脑膜瘤FASN、HER-2的表达与术后复发的关系

周 龙 田仁富 潘 轲

脑膜瘤是颅内常见的肿瘤，绝大多数为良性，WHO分级1级，手术全切除肿瘤效果良好[1]；而WHO分级2～3 级脑膜瘤（包括非典型脑膜瘤、间变性脑膜瘤），术后复发率显著高于WHO分级1级脑膜瘤，病死率也更高，尤其是WHO分级3级脑膜瘤[2，3]。脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，FASN）为影响细胞脂类代谢的多功能酶，可催化碳水化合物合成脂肪酸，为肿瘤细胞提供能量，促进肿瘤细胞增殖，加速肿瘤生长[4]。人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2，HER-2）属于4种酪氨酸激酶受体蛋白家族之一，主要表达于胚胎发育期，在肿瘤细胞的增殖、分化中具有重要作用，并可通过促进新生血管形成，为肿瘤细胞提供营养，进而促进肿瘤进展[5]。本文探讨脑膜瘤组织FASN、HER-2 的表达及其与术后复发的关系。

1 资料与方法

1.1 病例选择标准纳入标准：①脑膜瘤符合《外科学（第8 版）》[6]中诊断标准；②初次确诊并接受手术治疗；③WHO 分级2～3级[7]。排除标准：①术前接受过脑膜瘤相关治疗；②合并其他中枢神经系统肿瘤；③存在凝血功能障碍或血糖控制不稳定；④合并严重肝肾功能异常或心肺功能不全；⑤存在严重感染或感染急性期；⑥既往颅内手术史；⑦脑膜瘤位于重要功能区，术后可能发生严重肢体功能障碍。

1.2 研究对象2017年9月至2020年9月收治符合标准的脑膜瘤121 例，其中男47 例，女74 例；年龄39～60 岁，平均（51.14±3.71）岁；矢状窦旁31 例，大脑凸面51 例，蝶骨区23 例，其他部位16 例；WHO 分级2级84例，3级37例。

1.3 手术方法全麻下行脑膜瘤切除术。术前根据影像学检查明确肿瘤位置后，取合适体位，选择合适的手术入路。术中翻开皮瓣后游离骨瓣，将硬脑膜悬吊在骨窗边缘；剪开脑膜后，使用超声刀、双极电凝切除肿瘤；彻底止血后修补硬脑膜。

1.4 复发判断标准术后随访1 年，期间每3 个月门诊复诊1 次，每个月电话回访1 次，复查MRI、CT 等明确肿瘤复发情况。

1.5 免疫组化染色取术中切除的脑膜瘤组织标本，使用10%甲醛液固定后常规石蜡包埋切片；脱蜡、水化进行组织抗原修复，加入内源性过氧化酶阻断剂室温孵育10 min；PBS 冲洗3 次，3 min/次；滴加一抗室温孵育60 min；PBS 冲洗4 次，3 min/次；滴加增强剂室温孵育20 min；PBS 冲洗3 次，3 min/次；滴加酶标羊抗鼠/兔免疫球蛋白G 聚合物室温孵育30 min；PBS冲洗3次，3 min/次；加入DAB显色，显微镜下观察充分显色后使用自来水冲洗10 min，加入苏木素复染，使用95%酒精脱水，室温风干中性树胶封片。结果判定：①Ki-67 指数：选取10 个高倍视野，计算每个视野100个细胞Ki-67的阳性细胞占比，并取平均值作为Ki-67 指数，以百分率表达。②FASN表达判定：染色强度（0分为无染色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3 分为褐黄色）与阳性细胞率（<50%为1 分，50%～75%为2 分，>75%为3 分）乘积≤1 分为阴性（-），2分为弱阳性（+），3～4分为中等阳性（2+），5～6 分为强阳性（3+）。③HER-2 表达判定：细胞无染色或染色细胞≤10%为阴性（-）；细胞染色>10%、呈不完整的微弱细胞膜染色为弱阳性（+）；细胞染色>10%、呈不完整的中等强度细胞膜染色，或肿瘤染色<10%、肿瘤呈完整的细胞膜染色为中等阳性（2+）；细胞染色>10%，呈完整的强度细胞膜染色为强阳性（3+）。

1.6 血清检测入院时，采用酶联免疫吸附试验法测定血清肿瘤特异性生长因子（Tumor Supplied Group of Factors，TSGF）水平，试剂盒购自广州科方生物技术股份有限公司。

