2016—2021年血型血清学实验室间质量评价结果分析*

周刘祥,谢毓滨,旷开其,阳智芬,彭俏,王清(长沙血液中心输血研究所,长沙410001)

输血相容性检测的准确性是保证患者用血安全的重要因素,参加实验室间质量评价(室间质评)是评价实验室检测能力的重要手段[1]。为提高血型血清学实验室检测的准确性,更好地服务临床输血,本研究回顾性分析本实验室参加2016—2021年WHO中国地区血型血清学输血室间质评(以下简称WHO-NEQAS)中与参考答案的不符项,审视本实验室的问题和不足之处,举一反三分析日常检测中可能影响到检测质量的因素,如人员培训、试剂和方法的选择、环节质控等内容并提出解决策略;同时通过与WHO-NEQAS实验室沟通交流,反馈其中存在的问题,有利于WHO-NEQAS方案的持续优化。

1 材料与方法

1.1数据来源 本实验室2016—2021年参加WHO-NEQAS的12份报告,室间质评样本由上海市血液中心血型参比实验室发放,每年发放2次,每次含21个项目,共计252项。

1.2主要试剂与设备 抗A、抗B血清(长春博德公司),ABO试剂红细胞(上海血液公司),抗D血清(上海血液公司、英国Millipore公司、荷兰sanquin公司),抗人球蛋白(上海血液公司、荷兰sanquin公司),微柱凝胶卡(荷兰sanquin公司), 筛选细胞(上海血液公司、荷兰sanquin公司), 谱细胞(上海血液公司、荷兰sanquin公司);KA-2200血清学离心机(日本久保田公司),恒温孵育器(美国Bio-Rad公司)。

1.3检测方法 采用试管法和微柱凝胶法检测,具体操作步骤依据《全国临床检验操作规程》[2]参照执行。

2 结果

2.1WHO-NEQAS结果 12份报告结果均为满意,Z值均值为0.53,其中有6份结果为0,有3份Z值相对其他报告略高。ABO定型项目参考答案不仅包含了3种临床常见血型,还设置了一份亚型样本;RhD定型阳性率80.6%,涵盖了阳性、阴性、变异型及有输血史患者的检测,其中D变异平均符合率只有47.9%。36项抗体筛选中,抗体阳性率为44.4%,其中多重抗体占25.0%(9/36),远高于临床[4],且多重抗体鉴定的平均符合率仅55.8%,可见对RhD阴性、D变异及复合抗体鉴定是WHO-NEQAS的重点和难点。2016—2021年WHO-NEQAS项目参考答案分布见表1。

表1 WHO-NEQAS项目参考答案分布情况

2.2WHO-NEQAS中抗体分布情况 16例抗体鉴定项目中检出27个抗体,覆盖了6个系统的12种类型,3项中含有不确定抗体,排名前三的系统分别为Rh血型系统59.26%(16/27)、MNS血型系统11.11%(3/27)和Lewis血型系统7.41%(2/27),与临床上检出的不规则抗体分布基本一致[4],见表2。

表2 抗体鉴定的抗体分布

2.3本实验室结果与参考答案不符合情况 252项结果中,本实验室符合率为94.0%(238/252),有15项与参考答案不一致,主要分布在RhD定型和抗体鉴定项目中,产生罚分的11项包括ABO定型1项、RhD定型4项、抗体鉴定5 项和交叉配血1项,其中抗体鉴定罚分均为复合抗体。在4例不符合且未予罚分项结果中,18N2-1归于WHO-NEQAS首次考察D变异而未设置该项;16N2-2样本发放后随着时间推移Leb抗体效价由1下降至更低;16N2-3中由于大多数品牌的筛选鉴定细胞中不包含Wra抗原。见表3。

表3 本实验室结果与参考答案不符合的分布

3 讨论

2016—2021年本实验室12次质评结果均为满意,Z值分布无趋势现象,252项检测结果整体符合率为94.0%(238/252),反映出本实验室总体水平较好。其中有3份新员工参与检测的Z值相对其他报告略高,提示在日常工作中应注意加强对新员工处理疑难样本的带教、指导和培训,严格执行双人复核的工作模式。

本实验室在ABO定型中21N2-3的不确定为AB3型,试管法中抗B、抗AB常呈3+以上强阳性混合凝集,很容易误判为AB型[5];试管法判断结果时,应注意多次离心结合使用显微镜,有条件的可联合采用微柱凝胶法避免亚型的漏检。在RhD定型中19N2-1的不符合归于检测人员忽略了近期输血史这一重要的临床信息,导致混合凝集现象的漏检,此类样本可使用毛细管超速离心法辅助判断[6];21N2-1不符是由于样本直接抗球蛋白试验和自身抗体阳性对鉴定的影响,该类样本可通过放散方法或采用木瓜酶处理至直接抗球蛋白试验阴性后实验[7-8];21N2-3血清学反应凝集呈2+s,对献血者的判定习惯将其判为阳性,提示应重视弱反应结果,规范RhD结果的判定标准。抗体鉴定的3例多检、2例漏检罚分均与Rh血型抗体相关,这对人员在谱细胞格局微弱差异的辨析能力提出挑战;17N1-3、18N2-2和19N1-2的多检样本其血浆内均含有自身或不确定抗体,复合或多重抗体的存在导致格局不清晰,应注意参照抗体筛选结果、自身红细胞表型、血清学增强技术等措施辅助鉴定[9]。交叉配血17N2-3与3号献血者的罚分是由于患者体内的弱抗e抗体的漏检导致假阴性。

综上所述,本实验室通过参加WHO-NEQAS,对自身的检测能力有了一个客观的评估;针对室间质评中出现的问题提出改进措施,做好实验室质量控制,不断提高实验室的检测能力,保障临床输血安全。