温补脾肾经验方治疗视神经脊髓炎谱系疾病作用机制的网络药理学分析

宫玉霜, 付业繁, 许会静, 郭 健, 相 琳, 胡 睿, 樊 睿, 王 捷, 李 淼, 孙美艳

（1.吉林大学中日联谊医院神经外科，吉林 长春 130033；2.吉林医药学院检验学院实验中心，吉林 吉林 132013；3.吉林大学中日联谊医院神经内科，吉林 长春 130033）

视神经脊髓炎谱系疾病（neuromyelitis optica spectrum disorders，NMOSD）是一种罕见的中枢神经系统自身免疫性炎性脱髓鞘疾病，呈复发-缓解病程，可导致失明及长节段脊髓损伤［1-2］。NMOSD 好 发 于32.6～45.7 岁 女 性 人 群［3］，其 发 病机制尚未完全明确。目前主要通过糖皮质激素和血浆置换等方法缓解急性期症状，缓解期多以免疫抑制剂和单克隆抗体进行治疗，但以上治疗费用高昂且效果不佳，甚至存在严重不良反应。因此，如何为NMOSD 患者提供安全有效的治疗方法仍是临床面临的一大难题。NMOSD 在中医学领域中属于“痿病”“暴盲”范畴［4］。研究［5］显 示：NMOSD以“脾肾阳虚”“痰淤湿热”等为病机。《灵枢·海论》云：“髓海不足，目无所见，懈怠安卧”。中医学认为：肾藏精，为先天之本，主骨生髓，肾阳虚衰，髓海空虚，不能充髓生骨，则会腰膝酸软，肢冷麻木无力，发为痿病，髓海空虚亦不能充养睛目，目失所养而视物模糊，发为青盲病。《黄帝内经灵枢·本神》记载：“脾虚则四肢不用。若脾虚弱，则气血乏源，运化布散精气失司，则视物昏花、肌肉筋骨痿弱麻木无力”，因此导致视力障碍和运动障碍，治疗上则以“补脾益肾、填精补髓”为治疗要点。由吉林大学中日联谊医院中医科教授亲自拟定的由15 味中药组成的温补脾肾经验 方 （Tonifying Slpeen and Kidney Empirical Prescription，TSKEP），主要被用于近5 年来明确诊断为NMOSD 且于门诊复诊的约30 例患者。其中熟地黄滋阴填精益血、补益肝肾；黄连及三颗针清热燥湿、泻火解毒；黄芪可大补元气、健脾益气；茯苓及白术渗湿健脾以杜生痰之源；当归养血活血。诸药合用，可改善NMOSD 患者临床症状，减轻神经功能缺损，降低复发频率，临床疗效显著。鉴于中药方剂多组分和多靶点的作用特点，TSKEP 治疗NMOSD 的效果及发病机制尚未完全明确。本研究应用网络药理学及分子对接的方法构建多维靶点网络，探索TSKEP 治疗NMOSD 的效果及其作用机制，为其临床应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物、药物、主要试剂和仪器SPF 级C57BL/6 雌性小鼠，体质量（25±5）g，购自吉林大学实验动物中心，动物生产许可证号：SCXK（吉）2021-0001。实验由吉林大学中日联谊医院伦理委员会审查批准，编号：2017-104。小鼠分为对照组、NMOSD组和TSKEP组，每组6只。2019 年10 月—2021 年10 月 收 集10 例NMOSD 患 者 和10 名健康志愿者的血清标本，10 例患者均在吉林大学中日联谊医院就诊并参照2015 年NMOSD 的诊断标准明确诊断为抗水通道蛋白4 抗体（antiaquaporin 4-immunoglobulin，AQP4-IgG）阳 性 的NMOSD。本研究使用的人血清标本获得吉林大学中日联谊医院伦理委员会批准，编号：2017022238。