1.7 统计学分析采用SPSS 25.0软件处理；正态分布计量资料以±s表示，采用t检验和方差分析；计数资料用χ2检验；等级资料用秩和检验和Kruskal-Wallis H检验；采用多因素Cox比例回归风险模型分析脑膜瘤术后复发的影响因素；P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 术后复发率术后1年，肿瘤复发52例（43.0%）；未复发69例。

2.2 术后复发的危险因素单因素分析显示，WHO分级、术前血清TSGF水平、脑膜瘤组织Ki-67指数、脑膜瘤FASN和HER-2表达水平与脑膜瘤术后复发有关（P<0.05；表1）。多因素Cox 回归分析显示，术前血清TSGF 水平高以及脑膜瘤组织Ki-67、FASN、HER-2 高表达是脑膜瘤术后复发的独立危险因素（P<0.05；表2）。

表1 脑膜瘤术后复发危险因素的单因素分析

表2 脑膜瘤术后复发危险因素的多因素logistic回归分析

3 讨论

文献报道，WHO 分级2～3级脑膜瘤术后复发率在35.70%～51.10%[8，9]。本文121例WHO分级2～3级脑膜瘤术后复发率为43.0%，介于上述文献报道结果之间。这说明WHO 分级2～3 级脑膜瘤术后复发风险高。本文结果显示术前血清TSGF 水平高以及脑膜瘤组织Ki-67、FASN、HER-2 高表达的脑膜瘤术后复发风险高。

TSGF 与肿瘤的生长、进展有关，在肿瘤发生早期即被释放至外周血，尤其是神经系统肿瘤[10]。Ki-67为表达于G0期以外细胞的细胞增殖抗原，是临床公认的肿瘤细胞增殖活性指标，其表达水平与肿瘤细胞组织分化、增殖密切相关，处于增殖周期细胞越多，则Ki-67 表达水平越高，肿瘤增殖能力越强，术后复发风险越高[11]。因此，TSGF、Ki-67高表达脑膜瘤病人术后应加强随访。

FASN 是细胞内合成、转运脂肪酸的关键酶，可催化合成内源性脂肪酸为肿瘤细胞的增殖提供能力，是肿瘤细胞生存及恶性变的重要条件[12]。正常情况下，HER-2 在人体胚胎、腺上皮等部位呈低表达，而在子宫内膜癌、前列腺癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中过表达，与肿瘤细胞的增殖、侵袭密切相关[13]。本文结果显示脑膜瘤术后复发可能受脑膜瘤组织FASN、HER-2 高表达的影响。分析原因：FASN高表达可通过β-氧化过程提供蛋白质脂质修饰，促使脂肪酸合成，为肿瘤细胞提供能量，促使脑膜瘤术后复发[14]；同时，FASN 还能激活酪氨酸激酶生长因子受体，并与其形成自动调节的回路，促进肿瘤发生恶性生物行为，导致脑膜瘤术后复发[15]。Duan 等[16]研究表明，胃癌组织FASN 表达与病人临床分期、胃壁浸润及淋巴结、远处转移均存在密切关系，进一步说明FASN表达与肿瘤进展有关。HER-2表达升高可结合酪氨酸激酶受体蛋白家族中其他成员形成二聚体，促使有丝分裂活化蛋白激酶激活，通过JAK、PI3K/AKT 等多种信号传导通路，促进肿瘤细胞增殖、分化，并抑制肿瘤细胞凋亡，进而增加脑膜瘤术后复发风险[17]。此外，HER-2对PI3K/AKT的调控作用，上调血管内皮细胞生长因子水平，促使血管内皮细胞增殖，导致新生血管形成，为肿瘤细胞提供更多的血流供应，增加脑膜瘤术后复发风险[18]。

本文存在一定局限性：首先，本文为单中心研究，未结合其他地区、中心进行验证；其次，研究对象如未纳入WHO分级Ⅰ级脑膜瘤，可能会对研究结果产生一定偏倚；此外，本文纳入的样本量相对较少，而脑膜瘤组织FASN、HER-2表达预测术后复发的意义有待大样本多中心研究进行进一步验证。

总之，脑膜瘤术后复发与脑膜瘤组织FASN、HER-2 表达有关。FASN、HER-2 高表达的脑膜瘤病人术后应密切随访。