单糖和双糖分析方法研究进展

◎ 张 蕾

（唐传生物科技（厦门）有限公司，福建 厦门 361026）

糖类物质是多羟基醛、多羟基酮及其缩聚物的总称，又称为碳水化合物。糖类物质是自然界分布最广泛、数量最多的一类化合物，由植物通过光合作用合成，属于天然合成化合物。自然界中，几乎所有的生物体内均含有糖类物质。其中，植物体内含糖类物质最多，占其干重的50%～90%，动物体中含糖较少，仅占组织器官干重的2%，但是却对动物的生命活动起着重要作用。

我国在战国时期就开始食用蔗糖，到晋朝时有了制糖技术。北宋时期，王灼撰写了我国第一部制糖专著《糖霜谱》，详细记录了自甘蔗栽培到制作冰糖的全过程，揭开了制糖的新篇章。虽然人们很早就掌握了甘蔗的栽培、糖的提取和食用技术，但是直到19 世纪后期，随着科学的发展，人们才对糖的化学结构、性质有了认识。20 世纪70 年代之后，随着现代分离、分析技术的迅速发展，人们获得了更多糖的结构信息；而细胞生物学的飞速发展，不断揭示了糖的诸多生物学功能。尤其是近年来的研究，使人们对糖有了更深的认识。糖是除核酸和蛋白质之外另一类重要的生命物质，是生命体内重要的信息分子，参与了多细胞生命的受精、着床、分化、发育、免疫、感染、癌变和衰老等全部时间和空间过程。糖在细胞之间的相互识别、相互作用，水和电解质的输送，癌症的发生和转移，机体的免疫和免疫抑制，以及细胞凝集等生物过程中都起着关键作用[1]。

糖类分为单糖、双糖、多糖，单糖是糖类组成的基本单元。分析多糖时，需先将其分解为单糖、双糖、低聚糖等再进行检测分析，表明对单糖与双糖展开分析是糖类分析的基础。因此，本文基于当前单糖、双糖研究现状，就单糖、双糖分析测定方法进行概述，以期为日后单糖和双糖分析研究提供参考。

1 单糖、双糖分析方法

1.1 化学方法

常用的化学方法有苯酚-硫酸法[2]，该方法基于490 nm 波长下芳香络合物吸光度与糖含量的线性关系测定并计算得到总糖量。苯酚-硫酸法简单、快速，适用于复杂样品中单糖、多糖测定，但由于不同单糖的吸收率不同，这种方法只能在特定条件下应用。

化学方法多是基于糖的还原性来分析单糖和多糖，而测定还原糖最常使用的是酮基反应，主要有兰-埃农法、奥夫奈尔法、奈特-艾伦法、姆松-华尔格法，反应后可用分光光度法检测或称重法检测[3-4]。部分还原糖反应可以分为醛糖反应和酮糖反应。间苯二酚反应是酮己糖的特征反应，在酸性溶液中将糖转化为羟甲基糠醛，与间苯二酚反应，得到的红色配合物在398 nm 和480 nm 波长处有强特征吸收，该方法已成功应用于药物样品中乳果糖的光度定量测定[5]。乳果糖在酸性条件下的水解产物还能与半胱氨酸盐酸盐-色氨酸试剂反应，生成在518 nm 有最大吸收的粉色复合物，该反应也已应用于药品中乳果糖的测定[6]。分析复杂组分时，如果存在其他还原性物质，则会对糖的检测产生较大影响。

1.2 物理方法

物理方法的研究对象一般为液体，如旋光法、液体比重测定法和折光测定法。由于每种糖在总液体密度、折射率和光束偏振中的作用都是单独的，并非化学计量反应中简单的相加，所以物理方法局限于仅受单糖影响折射率的双糖样品[7-8]。这些物理方法测量简单且设备价格不高，仍被广泛使用于制糖工业。此外，还有常用的糖量计，即特别设计的旋光计和折光计，可以根据蔗糖浓度的折射率或旋转角度重新计算比例，分析过程简单、使用方便。

