子宫珠蛋白相关蛋白1 联合抗甲状腺过氧化物酶抗体定量检测在自身免疫性甲状腺疾病诊断中的应用

郭爱荣，邱瑞敏，王凯

（1.南阳市第二人民医院输血检验科；2.甲状腺乳腺外科，河南 南阳 473000）

自身免疫性甲状腺疾病是指机体对自身抗原发生免疫反应，导致自身甲状腺组织受损，从而引起各类症状的疾病，常见的疾病类型包括桥本甲状腺炎（Hashimoto thyroiditis，HT）、毒性弥漫性甲状腺肿（Grave）及萎缩性甲状腺炎（Atrophic thyroiditis，AT）等[1-2]。本病主要由于自身抗原异常、免疫调节异常、遗传、内源性等因素造成，临床症状主要表现为发热、脱发、乏力及口腔溃疡等，常伴有轻度蛋白尿甚至是并发肾病综合征[3]，给患者的生命安全和生活质量造成严重影响。目前，临床上主要通过自身免疫性甲状腺疾病的自身抗体来诊断疾病，其中抗甲状腺过氧化物酶抗体（Anti-thyroid peroxidase antibody，TPOAb）[4]是本病的主要抗体，作为一种糖蛋白，其水平的变化与甲状腺功能的损伤有关[5]，对疾病的诊断有较好的参考价值。子宫珠蛋白相关蛋白1 (Uterine globin associated protein1，UGRP1)是一种功能尚未完全明确的分泌蛋白，在正常甲状腺组织中有少量表达[6]。既往研究显示，UGRP1 在甲状腺组织中有少量表达，是甲状腺转录因子的下游靶基因，可能参与Grave 的发病过程[7]。因此，本文旨在探讨并分析UGRP1 联合TPOAb 定量检测在自身免疫性甲状腺疾病诊断中的应用。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性选取2020 年2 月至2021年2 月在本院确诊的52 例自身免疫性甲状腺疾病患者作为观察组，根据病因不同分为毒性弥漫性甲状腺肿（Grave）组30 例，桥本甲状腺炎（HT）组22 例，另选同期在本院收治的42 例非自身免疫性甲状腺疾病患者作为对照组。男20 例，女74例，年龄32～53 岁，平均（42.51±3.54）岁。纳入标准：符合自身免疫性甲状腺疾病诊断标准[8]。经医院伦理委员会通过。排除标准：（1）存在其他甲状腺疾病患者；（2）存在恶性肿瘤患者；（3）存在其他心、肺等严重器官疾病患者；（4）存在多种免疫性疾病患者；（5）存在精神疾病者；（6）临床资料不完整者。Grave 组男7 例，女23 例，年龄32～53 岁，平均（42.63±3.70）岁；HT 组男5 例，女17 例，年龄32～53 岁，平均（42.44±3.31）岁；对照组男8 例，女34 例，年龄32～53 岁，平均（42.46±3.26）岁。通过电子病历系统收集所有患者的资料，包括年龄、性别、学历、甲状腺种类、遗传史等。

1.2 检测方法 提前告知所有患者在采血之前需禁食禁饮8 h 以上，在清晨空腹采集所有患者静脉血3 mL 放入无抗凝剂的一次性真空采血管中备用，静置30 min 后离心并分离血清（3 000 r/min，10 min），离心机购自广州吉迪仪器有限公司，将分离后得到的血清置入-20℃条件下保存备用。采用化学发光检测法检测TPOAb，仪器为美国贝克曼库尔特有限公司的UniCel DxI800 全自动免疫分析仪及其配套的试剂盒。UGRP1 采用酶联免疫吸附法 （Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测，试剂和试剂盒均购自武汉博欧特生物科技有限公司。将上层血清放入标记试管中，采用放射免疫分析法检查观察组患者的总三碘甲状腺原氨酸 （Total triiodothyronine，TT3）、血清总甲状腺素（Serum total thyroxine，TT4）、游离三碘甲状腺原氨酸（Free triiodothyronine，FT3）、游离甲状腺素（Free thyroxine，FT4）和促甲状腺激素(Thyroid-stimulating hormone，TSH)水平，仪器为HH6003 型γ 放射免疫分析仪(放射检测仪)，购自上海何亦仪器仪表有限公司，试剂和试剂盒来自武汉楚锐科药业科技有限公司。所有检测步骤严格按照说明书操作进行。

