基于高效液相色谱法的即食食品中山梨酸含量测定

食品添加剂是现代食品工业的重视组成部分，在合理范围内使用食品添加剂不会对人体健康造成影响，但过量或超范围使用食品添加剂就会适得其反。针对市场上的即食食品进行质量安全检验时发现，山梨酸、脱氢乙酸等是使用较多的食品添加剂，其中山梨酸能够较好地抑制细菌、霉菌的生长与繁殖。我国已发布了相关法律法规与标准，用于规定与约束即食食品中添加剂的含量，但部分食品生产与加工单位为了提高食物的保质期，或使食品具有更好的品相，仍存在违规使用食品添加剂的行为。

针对这一问题，食品安全卫生监督管理部门采取了对地方企业抽查、对市场产品集中调查的方式，來检测即食食品中添加剂的含量与种类。不过，使用现有的技术开展检测工作，不仅无法满足对于大量样品的快速检测需求，还会对即食食品合作销售点的产品营销造成一定的困扰，因此有必要研制一种可以快速高效地检测即食食品中添加剂的方法。本研究引进高效液相色谱法，设计出针对即食食品中山梨酸含量的测定方法，旨在提高市场上即食食品的安全性，为消费者购买即食食品提供全面的保障，也便于监管部门对即食食品安全问题进行处理与集中整治。

一、材料与仪器

为实现对即食食品中添加剂含量的精准测定，在开展相关研究之前，应根据此次测定试验的需求设计试验样品与材料，如表1所示。然后根据此次试验的需求，选择相应的试验仪器和设备，如表2所示。

二、实验与方法

1.样品的预处理。（1）用电子天平称取即食食品样品4.5g，放置到50mL的离心管中，再加入浓度为5mol/L-6mol/L的盐酸试剂0.75mL，然后使用高速离心机离心搅拌样本，加盖涡旋20-40s，使样品快速酸化。（2）在装置中加入乙醚溶液18-22mL，加盖涡旋15-25s，再将其放置在高速离心机中，以8000r/min的速度离心处理2-4min。（3）使用滴管采集乙醚层溶液，将其放置在圆底的烧瓶中，使用水涡旋转处理，当样品处于均匀混合的状态后，在其中加入甲醇溶液1-2mL，混合处理样本溶液后在其中加入水7-10mL，涡旋混匀。

2.样品的制备。（1）先用滴管将上述样本溶液吸取到固相萃取小柱中，再用浓度为0.5mol/L的盐酸溶液2.5-3.5m L淋洗处理样本，以此净化试验样品。（2）使用至少5mL的甲醇溶液对样本进行洗脱处理，再使用氮吹管对样本清洗脱液。（3）按照甲醇∶水=3∶7的比例，配备定容溶液1-2mL，再将样品放置在指定容器中，使用直径为0.45μm的滤膜过滤处理样品，将其作为待测样品。

3.样品的酸化处理。（1）用滴管吸取少量的混合样本（吸取量控制在2.5-4.5g）并置于离心管中，在其中加入浓度为0.05mol/L-0.15mol/L的NAOH溶液40-60mL，再在室温条件下振荡处理至少1min，然后静置样本材料1min。（2）在样本中加入乙醚溶液25-35mL，确保材料静置出现分层后，使用盐酸试剂对样本进行酸化处理。（3）用酸碱度检测试纸检测当前状态下溶液的酸碱度，当酸碱度控制在1-2时，收集样本材料中的有机相，以供后续即食食品中山梨酸含量的测定分析。

三、结果与结论

1.山梨酸含量测定结果分析。使用固相萃取小柱获取净化前与净化后的试验样品，根据即食食品中山梨酸具有吸光性的特点，展开即食食品样品中山梨酸含量的测定。测定过程中，将净化前的试验样品标注为样品①，将净化后的试验样品标注为样品②，色谱测定结果如图1与图2所示。

使用高效液相色谱法，可以掌握样本材料在指定条件下的吸光度，从而精准测定即食食品样品中山梨酸的含量。深入分析图1与图2色谱图中曲线的走向时可以发现，样品②的色谱图中只有一条色谱柱，对应即食食品样品中山梨酸物质的吸光度；样品①的色谱图中含有多条色谱柱，其中第四条色谱柱对应即食食品样品中山梨酸物质的吸光度，其他三条色谱柱对应即食食品样品中其他物质的含量。

尽管本研究设计的实验方法可以实现对即食食品样品中山梨酸含量的测定，但未经过净化处理的样品①的测定结果中存在干扰条件，即多条色谱柱，说明未经过处理的样品①的测定结果极易受到外界条件或其他因素的影响而出现偏差。因此，可得到如下结论：基于高效液相色谱法可以实现对即食食品中山梨酸含量的精准测定，但为了满足测定结果的排除干扰需求，应在测定过程中根据相关工作的具体需求，做好对样品前处理的净化处理工作，避免或降低外部干扰条件对即食食品中山梨酸含量测定结果的影响。

2.回收率与测定结果精准度分析。完成对本研究提出方法的可行性校验后，设计加标试验，检验该方法在实际应用中测定结果的准确率与回收率。在测定过程中，选择若干个空白样品作为对照样品，向空白样品中加入一定量的山梨酸（5-50μg），然后统计测定结果的准确率与回收率，结果如表3所示。

（1）精准度。从表3可以看出，在使用高效液相色谱法测定即食食品中山梨酸物质的含量时，测定结果的精准度较高，即山梨酸添加量与山梨酸实测量之间的偏差较小，基本可以在测定中将结果偏差控制在2.0μg以内，进一步证明了高效液相色谱法在实验中的可行性。

（2）回收率。从表3的回收率统计结果可以看出，在不同的山梨酸添加量下，高效液相色谱法都可以保证试验样品的回收率在95%以上，说明高效液相色谱法可以在实验中降低对样本或实验原材料的浪费。

综上所述，在现代食品加工过程中，适量添加甜味剂、防腐剂等食品添加剂是改善风味、预防腐烂、延长保质期的重要手段之一，但是如果超出标准的剂量范围，就会对人体造成危害。所以，对食品中的食品添加剂进行定性和定量分析，对于保障食品安全具有重要意义。基于此，本研究引进高效液相色谱法，以某供应商提供的即食食品为例，通过准备试验仪器和样品、样本前处理、制备试验样品等方式，设计针对此食品中山梨酸含量的全新测定方法。试验证明，该方法在实际应用中不仅可以降低测定结果的偏差，还可以保证试验样品的回收率保持在95%以上。在后续的研究中，应根据食品安全相关工作的具体需求，尝试将此次设计的方法投入市场使用，充分发挥该方法在实际应用中的效能，更好地保障食品的安全性与可靠性。

作者简介：赵小花（1981-），女，汉族，江苏兴化人，助理工程师，大学本科，研究方向为食品、纺织品检测。