TSKEP 由吉林医药学院药学系制备，中药复方由15 味中药组成：熟地15 g，千金藤30 g，山栀10 g，枸杞15 g，牡丹皮10 g，当归15 g，黄连10 g，十大功劳叶30 g，三颗针30 g，黄芪30 g，党参30 g，生地15 g，茯苓10 g，白术15 g，黄柏10 g。所有中药药材均购自北京同仁堂股份有限公司并经吉林大学中日联谊医院中医科主任医师、副教授冯桂梅鉴定，均符合《中国药典》要求。中药原材料混合，加洁净的冷水浸泡30～60 min 后，每剂药煎2～3 次，首次煎煮加水至超过药物表面3～5 cm；第2 和3 次煎煮加水 至 超 过 药 物 表 面1～2 cm，煎煮时沸前用强火，沸后用文火。每次煎煮滤出药汁150～200 mL，煎后将3 次药汁混合。采用旋转蒸发仪将提取液进行浓缩并在烘箱中 60 ℃烘干至粉末状，置于4 ℃冰箱中备用。每1 g 干提取物含有3.56 g 生药材，临用前用水配置成相应浓度药液。Melon Gel IgG 纯化试剂盒（赛默飞世尔科技公司，商品号45206），增强型 BCA 蛋白检测试剂盒（碧云天科技公司，商品号P0010），髓鞘少突胶质细胞糖蛋白肽 MOG35-55（由上海顶肽生物技术公司合成），酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒（上海酶联生物技术有限公司），苏木素-伊红（hematoxylineosin，HE）染色试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司，商品号C0105S）。Amicon Ultra 离心过滤器（美国密理博科技公司，商品号ES-A01-4243），SpectraMax M5/M5e 多 功 能 酶 标 仪 （美 国Molecular Devices 公司），伯乐Mini-PROTEAN®Tetra小型垂直电泳套装（美国伯乐公司），5418R 型Eppendorf 高速冷冻离心机（德国艾本德公司），ChemiDocTMMP 型全能成像系统（美国伯乐公司），爱华QPJ-1C 石蜡切片机（天津爱华医疗器械有限公司），HH-MMB-2 型移动式微屏障鼠笼（苏州猴皇动物实验设备科技有限公司）。

1.2 NMOSD 动物模型制备及给药方式用PBS缓冲液稀释 MOG35-55至终浓度为0.5 g·L－1，并与含有 12.5 g·L－1热灭活结核分枝杆菌的完全弗氏佐剂（complete freund’s adjuvant，CFA）1∶1 混合，充分乳化，诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmue encephalomyelitis，EAE）模型［6］。分别于小鼠背部中线两侧皮下注射100 μL乳化液，免疫当天（第0 天）和48 h（第2 天）腹腔内注射百日咳毒素（PTX，每只300 ng）。对照组小鼠以生理盐水代替。免疫第5～7 天，实验组小鼠腹腔注射 NMO-IgG［7］（4 g·L－1PBS 缓冲液）和10 μL 人补体，对照组以IgG（4 g·L－1PBS 缓冲液）代替。NMO-IgG 和IgG 分别来自于NMOSD患者和健康志愿者血清，利用Melon Gel IgG 纯化试剂盒和Amicon Ultra 离心过滤器纯化浓缩［8］。根据人与小鼠的体表面积折算等效剂量确定给药浓度和剂量［9］，即TSKEP 组小鼠在免疫第5 天开始以灌胃方式连续给予TSKEP（15.6 g·kg－1体质量）26 d。对照组和NMOSD 组每天灌胃等量生理盐水，在免疫第30 天处死所有小鼠。

1.3 动物行为学观察免疫当天开始每日观察小鼠发病情况，同时采用5 分法记录神经功能评分［10］。评分标准：0 分为无明显异常；0.5 分为尾巴略微无力或步态略有异常；1.0 分为尾巴无力或尾巴略微无力且轻度后肢麻痹；1.5 分为尾巴无力且后肢轻度麻痹；2.0 分为尾巴无力伴中度后肢麻痹；2.5 分为后肢麻痹，但有部分腿部活动；3.0 分为后肢麻痹且无活动；3.5 分为后肢麻痹且前肢轻度麻痹；4.0 分为四肢完全麻痹，但头部有一定活动；4.5 分为垂死；5.0 分为死亡。