1.3 统计学处理 采用SPSS 18.0 统计学软件进行数据分析，满足正态分布且方差齐的计量资料采用（±s）表示，采用单因素方差分析比较组间差异，计数资料用率表示，采用χ2检验，采用受试者工作曲线(Receiver operating characteristic curve，ROC)分析UGRP1、TPOAb 水平对自身免疫性甲状腺疾病的诊断价值，采用Pearson 分析样本间的关系，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患者的一般资料比较 三组患者的年龄、性别、学历水平、遗传史、不良的生活方式等一般资料无显著差异（P＞0.05）。见表1。

表1 三组患者的一般资料比较（n，%）

2.2 三组患者的TT3、TT4、FT3、FT4、TSH 比较 HT组、Grave 组患者的TT3、TT4、FT3、FT4 水平均显著低于对照组，TSH 水平显著高于对照组（P＜0.05），HT 组与Grave 组的TT3、TT4、FT3、FT4 水平比较无显著差异（P＞0.05）。见表2。

表2 患者的TT3、TT4、FT3、FT4、TSH 比较（±s）

表2 患者的TT3、TT4、FT3、FT4、TSH 比较（±s）

注：与对照组比较，aP＜0.05。

组别nTT3（nmol/L）TT4（nmol/L）FT3（pmol/mL）FT4（pmol/mL）TSH（mU/L）对照组Grave 组HT 组42 30 22 FP 3.46±1.31 1.24±0.35a 1.17±0.26 71.056＜0.001 76.49±4.17 60.47±5.52a 58.46±4.21 154.007＜0.001 5.81±1.29 2.48±1.03a 2.36±1.11 96.831＜0.001 14.28±2.57 8.59±1.17a 7.64±1.25 115.795＜0.001 8.46±1.60 13.41±2.05a 14.53±2.62 85.782＜0.001

2.3 三组患者的UGRP1、TPOAb 水平比较 HT 组和Grave 组的UGRP1、TPOAb 水平均显著高于对照组（P＜0.05），HT 组和Grave 组的UGRP1、TPOAb水平比较无显著差异（P＞0.05）。见表3。

表3 三组患者的UGRP1、TPOAb 水平比较（±s）

注：与对照组比较，aP＜0.05。

组别n对照组Grave 组HT 组42 30 22 FP UGRP1（g/L）2.74±0.59a 3.68±0.73 4.67±0.92 51.811＜0.001 TPOAb（IU/mL）24.35±2.37a 38.36±5.21 40.27±6.32 126.184＜0.001

2.4 UGRP1、TPOAb 水平与甲状腺功能的相关性分析 UGRP1、TPOAb 水平与甲状腺功能呈负相关关系（r=-0.377、-0.407，P＜0.05）。见表4。

表4 UGRP1、TPOAb 水平与甲状腺功能的相关性分析

2.5 UGRP1、TPOAb 水平预测自身免疫性甲状腺疾病的ROC 曲线 UGRP1 在预自身免疫性甲状腺疾病患者的ROC 曲线下的面积 （AUC）为0.773，95%CI 为0.677 ～0.869；TPOAb 的AUC 为0.813，95%CI 为0.726～0.901，联合检测的AUC 为0.898，95%CI 为0.833～0.962。见表5、图1。

