以IgG4阳性浆细胞为主的淋巴、浆细胞浸润,同时可伴有席纹状纤维化、闭塞性静脉炎和嗜酸性粒细胞浸润等对糖皮质激素敏感的纤维炎性疾病[12]。虽然仍有部分IgG4-RD患者的血清IgG4水平和IgGR并不升高,但在结合临床表现、病理及影像学检查结果的情况下,血清IgG4水平和IgGR对IgG4-RD的诊断方面仍存在较高的应用价值,特别是随着血清IgG4水平的升高,其对诊断IgG4-RD的特异性亦逐渐升高,因而具有十分重要的临床意义[13]。有研究指出,类似的纤维炎症疾病如Mikulicz综合征、腹膜后纤维化、Küttner肿瘤和Riedel甲状腺炎(RT)已被统一归于IgG4-RD[14-16]。IgG4-RD的典型特征是血清IgG4水平升高和对类固醇治疗的良好反应。根据自身免疫性胰腺炎患者甲状腺功能减退表现和甲状腺自身抗体在疾病中的频繁发生,都能够提示甲状腺参与了IgG4-RD的发展过程。有研究发现IgG4阳性浆细胞的存在,其他富含IgG4亚型的甲状腺疾病也逐渐开始被报道[17]。目前为止,有关IgG4 HT明确的发病机制,以及其所涉及的遗传因素、抗原抗体反应和过敏现象等方面仍有许多未知之处。

TSH作为判断甲状腺功能最敏感的实验室指标,在甲状腺疾病的诊断和治疗方面发挥着重要作用。HT甲亢组、HT正常甲功组和HT甲减组血清TSH水平与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组、HT正常甲功组、HT甲减组TSH水平与HT甲亢组比较,差异有统计学意义(P<0.05),说明IgG4 HT虽然作为一种特殊的HT类型,在其疾病的演变发展过程中,甲状腺功能也与非IgG4 型的HT一样,经历甲状腺激素从增高到下降的变化过程,IgG4阳性浆细胞对甲状腺组织和滤泡细胞的浸润可能并不能改变HT疾病的进程。

IgG按类型可分为IgG1、IgG2、IgG3和IgG4四个亚类。IgG1、IgG2和IgG3均能够激活补体经典途径,同时也能够介导抗体依赖的细胞毒作用,但IgG4却具有阻断补体激活的作用。IgG4属于一种依赖辅助型T细胞的IgG亚型,与靶抗原的亲和力相对较低[18]。本研究中也发现,HT正常甲功组和HT甲减组血清IgG4和IgGR水平与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);HT正常甲功组和HT甲减组血清IgG4和IgGR水平与HT甲亢组比较,差异有统计学意义(P<0.05);HT甲亢组和HT甲减组IgG水平高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),这些结果均说明IgG4阳性浆细胞的浸润虽不能明显改变HT的发病进程,但随着病情发展IgG4阳性浆细胞会使得IgG4分泌增多并释放入血液中,造成血清IgG4水平增高,尤其是在IgG4 HT的中后期升高明显,提示血清IgG4水平和IgGR结果可作为IgG4 HT病情进程的潜在血清学标志物。

TPO-Ab和Tg-Ab是HT两个重要的自身免疫性抗体,分别针对TPO和Tg两种自身抗原而产生。TPO是一种膜结合糖蛋白,能够活化碘分子,从而参与甲状腺激素的合成,而Tg则是甲状腺素合成的原料之一,通过与碘化酪氨酸残基的耦联,最终生成T3和T4。本研究结果可见,HT甲亢组、HT正常甲功组和HT甲减组TPO-Ab和Tg-Ab阳性率与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且在HT甲减组TPO-Ab的阳性率达到81.30%,也显著高于HT正常甲功组和HT甲亢组,这可能与TPO-Ab可直接阻断碘的活化过程,从而抑制甲状腺激素的合成有关。HT正常甲功组和HT甲减组IgG4阳性率与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);HT甲减组IgG4阳性率高于HT甲亢组,差异有统计学意义(P<0.05)。临床上,在面对血清IgG4水平异常的HT患者时,应考虑IgG4 HT的可能,尤其是在甲状腺激素水平正常时的HT患者,必要时可进行甲状腺穿刺来明确诊断。本研究中,IgG4单独检测的AUC和特异度数值均为最高,而IgGR的AUC和特异度数值虽略低于IgG4,但特异度仍然达到0.95。此外,当使用IgG4+IgGR两者联合检测时,其AUC达到0.74,高于两者各自单独检测的AUC。这些结果均提示血清IgG4和IgGR检测在诊断IgG4 HT方面具有较高的诊断价值。

综上所述,血清IgG4及IgGR作为血清学标志物在IgG4 HT诊断和疾病进展研究方面具有潜在的应用价值。