1.4 HE 染色观察各组小鼠脑组织病理形态表现免疫第30 天处死小鼠，4%甲醛灌注。取出小鼠脑组织后石蜡包埋，常规处理，制备成厚度为5 μm 切片进行HE 染色，显微镜下观察。根据病理评分评估脑组织病理学改变。病理评分标准：0 分为无炎性细胞；1 分为散在的炎性细胞（轻度）；2 分为血管周围炎细胞浸润，有“袖套样”改变（中度）；3 分为致密的炎性细胞浸润和实质坏死（严重）。

1.5 TSKEP 潜在活性化学成分及靶点筛选通过中药系统药理学数据库及分析平台［11］（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP），http：//tcmspw.com/tcmsp.php），以 口 服 生 物 利 用 度（oral bioavailability，OB）≥30% 和 药 物 相 似 性（drug-likeness，DL）≥0.18 等 毒 药 物 动 力 学ADME （Absorption，Distribution，Metabolism and Excretion）参数［12］作为筛选条件，依次检索熟地、黄芪和党参等15 味中药的活性化学成分及其 对 应 靶 点，借 助STRING v11.0b 数 据 库［13］（https：//cn.string-db.org/）将得到的靶点转换成对应的基因名，汇总去重后得到全方的活性化学成分和靶点。

1.6 NMOSD 相关靶点以视神经脊髓炎、视神经脊髓炎谱系疾病、NMO 和NMOSD 为关键词，利用DisGeNET v7.0［14］（https：//www.disgenet.org）、GeneCard v5.3［15］（https：//www.genecards.org）、The Online Mendelian Inheritance in Man［16］（OMIM，https：//mirror.omim.org）和Drugbank v5.1.8［17］（https：//www.drugbank）数据库进行检索，汇总去重后得到NMOSD 相关靶点。

1.7 TSKEP 治疗NMOSD 潜在靶点的获取利用在线网站Venny 2.1.0［18］（https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html）绘 制TSKEP治疗NMOSD 相关靶点的韦恩图，得到交集靶点。

1.8 化合物-靶点网络构建利用Cytoscape 3.6.0软件构建化合物-靶点网络，并进行拓扑结构分析，挑选度值（degree）较高的化合物，从而寻找发挥重要作用的核心活性成分。

1.9 蛋白-蛋白互作（protein-protein interaction，PPI）网络的构建将TSKEP 治疗NMOSD 的潜在作用靶点映射到STRING 数据库，限定物种为“Homo sapiens”，设定最低的置信区间为0.7（置信度高），得到的数据以TSV 格式导出。将得到的数据导入Cytoscape 3.6.0 软件生成PPI 网络并使用Network Analyzer 插件进行网络拓扑结构分析。拓扑特征包括3 个参数：degree 值、介数中心性（betweenness centrality，BC）和 接 近 中 心 性（closeness centrality，CC），上述3 个参数是新药发现和靶点预测的关键指标［19］，其中节点的大小代表degree 值，节点越大，表示degree 值越大。通过拓扑结构分析来确定PPI 网络中的核心靶点。

1.10 潜在核心靶点基因本体论（Gene Ontology，GO）功能注释分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路富集分析将潜在核心靶点导入到STRING 数据库中进行GO 和KEGG 通路富集分析，GO 包括分子功能（molecular function，MF）、生物过程（biological process，BP）和细胞组成（cellular component，CC）［20］。利 用OmicShare 云平台（https：//www.omicshare.com/）对富集分析结果进行可视化处理。

1.11 靶点-通路网络构建将Omicshare 平台输出的KEGG 通路富集结果进行分析，选择最相关的通路信息整理成表格，输入到Cytoscape 3.6.0 软件中得到靶点-通路网络。

1.12 分子对接筛选PPI 网络及靶点-通路网络中degree 值较高的核心靶点与化合物-靶点网络中degree 值较高的核心化合物进行分子对接验证。在PDB 数 据 库［21］（https：//www.rcsb.org/）中 找到核心靶点的PDB 文件，在Pubchem 数据库［22］（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）中找到核心化合物的sdf 文件，基于AutoDock Tools 软件进行分子对接。以结合能评价化合物与靶点结合能力的高低，结合能<0 表明可以自由结合，结合能越低，结合活性越强，受体与配体之间的亲和力越大，二者之间发生相互作用的可能性越大，结合能小于−5 kcal·mol−1表明结合良好。

