MPP患儿肺泡灌洗液中Gal-3 IL-33表达及MP载量中性粒细胞比例水平检测与相关性分析

樊梦洁, 杨 遥

(湖北省宜昌市第一人民医院/三峡大学人民医院儿科, 湖北 宜昌 443000)

肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)是由肺炎支原体引起的肺炎,好发于儿童[1]。临床常表现为干咳、发热等症状,若不及时治疗,还会出现心脏肾脏等多器官损害,严重影响患儿的生命健康[2]。一般采用肺泡灌洗液(BALF)做病原微生物检查来确定病原菌,其是通过支气管镜进入气道,将生理盐水注入支气管肺泡,并收集肺泡的分泌物进行实验室检查。MPP发病原因和机理尚不清楚,但目前针对细胞因子在MPP患儿肺泡灌洗液中诊断、治疗等方面的研究越来越多[3]。其中半乳糖凝集素-3(Gal-3)是某种吞噬细胞合成分泌的糖蛋白,白细胞介素-33(IL-33)是来自IL-1家族的组织来源的核细胞因子,在稳态和炎症期间,均可在内皮细胞、上皮细胞等细胞中大量表达。目前对于Gal-3、IL-33在MPP中的表达研究较多,其多表示Gal-3、IL-33在MPP患儿中呈高表达。但在MPP患儿肺泡灌洗液中的表达情况以及与MP载量的相关性研究还不充分,因此本研究将MPP患儿肺泡灌洗液中Gal-3、IL-33表达与MP载量进行相关性分析,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料:选取2020年1月至2022年3月在我院治疗的MPP患儿102例作为观察组,其中轻症患儿59例,重症患儿43例,同时选取因支气管异物就诊患儿60例作为对照组,纳入标准:①MPP诊断符合《诸福棠实用儿科学》[4]和《儿童社区获得性肺炎管理指南》[5]中的标准:即胸片显示肺纹理增多,可见斑点状、斑片状等阴影,血清肺炎支原体抗原阳性;对照组患儿异物吸入时间≤24h;②重症为满足以下任意一项:有坏死性肺炎表现;影响呼吸功能或合并其他系统功能障碍;合并闭塞性细支气管炎;合并全身炎症反应综合征;患儿起病急且病情重,单一大环内酯类抗生素治疗效果不好;③年龄3～14岁;④接受支气管镜检查;⑤患儿监护人知情同意。排除标准:①合并有其他病原体感染;②合并有先天性心脏病、支气管哮喘、免疫缺陷疾病等其他疾病;③近14d内有免疫抑制剂、激素等药物服用史。观察组和对照组患儿临床一般资料比较见表1,具有可比性。

表1 观察组和对照组临床一般资料比较

1.2支气管肺泡灌洗及指标检验方法:使用视野角为100度、视野方向0度,景深为3-50mm,弯曲部弯曲角上为180度,下为90度的纤维支气管镜,进行利多卡因气道黏膜麻醉,并经于鼻、会厌到支气管各段,再给予2mL生理盐水进行支气管肺泡灌洗,并将灌洗液收集起来送检。采用转速为1000r/min的离心机,离心半径为10cm,离心处理20min,分离血清,采用酶联免疫试剂盒(苏州博园医疗科技有限公司提供)检测半乳糖凝集素-3(Gal-3)、白细胞介素-33(IL-33)、肺炎支原体(MP)-DNA载量、中性粒细胞水平。

2 结 果

2.1观察组和对照组肺泡灌洗液检查结果比较:观察组肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA载量、中性粒细胞和巨噬细胞明显高于对照组(P<0.05);观察组和对照组肺泡灌洗液淋巴细胞、嗜酸性粒细胞比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 观察组和对照组肺泡灌洗液检查结果比较

2.2观察组轻症和重症患儿肺泡灌洗液检查结果比较:观察组重症患儿肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA载量、中性粒细胞明显高于轻症患儿(P<0.05)。见表3。

表3 观察组轻症和重症患儿肺泡灌洗液检查结果比较

2.3观察组轻症和重症患儿治疗前后肺泡灌洗液检查结果比较:观察组轻症和重症患儿治疗后肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA载量、中性粒细胞和巨噬细胞较治疗前降低(P<0.05)。见表4。

表4 观察组轻症和重症患儿治疗前后肺泡灌洗液Gal-3等比较

2.4观察组肺泡灌洗液Gal-3等指标相关性分析:将观察组肺泡灌洗液Gal-3、IL-33等与MP-DNA载量进行相关分析,结果显示:肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、中性粒细胞与MP-DNA载量呈正相关,其余相关性无统计学意义(P>0.05)。见表5和图1。