1.3 生物方法

糖类物质参与多种酶催化的生物转化过程，因此可利用酶的高效性和专一性进行分析。LUZZANA 等[9]通过酶的反应，使牛奶中乳糖和乳果糖含量与pH 值成正比，分别在不到2 min 和4 min 的时间内对乳糖和乳果糖直接进行分析，方法简单、准确，重复性好，经实验优化，乳果糖的灵敏度可达0.1 mmol·L-1。VARGAS 等[10]在转化酶/果糖脱氢酶INV/FDH 系统的基础上构建了蔗糖双酶生物传感器，将该传感器与果糖和葡萄糖生物传感器相结合，可在单个实验中同时测定蔗糖、果糖、葡萄糖。

虽然已有多种使用酶和生物催化材料对各种糖进行生物识别分析，但迄今为止还没有开发出用于糖类物质测定的免疫测定方法。这是因为某些糖缺乏免疫原性，无法培育抗体，而有的糖如麦芽糖和乳糖，虽有抗体可用，但其分析应用在文献中未见报道。

1.4 仪器分析法

1.4.1 高效液相色谱法

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是单糖、双糖分析检测中最常用的方法，技术较成熟，稳定性好，是国际AOAC 分析化学家协会推荐的常规糖类物质分析的官方技术。高效液相色谱仪可耦合的检测器较多，常用的有紫外吸收检测器（Ultraviolet Detector，UV）、荧光检测器（Fluorescence Detectors，FLD）、示差折光检测器（Refractive Index Detector，RID）、蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector，ELSD）及荷电气溶胶检测器（Charged Aerosol Detection，CAD）等。

（1）紫外吸收检测器。紫外吸收检测器是高效液相色谱仪应用最多、最广的检测器，它是依据光吸收原理，以适当的光路和电路，输出一个与试样组分浓度成正比的紫外-可见光吸收信号，其结构与一般光度计相似。紫外吸收检测要求被检测样品组分有紫外可见光吸收，而使用的流动相无吸收，或在被测组分吸收波长处无吸收。而单糖和双糖没有紫外吸收，需要经过衍生化处理，使待测组分带上生色团后才能进行光学检测[11]。目前，常见的紫外衍生化试剂有1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one，PMP）、4- 氨 基 苯 甲酸乙酯（4-aminobenzoic acid ethyl ester benzocaine，ABEE）、 异 硫 氰 酸 苯 酯（phenyl isothiocyanate，PITC）、甲氧基苯胺以及对硝基甲苯氯等。

现今，PMP 反应条件较温和，无需酸催化，是最为常用的衍生化试剂。周熙等[12]将葛仙米水解处理后，用PMP 衍生水解多糖后用HPLC-UV 法测试，结果显示，葛仙米多糖提取物中主要含有甘露糖、葡萄糖、氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖和木糖，该方法线性关系良好，准确性、重复性和专属性好。SPIRO 等[13]先将中性糖转化为氨基葡萄糖，经异硫氰酸苯酯衍生化处理后，用紫外检测器测定糖缀合物中存在的中性糖和己糖胺，该方法灵敏度高，且对在糖蛋白和糖肽上测定的单糖组成与先前其他技术相比较具优势。GOMIS 等[14]用ABEE 对苹果酒进行衍生后，采用HPLC-UV 法测定醛糖（葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、核糖、焦糖和鼠李糖）和糖醛酸（d-葡萄糖醛酸、d-半乳糖醛酸）含量，平均回收率为90%～102%，准确度较高，RSD ＜5%。ABEE 适用于各种糖的衍生，它可以消除因旋光作用而形成的对偶物，衍生反应无副产物产生，衍生化试剂峰在最后流出，不会干扰待测物的检测，衍生后的物质可直接进样。与其他衍生化试剂相比，ABEE 减少了衍生后处理这一步骤，进样更加方便。UV 检测器灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度变化不敏感，可用于梯度洗脱分离，但因其复杂的衍生过程，HPLC-UV 测定糖的实验耗时都较长。