1.13 ELISA 法检测各组小鼠血清中细胞因子水平分别在免疫第5、15 和30 天收集小鼠尾静脉血，室温下静置20 min，使血液凝固。4 ℃、1 000 g离心10 min（离心半径=10 cm），去除血清中的凝块。采用肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素10 （interleukin-10，IL-10）和白细胞介素17 （interleukin-17，IL-17）ELISA 试剂盒检测小鼠血清中相应细胞因子水平。

1.14 统计学分析采用SPSS 17.0 统计软件进行统计学分析。各组小鼠神经功能评分、病理学评分及血清中炎性细胞因子水平等数据符合正态分布，以±s表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。以P<0.05 差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组小鼠神经功能评分对照组小鼠在免疫后30 d 内无神经功能障碍。NMOSD组和TSKEP组小鼠在造模后第6 天开始陆续发病，疾病程度逐渐加重，表现为尾巴无力、四肢不同程度麻痹、精神萎靡和活动减少等神经系统症状。NMOSD 组小鼠最高神经功能评分为3.5 分。TSKEP 组小鼠平均神经功能评分第11～30 天均低于NMOSD 组，从第17 天开始到实验结束与NMOSD 组比较差异有统计学意义（P<0.01）。见图1。

图1 各组小鼠神经功能评分Fig.1 Neurological function scores of mice in various groups

2.2 各组小鼠脑组织病理形态表现光学显微镜下观察各组小鼠脑组织切片HE 染色结果（图2），对照组小鼠脑结构完整，神经胶质细胞均匀分布；NMOSD 组小鼠脑组织中有大量炎性细胞浸润，有部分细胞核固缩，病理学评分为（2.83±0.41）分；与NMOSD 组比较，TSKEP 组小鼠脑组织中炎性细胞浸润程度明显减轻，病理学评分［（1.33±0.52）分］明显降低（P<0.05）。

图2 各组小鼠大脑组织病理形态表现（HE，×100）Fig.2 Pathomorphology of brain tissue of mice in various groups(HE，×100)

2.3 TSKEP 中潜在活性成分及靶点根据OB≥30%、DL≥0.18 的条件在TCMSP 数据库中进行检索，剔除重复项后TSKEP 中共得到304 个活性化合物和655 个有效活性成分对应的靶点。

2.4 TSKEP 治疗NMOSD 的潜在靶点在DisGeNET、GeneCard、OMIM 和Drugbank 数 据库中分别检索到171、171、84 和3 个NMOSD 相关的靶点，删除重复项后共得到358 个疾病靶点。将疾病靶点与药物靶点取交集，共获得TSKEP 治疗NMOSD 的潜在靶点43 个。见图3。

图3 655 个药物靶点（A）和358 个疾病靶点（B）的共同靶点基因Fig.3 Common target genes of 655 drug targets (A) and 358 disease targets (B)

2.5 化合物-靶点网络的构建通过Cytoscape 3.6.0 软件对化合物-靶点网络进行拓扑分析，以degree 值和CC 值作为拓扑分析的主要参考指标，结合degree 值和CC 值筛选，包括槲皮素（Quercetin）、山柰酸（Kaempferol）和木犀草素（Luteolin）等在内的12 种化合物，均具有较高的degree 值和CC 值，可能是TSKEP 治疗NMOSD的核心活性成分。见表1。

表1 TSKEP 核心化合物的相关参数Tab.1 Related parameters of core compounds of TSKEP

2.6 GO 和KEGG 富集分析以P值作为筛选条件并按照P值大小进行排列，GO 功能富集分析分别选取BP、CC 和MF 的前20 条通路进行展示（图4A～C），TSKEP 治疗NMOSD 主要作用于以下环节：①对外界刺激的反应调控、对有机物质反应及对化学刺激的细胞应答反应等生物过程；②细胞外间隙、细胞外区部分及细胞组分、胞浆内部分等细胞组成；③细胞因子活性、细胞因子受体结合、受体配体活性、受体调节活性、分子功能调控和信号受体结合等分子功能等。以P<0.05 作为筛选条件并按照P值大小展示前20 条KEGG 通路（图4D），共同靶点主要通过细胞因子受体相互作用、Toll 样 受 体（Toll-like receptor）信 号 通 路、IL-17 信号通路、TNF 信号通路、Jak-STAT 信号通路和核因子κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）信号通路等多条信号通路在NMOSD 的治疗中发挥重要作用。见表2。