表5 UGRP1、TPOAb 水平诊断自身免疫性甲状腺疾病的ROC 特征

图1 UGRP1、TPOAb 水平预测自身免疫性甲状腺疾病的ROC 曲线

3 讨论

自身免疫性甲状腺疾病是一种常见的特异性免疫性疾病，在患者血清中可检出针对甲状腺抗原的自身抗体包括甲状球蛋白抗体和甲状腺微粒体抗体等，导致患者甲状腺腺体被自身抗体破坏，从而发生甲状腺功能亢进或减退[9-10]。近年来，随着环境和生活方式的改变，本病的发病率呈逐渐上升的趋势[11]，且患者早期无特异性症状，到晚期会出现少汗、心动过缓等，给患者的生命健康造成影响。因此，早期诊断尤为重要，可控制疾病的发展，有效改善预后。目前，对于诊断本病的方法尚无统一标准。TPOAb 是甲状腺重要的抗体之一，与甲状腺功能密切相关[12]。UGRP1 基因区域已被证实含有自身免疫甲状腺疾病易感基因的位点，对疾病诊断中发挥重要作用[13]。为此，本文主要探究两种表达水平在自身免疫甲状腺疾病中的诊断价值，以期为临床选择合适检测指标提供参考依据。

TPOAb 是自身免疫甲状腺疾病发生后自身免疫反应的标志物之一，当甲状腺的结构受到破坏后，导致甲状腺过氧化物酶 （Thyroid Peroxidase，TPO）被阻隔在甲状腺细胞的顶端，并不断向外周血渗入，使免疫系统遭到刺激从而产生TPOAb。TPOAb 在患者体内可对甲状腺滤泡造成损伤，从而使甲状腺功能减退[14-16]。而TPO 会对甲状腺球蛋白的识别作用产生影响，与TPOAb 结合后会抑制甲状腺素的合成，进而在负反馈的作用下导致TSH 水平升高，TT3、TT4、FT3、FT4 水平的降低。本研究中，HT 组、Grave 组患者的TT3、TT4、FT3、FT4水平均显著低于对照组，TSH 水平显著高于对照组，提示自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺功能的减退可能与TPOAb 水平的异常增多有关。TSH是由腺垂体分泌的激素，主要负责调节甲状腺细胞的增殖、甲状腺血液供应以及甲状腺激素的合成和分泌，在维持甲状腺正常功能中发挥重要作用。当甲状腺功能受损后，导致甲状腺激素合成分泌不足，进而引起TSH 水平上升[17]。因HT 患者上皮细胞含有大量的甲状腺表面抗原，经诱导后形成抗甲状腺球蛋白抗体，TPOAb 可与表面抗原结合，导致甲状腺功能减退，此时UGRP1 具有高表达，说明UGRP1、TPOAb 水平与甲状腺功能呈负相关关系，与本研究结果部分类似，提示可从UGRP1、TPOAb 水平变化推测患者甲状腺功能的变化。

TPOAb 可参与T 淋巴细胞的活化过程，具有细胞毒性作用，会导致甲状腺素的合成减少，造成甲状腺功能减退，且不同自身免疫甲状腺疾病患者的TPOAb 水平存在一定差异。因此在自身免疫甲状腺疾病的分类中，TPOAb 水平的变化具有一定参考价值。UGRP1 基因位于Grave 的易感区域内，且是甲状腺转录因子1 （Thyroid transcription factor，TTF1）的下游靶基因，TTF1 通过反式作用使UGRP1 启动子激活，而TTF1 可调控甲状腺特异性基因[18-19]。此外，UGRP1 具有较好的抗炎作用[20]，当甲状腺功能减退时，TPOAb 水平显著升高，此时TTF1 随之升高，导致UGRP1 呈现高表达。故推测UGRP1 可能通过诱导炎症反应在自身免疫性甲状腺疾病中发挥重要作用。本研究中，Grave 组和HT组的TPOAb、UGRP1 显著高于对照组，推测自身免疫甲状腺疾病患者的TPOAb、UGRP1 水平存在异常升高，可能与患者机体的炎症反应及免疫功能有关。ROC 结果显示，TPOAb、UGRP1 对自身免疫性甲状腺疾病的诊断价值较高，其联合检测的价值更高，说明UGRP1 联合TPOAb 可作为自身免疫性甲状腺疾病有效的检测因子。

综上所述，UGRP1 联合TPOAb 检测自身免疫性甲状腺疾病的价值较高，可有效评估患者病情的发展，值得在临床上广泛推广应用。