（2）荧光检测器。FLD 适用于痕量组分和能显示荧光的物质检测，而糖类无荧光特性，需衍生处理后才能进行检测。可用作糖类荧光衍生化试剂的有对氨基苯甲酸（Para Aminobenzoic Acid，PABA）、苯并吖啶酮-5-乙酰肼（BAAH）、芴甲氧基羰酰氯（Fluorene Methoxy Carbonyl Chloride，FMOC-Cl）等。PABA 是HPLC-FLD 法中最常用的衍生化试剂，XU 等[15]将多糖经脱酯、萃取、水解、PABA 衍生，得到荧光标记的单糖化合物，最后通过HPLC-FLD 检测黄精和玉竹中7 种单糖，其建立的方法灵敏度高、特异性强、线性关系好、回收率高，为多糖的研究提供了一种可行的分析工具，对黄精和玉竹多糖的研究结果可为天然药物工业提供一定指导。ZHANG 等[16]用BAAHHPLC-FLD 法处理分析宽叶羌活根、茎和叶中多糖中单糖组成，结果表明，BAAH 衍生化大大增加了单糖的疏水性，并使它们在增加的保留时间下洗脱，而宽叶羌活根、茎和叶中多糖主要由D-半乳糖和D-葡萄糖组成。林启山等[17]用FMOC-肼和FMOC-Cl 对10 种单糖进行衍生后用荧光检测器测定，且用同样的方法测定了胎球蛋白和转铁蛋白中寡糖链的单糖组成。FMOC-Cl 因有毒有害且具有腐蚀性，在糖分析处理中较少使用。FLD 选择性好、准确度高，但是与UV衍生类似，操作烦琐、耗时较长。

（3）示差折光检测器。RID 通过连续测定色谱柱流出物的光折射率变化测定溶质浓度，所以凡是与流动相光折射率有差别的样品都可以用其检测。陈智毅等[18]采用HPLC-RID 法检测5 个白色金针菇子实体中的单糖和双糖，结果表明，这5 个样品中共含有木糖、果糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、蔗糖和乳糖7 种糖，每个样品中各种糖含量、种类都有差异，但都以果糖和乳糖为主。刘玉峰等[19]用HPLC-RID 法检测食品中的单糖和双糖，外标法定量，每份样品测试3 次，其结果RSD 均小于5%，精密度较高，回收率＞99.7%， 准 确 度 较 高。ZAKHAROVA 等[20]用HPLC-RID 法测定葡萄酒、果汁、蜂蜜、乳制品及饼干中的单糖、双糖和甜味剂，液体样品中葡萄糖、果糖和蔗糖的检测限为0.1 g·L-1，木糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖和山梨醇的检测限为1 g·L-1；固体样品中葡萄糖、果糖和蔗糖的检测限为0.1%，木糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖和山梨糖的检测限为0.6%。RID 操作简单，对糖类灵敏度较高，是食品中应用较多、较广泛的方法，但其对温度、流动相组成变化敏感，不能梯度洗脱，检测限与UV 相比较低，不适合含量低的杂质糖检测。

（4）蒸发光散射检测器。蒸发光散射检测器先用惰性气体雾化洗脱液，然后让流动相在加热管中蒸发，最后剩下的未挥发溶质颗粒在光散射检测池中被检测。NOGUEIRA 等[21]采用ELSD 对啤酒中碳水化合物的HPLC 方法进行了优化和验证，分别在果糖0.05 ～5.00 g·L-1，葡萄糖0.05 ～5.00 g·L-1，麦芽糖0.05 ～15.00 g·L-1，麦芽三糖0.05 ～10.00 g·L-1，麦芽四糖0.05 ～5.00 g·L-1的线性范围内进行测定，检出限 分 别为0.005 g·L-1、0.008 g·L-1，0.010 g·L-1、0.010 g·L-1和0.010 g·L-1，RSD 为1.59%～5.95%，回收率为94 %～98.4%。林慧等[22]采用HPLC-ELSD法测定食品中的5 种糖（葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖）和5 种糖醇（赤藓糖醇、木糖醇、山梨糖醇、甘露醇、麦芽糖醇），结果表明，5 种糖和5 种糖醇均在0.2 ～20.0 mg·mL-1线性关系良好，RSD ＜5%，回收率为91.53%～105.20%，灵敏度高，重现性好。HPLC-ELSD 法可以检测不含发色团的化合物，操作简单，对温度变化不敏感，基线稳定，适合梯度洗脱，但其灵敏度和重现性差，且过程需蒸发溶剂，故只能选择有挥发性的流动相，且样品的挥发性必须小于流动相挥发性。HPLC-ELSD 法是现今食品中糖类物质检测最常用的方法。