表2 核心靶点的KEGG 代谢通路相关参数Tab.2 Related parameters of KEGG metabolic pathways of core targets

图4 43 个候选靶点的GO 和KEGG 富集分析Fig.4 GO and KEGG enrichment analysis of 43 candidate targets

2.7 靶点-通路网络构建将14 条显著富集的信号通路及对应的靶点导入到Cytoscape 3.6.0 软件中，得到靶点-通路网络图（图5）。根据degree 值筛选核心成分，结果提示IL-6、IL-1β、TNF、IL-4和PIK3CA 等degree 值较高，可能在中药复方治疗NMOSD 中发挥主要作用。

图5 靶点-通路网络图Fig.5 Target-pathway network diagram

2.8 分子对接将9个核心靶点（IL-6、TNF-α和IL-1β 等）与10 个核心化合物（槲皮素、芹菜素、大豆黄酮和木犀草素等）进行分子对接来评估化合物与靶点的结合能力。结果提示：所有对接结合能均<－5 kcal·mol－1，说明核心靶点与核心化合物之间具有较好的亲和力。其中，IL-6 与槲皮素、ALB 与 芹 菜 素、IL-10 与 豆 甾 醇、IL-1β 与 木 犀 草素、C-X-C 基序趋化因子配体10 （C-X-C motif chemokine ligand 10，CXCL10）与β-谷甾醇之间具有相对较好的结合能力，部分分子对接模式图见图6。

图6 分子对接结果示意图Fig.6 Schematic diagrams of molecular docking

2.9 各组小鼠血清中细胞因子水平造模后第5、15 和30 天，与正常组比较，模型组小鼠血清中IL-6、TNF-α 和IL-17 水平明显升高（P<0.01），IL-10 水平明显降低（P<0.01）；与NMOSD 组比较，TSKEP 组 小 鼠 血 清 中IL-6、TNF-α 和IL-17 水平明显降低（P<0.05 或P<0.01），IL-10水平明显升高（P<0.01）。见图7。

图7 各组小鼠不同时间点血清中IL-6（A）、TNF-α(B)、IL-10(C)和IL-17(D)水平Fig.7 Levels of IL-6（A）, TNF-α(B), IL-10(C), and IL-17(D) in serum of mice in various groups at different time points

3 讨 论

本研究首先对TSKEP 治疗NMOSD 的效果进行了实验验证，结果显示：TSKEP 可以明显减缓NMOSD 模型小鼠的神经功能障碍，降低脑组织中炎性细胞的浸润程度，下调血清中炎性因子水平，表明TSKEP 在治疗NMOSD 方面具有一定的效果。TSKEP 中的黄芪可有效降低血清IL-6 和TNF-α 水平，减轻全身炎症反应。在自身免疫性脊髓炎模型中，黄芪可明显抑制IL-17、IL-23 和单核细胞趋化蛋白 （monocyte chemoattractant protein，MCP）的表达，降低血清中的氧自由基，同时增加损害性细胞凋亡，减少神经阻滞［23］。本研究网络药理学结果显示：槲皮素、木犀草素、豆甾醇、芹菜素和β-谷甾醇等与核心靶点之间具有较好的结合能力。槲皮素是一种天然黄酮类化合物，可减轻由双环己酮草酰二腙（cuprizon，CPZ）诱导的脱髓鞘模型小鼠的髓鞘损伤，促进髓鞘再生，有一定的神经保护作用［24］。槲皮素能够通过调节NF-κB 的活性，在mRNA 和蛋白水平抑制诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶2 和C 反应蛋白的表达，发挥抗炎作用［25-26］，同时可抑制IL-6 的合成和分泌，从而在炎症早期减轻炎症反应［27］。植物甾醇是一类具有多种功效的天然化合物，其中含量最为丰富的是豆甾醇和β-谷甾醇。β-谷甾醇可通过抑制多种细胞因子和信号通路的活化，导致细胞中IL-6、TNF-α 和IL-1β 等细胞因子合成明显减少而起到抗炎作用［28］。同时豆甾醇也可调节各种炎性因子而发挥抗炎作用［29］。木犀草素是一类天然黄酮类化合物，已被证实可通过调节炎症介质（IL-6、IL-4和TNF-α 等炎性因子）发挥抗炎作用，并能通过抑制NF-κB 的活化来调节NF-κB 信号转导途径以抑制促炎基因的表达［30］，同时还具有神经保护作用。以上研究结果表明：TSKEP 中的有效活性成分可能是通过抗炎和促进髓鞘再生等发挥神经保护作用。

