溶血三项联合网织红细胞、血清总胆红素检测对新生儿溶血病早期诊断的临床价值

邝慧玲,邹蓓,冯钊赞（广东省佛山市南海区第六人民医院,广东 佛山 528200）

新生儿溶血病为近年临床儿科中较为常见的一种新生儿病变，指母婴血型不合，母体出现血型抗体经胎盘结合胎儿体中血型抗原，进而出现免疫性溶血[1]。临床往往将其分为Rh血型系统、ABO血型系统不合[2]。患儿主要表现为黄疸、肝脾肿大，如不及时诊治，病变会诱发胆红素脑病，甚至直接威胁其生命。目前临床主要采用溶血三项检查，即直接抗球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验，但溶血三项检查往往需等待1-2d才能出结果[3]，加之检测结果受存放条件、血液抽取时间等因素干扰，导致此方式仍然有漏诊几率，单一用于早期诊断新生儿溶血病存在局限性[4]。血清总胆红素水平、网织红细胞为近年来临床判定进行性贫血、新生儿黄疸的常用指标。血清总胆红素为反映人体肝、胆功能的主要指标[5]，临床也将其用于评估黄疸病变状况，也在诊断隐性黄疸方面有积极意义。通过测得网织红细胞能知晓人体骨髓红细胞生成状况，在诊断贫血和相关性病变中有较大作用。同时也有学者报告称，血清总胆红素、网织红细胞也在诊断新生儿溶血病中有积极意义。现本文共纳入2022年3月-2023年2月收治的80例疑似新生儿溶血病患儿，旨在分析溶血三项联合网织红细胞、血清总胆红素检测的诊断效能。具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2022年3月-2023年2月收治的80例疑似新生儿溶血病患儿作为研究对象，按照临床综合确诊结果将其分为非新生儿溶血组（25例）和新生儿溶血组（55例）。非新生儿溶血组：男性15例、女性10例；年龄0-12天，平均为（5.68±0.15）天。新生儿溶血组：男性37例、女性18例；年龄0-12天，平均为（5.61±0.13）天。两组患儿基本资料比较，差异不显著（P＞0.05）。本研究方案经医院伦理委员会批准后实施。

入选标准：①新生儿溶血组患儿均满足《新生儿溶血病诊断与治疗》[6]中新生儿溶血病判定标准；②足月且体重正常的新生儿；③各研究对象母亲血型为O型RhD阳性，和新生儿血型存在不合；④均为单胎妊娠。排除标准：①重要脏器功能不全；②合并感染；③先天性肝/胆系统病变；④有头颅血肿史或颅内出血史；⑤中途转院者。

1.2 方法 所有患儿均接受溶血三项、网织红细胞、血清总胆红素检查。

溶血三项：采集各患儿静脉血3ml，用37℃试剂卡孵育器、专用检测卡离心机、Rh（D）血型检测卡、人ABO血清正/反定型、抗人球蛋白检测卡、热放散法做左释放试验、游离试验、直抗试验，由长春博讯生物技术公司提供试剂盒。若释放试验、游离试验、直抗试验均为（+）则判定新生儿溶血病[7]；若游离或直抗试验单项为阳性，则判定疑似新生儿溶血病；若任意≥2项或释放试验为阴性[8]，临床需综合确诊。

总胆红素和网织红细胞检测：用迈瑞CL6000plus检测网织红细胞，用西门子流水线（重氮法）检测总胆红素指标。总胆红素标准值[9]：3.4-17.1µmol/L；网织红细胞标准值：3%-6%。

1.3 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行数据分析，计量资料用（）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 溶血三项检测结果 溶血三项检测诊断新生儿溶血组共47例确诊（85.45%），非新生儿溶血组共19例确诊（76.00%）。见表1。

表1 溶血三项检测结果

2.2 两组患儿血清总胆红素、网织红细胞水平比较 新生儿溶血病患儿血清总胆红素、网织红细胞高于非新生儿溶血病患儿，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组患儿血清总胆红素、网织红细胞水平比较()

2.3 溶血三项、溶血三项+血清总胆红素+网织红细胞检测结果与临床确诊比较 溶血三项+血清总胆红素+网织红细胞检测灵敏度为98.18%（54/55）、特异度为96.00%（24/25）、阳性预测值为98.18%（54/55）、阴性预测值为96.00%（24/25）高于溶血三项检测敏感度的85.45%（47/55）、特异度76.00%（19/25）、阳性预测值88.68%（47/53）、阴性预测值70.37%（19/27），差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