（5）荷电气溶胶检测器。CAD 是在检测器内将分析物转化成溶质颗粒，溶质颗粒与带正电荷的氮气相撞，电荷随之转移到颗粒上，溶质颗粒再把它们携带的电荷转移到收集器，然后通过高灵敏度的静电检测计测出溶质颗粒的带电量，由此产生的信号电流与溶质的含量成正比。CAD 可实际应用于任何非挥发或半挥发性化合物的测定，如药物、碳水化合物、蛋白质、多肽、类固醇和脂类等。GREMBECKA 等[23]采用HPLC-CAD法，经Shodex Asahipak，NH2P-50 4E，5 μm壳状颗粒填充柱（4.6 mm×250 mm）分离后，同时测定葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、赤藓糖醇、甘露醇、麦芽糖醇、山梨醇和木糖醇，实验验证了该方法的线性、精密度和准确度，9 种样品的检出限和定量限分别为0.12 ～0.44 μg·mL-1、0.40 ～1.47 μg·mL-1。张雪等[24]利用HPLC-CAD 法同时测定白及中的果糖、葡萄糖、甘露糖、蔗糖，采用Xbridge Amide 色谱柱进行分离，结果显示分离效果良好，25批白及样品的果糖、葡萄糖、甘露糖、蔗糖的平均含量分别为5.90 ～28.51 mg·g-1、11.53 ～ 37.86 mg·g-1、0.40 ～ 2.19 mg·g-1、11.13 ～53.72 mg·g-1。CAD 与ELSD 相比，灵敏度更高、检测限更低，可以检测纳克级别的化合物，且检测与化学结构无关，具有反应重复性好、操作简单、维护成本低等特点，是常规食品分析的理想选择，但是CAD 价格是其他检测器的数倍，维护较麻烦。

1.4.2 气相色谱法

气相色谱（Gas Chromatography，GC）是基于样品中各组分在气相和固定液液相间的分配系数不同而进行分离。GC 分离效能高、分析速度快、灵敏度高，适合复杂混合物的分析。糖是不易挥发和热不稳定的化合物，熔点较高，用GC 检测前必须进行衍生化处理，极大地限制了GC 用于糖类分析的发展。对于糖的衍生，常用方法有甲基化、乙酰化、三氟乙酸盐化和三甲基硅基化等[25]。气相色谱检测单、双糖时主要耦合火焰离子化检测器（Flame Lonization Detector，FID）和质谱检测器（Mass Spectrometry，MS）使用。

（1）火焰离子化检测器。FID 利用氢火焰作为能源，当待测物进入火焰则在高温下电离，产生比基流高几个数量级的离子，在高压电作用下形成离子流，其经高电阻放大转化为电信号，再根据电信号进行定量分析。CAI 等[26]将烟草进行加压液体萃取，用乙酸醛腈法与邻甲氧基肟-三甲基硅基法联用进行衍生化和超声辅助分散液液微萃取处理后，采用GC-FID法分析主要碳水化合物，在最优实验条件下，对3 个烤烟品种的碳水化合物含量进行了分析，检测到葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖和肌醇。KAŠKONIENĖ 等[27]采用1-(三甲基硅基)咪唑衍生样品，GC-FID 法分析26 份蜂蜜样本，结果表明，所有样品均含果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、异麦芽糖、松二糖、海藻糖、异麦芽酮糖、纤维二糖、棉子糖和潘糖，其中有22 个样品以葡萄糖为主。FID 灵敏度高，线性范围宽，但对含羰基、羟基、卤代基和胺基的有机物灵敏度很低或根本无响应，所以测试糖类物质时需经衍生处理。