图1 观察组肺泡灌洗液Gal-3、IL-33等与MP-DNA载量关系散点图

表5 观察组肺泡灌洗液Gal-3等指标相关性分析

3 讨 论

肺炎支原体肺炎是由肺炎支原体引起的一种间质性肺炎,多数为亚急性起病,发热无定型,临床症状以干咳为主,治疗不及时还会出现心血管系统、神经系统损害等多系统多器官的损害[6]。近年来临床常采用Gal-3、IL-33诊断肺炎支原体肺炎,其中Gal-3在细胞黏附、炎症反应等过程中发挥重要作用[7]。IL-33是由T淋巴细胞所产生,能够刺激参与免疫反应的细胞增殖、分化并提高其功能。但目前对于Gal-3、IL-33在MPP患儿BALF中的表达研究较少。

本研究对两组患者肺泡灌洗液Gal-3等进行比较,结果显示观察组肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA载量、中性粒细胞和巨噬细胞明显升高,表明MPP会导致免疫系统紊乱。中性粒细胞具备固有的吞噬能力,当发生免疫系统紊乱,中性粒细胞被激活,从而清除外来病原体和加载靶点,促使中性粒细胞增殖分化[8]。另外还会导致巨噬细胞合成,释放多种细胞因子对细胞残片及病原体进行噬菌作用,促使巨噬细胞增殖分化,令其对病原体作出反应。在此过程,Gal-3可与中性粒细胞和层粘连细胞联合,促使Gal-3增殖分化,来激发肥大细胞和碱性粒细胞的活化,进而发挥炎症调节作用,因此表现为Gal-3、中性粒细胞和巨噬细胞水平升高。同时有研究表示,IL-33水平异常与许多疾病的发生与发展有密切的关系[9]。其是炎症细胞因子,分布在人体各个组织器官以及各类免疫细胞中,而在肺部主要存在于肺泡上皮细胞中,而当肺泡上皮细胞感染受损或坏死,则会导致大量IL-33释放,并与其受体结合,发生炎症反应,致使IL-33过量表达[10]。

本研究对两组患者轻症和重症患儿肺泡灌洗液Gal-3等进行比较,结果显示观察组重症患儿肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA载量、中性粒细胞明显高于轻症患儿,表明Gal-3、IL-33、MP-DNA载量、中性粒细胞升高提示患儿病情加重。有研究表明,Gal-3、IL-33可参与免疫反应的细胞增殖、分化并提高其功能。因MPP重症患儿体内致病菌难以清除,造成免疫炎性反应强烈,导致炎性细胞因子大量释放,从而促使支原体感染激化呼吸道血管内皮细胞内Gal-3、IL-33生成,中性粒细胞分泌增加,引起炎性细胞趋化、增殖,释放炎性介质,加重气道高反应性,导致MMP患儿症状加重。其中IL-33高表达可造成活性蛋白激酶被激活,导致白细胞介素过度分泌,从而促进气道黏液分泌致使病情加重。Gal-3过量导致中性粒细胞粘附、巨噬细胞激活,造成MMP患儿炎性反应失控,导致病情加重。本研究还对两组患者轻症和重症患儿治疗前后肺泡灌洗液Gal-3等比较,结果显示观察组治疗后轻症、重症患者肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA载量、中性粒细胞和巨噬细胞较治疗前降低,进一步表明Gal-3、IL-33、MP-DNA载量、中性粒细胞水平与患儿病情严重程度有关。

本研究将观察组肺泡灌洗液Gal-3、IL-33等与MP-DNA载量进行相关分析,结果显示肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、中性粒细胞与MP-DNA载量呈正相关,说明Gal-3、IL-33、中性粒细胞分泌与MP-DNA载量密切相关。当MP感染时,巨噬细胞发挥吞噬作用,从而清除病原体,减少巨噬细胞含量,同时肺损伤严重程度加重,导致细胞免疫与体液免疫反应增强;又因患者体内感染病菌过多,促使Gal-3、IL-33、中性粒细胞水平分泌过多,因此肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、中性粒细胞水平可反映MPP严重程度,可以为MPP的诊断和病情评估提供依据。

综上所述,MPP患儿肺泡灌洗液中Gal-3、IL-33、MP-DNA载量及中性粒细胞比例明显升高,与患儿病情严重程度有关,同时肺泡灌洗液中Gal-3、IL-33、中性粒细胞与MP-DNA载量呈正相关。