3 讨论

近些年，新生儿科中非常常见的一种急症病变为新生儿溶血病，多因母婴血型不合，母体血型抗体通过胎盘结合胎儿血型抗原发生免疫性溶血。临床一般可将其分为ABO血型系统不合、Rh血型系统不合。主要表现为程度不同的肝脾肿大、水肿、贫血、黄疸等，甚至出现有核黄疸、死亡等。大部分新生儿溶血病患儿在出生时无典型症状，如贫血、皮肤黏膜黄染等均为轻度或中度，对临床及时诊治有较大干扰性。目前，临床判定新生儿溶血病主要采用溶血三项检查，即抗体释放、游离抗体、直接抗球蛋白试验，但检查结果需在1-2d后才可获得。加之多因素干扰的状况下，单一使用此方式检测的敏感度、特异度均不高。本文重点分析了溶血三项联合血清总胆红素、网织红细胞检测的价值，以提升诊断准确性，为临床诊治疾病奠定基础。

我国发生ABO血型不合的几率较高，母亲血型为O型，首次分娩则可发病，分娩次数明显增多的状况下，也会逐年增高新生儿溶血病，病情日益严重。临床诊断新生儿溶血病时，主要按照产后诊断、产前评估、分娩次数、母亲血型等进行判定，而在判定时需满足以下两个条件：①新生儿释放或直抗试验为阳性；②母婴血型不合。本研究采用溶血三项联合网织红细胞、血清总胆红素进行检测，结果发现，溶血三项+血清总胆红素+网织红细胞检测灵敏度（98.18%）、阳性预测值（98.18%）高于溶血三项（85.45%、88.68%），P＜0.05，表明溶血三项联合血清总胆红素、网织红细胞进行检测的效能更理想，此结果与夏帮坤[10]等学者的报告结果相符。也可从中得知，单一用溶血三项进行检测存在漏诊几率，有假阴性情况。分析原因可能受检测操作、标本采集后样本保存时间、采集样本时间等因素干扰。本研究还显示，新生儿溶血病患儿的血清总胆红素、网织红细胞指标明显比非新生儿溶血病患儿高（P＜0.05），其原因可能为网织红细胞属于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的不成熟细胞，此指标能将人体骨髓红细胞具备的生成能力直接反映出，并还和新生儿溶血病发病有关联性。临床多将其用于检测贫血疾病，评估骨髓抑制造血状况和放化疗后造血功能。经流式细胞仪检测网织红细胞内核酸染色荧光强度，进而得到低、中、高荧光强度指标。有报告[11]称，溶血性贫血者体内高、中、低荧光强度Ret百分率显著增高，肾性贫血体内低荧光强度Ret率显著降低，中强度无典型变化，高强度明显增高。正常状况下，未成熟Ret比率值在2.0%-6.0%，胎儿出生1d内含量最高，此后逐步降低。新生儿溶血病初期主要症状为黄疸，机体血清胆红素指标比正常新生儿明显更高。加之其出生后机体自行清除胆红素的功能未发育成熟，造成无法及时将聚集的胆红素清除干净，明显增高血清胆红素指标。同时，溶血三项联合网织红细胞、血清总胆红素检测在敏感度、特异度、阳性预测值等方面明显比单一使用溶血三项更高，可能因溶血三项内采用释放、游离、直抗试验，前者非常重要，使用间接方式进行检测，其准确性、阳性率、敏感性较高，检测结果显示为阳性的患儿，其母体IgG抗-A（B）抗体会对患儿体内红细胞产生致敏效果[12]，其中经典方式为热放散法，临床多将其用于检测新生儿溶血病ABO血型的IgM、抗B、IgG抗A血型抗体。人体血液内具有标志性的红细胞则为网织红细胞，通过测得此指标能直接反映机体中骨髓红细胞生成状况，此也为新生儿红细胞标志。人体处于新生儿时期，机体中血清总胆红素指标较高，会造成机体中大量蓄积胆红素，并穿透血脑屏障在神经系统中沉积，所产生的毒性常常会造成下丘脑神经核、海马、基底神经节坏死，并损伤中枢神经系统髓鞘，干扰神经元能量代谢。

综上所述，溶血三项联合网织红细胞、血清总胆红素检测判定新生儿溶血病的效能较高，可为临床早期确诊新生儿溶血病提供主要指标。