（2）质谱检测器。气相色谱-质谱联用仪（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）具有高分辨率的气相色谱和高灵敏度的质谱，被广泛应用于复杂组分的分离和鉴定。MS 通过对样品离子的质荷比分析而实现对样品的定性和定量，是测定复杂化合物的有效手段。SANZ 等[28]用三甲基硅烷基化试剂将不同的水果汁衍生化后，用GC-MS 测定果汁中的肌醇和单双糖，结果表明，果汁中均含有葡萄糖、果糖和蔗糖，不同类型的果汁中3 种糖含量的差异很大。DE LA FUENTE 等[29]用氯羟胺、六甲基二硅氮烷处理蜂蜜后，用GC-MS 定量测定出了2 个单糖，14 个双糖和21 个三糖。GC-MS 可以分析出化合物的分子量、元素组成、分子式和分子结构，在定性检测和定量检测两方面都很受欢迎。GC-MS 兼备了色谱的高分离能力和质谱的强定性能力，灵敏度高、检测快速，但是其与GC-FID 一样需要衍生处理。

1.4.3 离子色谱法

离子交换色谱（Ion Chromatography，IC）利用待测组分与固定相之间发生离子交换的能力差异而实现分离。离子交换色谱灵敏度高、分析效果好、分析速度快，几分钟内可完成一个样品的检测。分析糖类物质时，离子交换色谱-脉冲安培检测（IC-PAD）法得到了广泛应用，其无需衍生即可分析单糖和大多数寡糖、低聚糖。LO COCO 等[30]将巧克力样品经适当稀释和纯化后，在PA10 色谱柱上注射，采用高效阴离子色谱-脉冲安培法检测巧克力基质中葡萄糖、果糖、蔗糖和乳糖的含量，用外标法定量，实验重复性好，准确率高。杨晓敏[31]采用离子交换色谱-脉冲安培检测法分析乳制品中的果糖、葡萄糖、半乳糖、蔗糖和乳糖，结果表明，这5 种单双糖含量在0.1 ～20.0 mg·kg-1线性关系良好，回收率高。离子交换色谱法测试不同样品时，对溶液pH 要求较高，所以需根据不同样品需求调节合适的pH 值。

1.4.4 毛细管电泳法

毛细管电泳（Capillary Electrophoresis，CE）是LC和GC 技术中一个新颖、有吸引力的替代技术，是一种具有高效益、高分离速度和大量的理论板等优点的电驱动分离技术。CE 不需过多样品和试液，仅需要微量（微升)的缓冲液、有机溶剂和添加剂即可进行实验。但有时会出现由于进样量过低（纳升）和毛细管内径小而导致的检测灵敏度低的现象。此外，CE可以很容易地与各种光学和电化学探测器耦合。毛细管电泳系统已成功地应用于单、双糖的分离和测定。

在光度检测中，由于糖类物质缺乏发色团，需要柱前衍生化或其他转化，也可以采用间接吸光度检测，需将离子发色团添加到背景电解质中，如2,6-吡啶二羧酸、马来酸和邻苯二甲酸、山梨酸、1-萘乙酸、2,6-吡啶二羧酸。林雁飞等[32]以α-萘胺为衍生剂，用毛细管电泳法对蜂蜜中7 种单双糖的衍生物进行分离检测，回收率为100%～105%，RSD ＜2%。郭建敏等[33]利用高效毛细管区带电泳法直接分离和测定了不同果汁中的糖类物质，外标定量法分析果汁中的主要糖类物质，结果表明，4 种果汁中含量较高的糖类均为果糖、葡萄糖和蔗糖，木糖、麦芽糖和山梨醇含量较低，不同品种间差异较大。RAMÍREZ 等[34]采用CE 间接紫外检测法对蔗糖、麦芽糖、麦芽糖、葡萄糖和果糖5 种糖进行了全电泳分离，以1-萘乙酸为背景电解质，pH 值为12.5，间接紫外检测波长为222 nm，毛细管（75 μm×120 cm），电压为25 kV 的条件下，在50 ～400 mg·L-1得到线性校正曲线，测得结果准确度高，线性良好，此外，该方法无需标记即可确定单糖、二糖和三糖。

1.4.5 红外光谱法

糖类物质在红外波长范围内具有特定的吸收，所以可以通过红外光谱分析单糖和双糖。红外光谱在单、双糖分析时需要同时在多个波长下测定吸光度，然后使用特殊的多元统计技术将光谱数据与所选组分的浓度联系起来。采用多元线性回归（MLR）或偏最小二乘（PLS）回归方程等方法建模分析，可根据所选波长的吸光度值预测各组分的浓度[35]。红外光谱法成本低、检测速度快，但易受环境影响而导致基线不稳定，且糖的结构相似，它们的光谱会相互重叠，影响结果判断。

HUANG 等[36]采用衰减全反射-中红外光谱（ATR-MIR）法测定大麦芽中葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖，分析了100 个麦芽样品，用HPLC 法测定单个糖的浓度，PLS 回归模型对葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的交叉验证确定系数（R2）分别为0.64、0.84、0.80、0.60；交叉验证标准误差（SECV）分别为1.38 mg·mL-1、0.12 mg·mL-1、8.30 mg·mL-1、0.91 mg·mL-1。

CASCANT 等[37]利用衰减的全反射率傅里叶变换红外光谱，建立了3 个独立PLS 回归模型，用于直接测定葡萄糖、果糖和麦芽糖，预测的均方根误差在7.04 ～12.55 mg（糖）/g（样品）。目前的ATRFTIR-PLS 方法能够准确、快速的测定，无需消耗溶剂或产生有毒废物。SHEN 等[38]采用傅里叶变换中红外光谱快速测定黄酒中糖和酸的含量，采用PLSR 建立了与糖含量和酸度相关的11 个参数的校正模型，即总糖、非糖固体、葡萄糖、麦芽糖、异麦芽糖、异麦芽糖、泛糖、总酸、氨基酸氮、pH 值和乳酸，在校正步骤中，大部分参数能被准确确定，但异麦芽糖和异麦芽糖的预测结果不理想。LOHR 等[39]分别对菊花和天竺葵插枝的完整插枝和离体叶片上下侧进行了近红外光谱分析，建立了叶片中葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉的偏最小二乘校准模型，用逐步酶光度法对其进行了分析，单糖和可溶性糖含量的校正模型较差，而淀粉和淀粉可溶性糖含量的校正模型较好。

ILASLAN 等[40]利用拉曼光谱技术快速、低成本地定量分析商品软饮料中的葡萄糖、果糖和蔗糖，利用拉曼光谱数据建立标定模型并绘制曲线，采用PLS回归方法对光谱数据进行分析，对软饮料中糖的含量进行预测，葡萄糖、果糖、蔗糖的回归值的斜率分别为0.967、0.992、1.008，检验的决定系数（R2）值分别为0.913、0.998、0.993，并采用HPLC 方法验证了拉曼光谱法的有效性。

2 展望

随着现今分析仪器的快速发展进步，单糖、双糖分析技术发展迅猛，方法多种多样。目前最常用的检测方法是HPLC 法，HPLC 可耦合多种检测器，测糖时可分为需衍生与无需衍生两类。需衍生的有UV、FLD，因为衍生化操作耗时长、步骤烦琐，且衍生过程可能引入杂质，所以HPLC-UV、HPLC-FLD 通用性大大降低。RID、ELSD、CAD 无需衍生，操作简单。物理方法和化学方法有一定局限性，误差相对较大。生物法是最为通用的方法，其不需要任何特殊的重型仪器，但在一个分析系统中有两种或更多的酶时会难以判断，与色谱和电泳方法相比，这种生物分析系统的实际用途是有限的，只能测定某种特定的糖。GC不需要使用超纯有机溶剂，但其也要进行衍生化处理，限制了GC 在糖类分析上的发展。IC 灵敏高，分析速度快，PAD 的应用增加了这种检测方法的选择性，但IC 有时存在信号不稳定的问题。CE 是一种比较经济的新型技术，分离效率高、分析时间短，样品和试剂消耗极低。IR 是一种相对便宜、非破坏性和非常快速的技术方法，可以应用于原始样品的分析，并允许在一次运行中确定少数成分，但它需要通过化学计量来处理分析数据，而且对外部条件较为依赖，并需要对每个样品基体的变化进行优化。

综上所述，每种测定糖的方法都有其优缺点，可以进行破坏性或非破坏性分析、特殊分析物或多分析物的检测、常规应用或偶然应用等。气相色谱、生物酶法因其局限性与特殊性，难以发展，而由于色谱柱技术的发展，液相色谱将会不断完善，成为更有前途的分析方法；离子色谱、毛细管电泳和红外技术无需衍生化，无有毒物质产生，与绿色化学要求兼容，符合绿色发展要求，有望成为单糖和双糖分析检测的标准化方法。