PPI 网络和靶点-通路网络分析结果显示：IL-6、IL-1β、IL-10、TNF- α、IL-4、白 蛋 白（albumin，ALB）、胰 岛 素 （insulin，INS）和CXCL10 等可作为TSKEP 治疗NMOSD 的关键靶点。多种炎性细胞因子在NMOSD 的发生发展过程中发挥重要作用。神经细胞因子参与神经系统的修复和再生过程［31］。IL-10 可通过代谢重组对巨噬细胞发挥抗炎作用。IL-6 作为重要的核心靶点，是免疫系统中的多效细胞因子，参与抗体的产生和T 细胞的活化［32-33］。研究［34-36］显示：NMOSD 患者血清和脑脊液中较高的IL-6 水平可能与神经功能的缺损有关。IL-1β 和TNF-α 是一类促炎细胞因子，IL-1β 能够招募白细胞进入中枢神经系统，诱导炎性反应。IL-1β 可通过激活环磷腺苷效应元件结合蛋 白（cAMP-response element binding，CREB）和NF-κB 促进血浆上皮嗜中性粒细胞活化肽78（epithelial neutrophil activating reptide 78，ENA78）的表达，同时IL-1β 和TNF-α 在中性粒细胞募集的过程中可促进激肽B1 受体（kinin B1 receptor，KB1R）蛋白表达，从而提高中性粒细胞的活性，诱 导 中 性 粒 细 胞 的 黏 附 和 迁 移［37］。TNF-α 与IL-17A 具有协同作用，参与辅助性T 细胞17（T helper cell 17，Th17）介导的免疫反应。本研究经动物实验验证TSKEP 可降低外周血中多种炎性细胞因子（IL-6、IL-1β 和TNF-α）的表达，由此减轻缓解期NMOSD 中枢神经系统的炎症反应，从而改善神经功能损伤。

本研究KEGG 通路富集分析结果显示：富集的通路主要与感染性疾病、免疫系统及信号转导相关，包括IL-17 信号通路、Jak-STAT、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K）/蛋 白 激 酶B （protein kinase B，Akt）、TNF 和NF-κB 等多条信号通路。IL-17 是一种重要的促炎症细胞因子，由Th17 和先天性免疫细胞等分泌，IL-17 与相关的IL-17R 结合通过信号转导复合体IL-17R-Act1-肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis factor receptor-associated factor 6，TRAF6）激活下游NF-κB 和MAPK 等信号通路，以诱导多种细胞因子的表达，并在多种自身免疫性疾病的炎症病理过程中发挥着重要的作用。本研究动物实验验证TSKEP 可通过对IL-17 相关信号通路的调控降低血清细胞因子在外周血中的表达。另外，Jak-STAT、PI3K-Akt、TNF-α 和NF-κB 等信号通路与神经系统功能有密切关联，可通过调节细胞凋亡、生长，以及促进轴突生长和神经再生等发挥 作 用［38］。NF-κB 和Jak-STAT 与PI3K-Akt 信 号通路相互交织，并在NMOSD 治疗中发挥神经调节作用［39-41］。

综上所述，TSKEP 可通过槲皮素、木犀草素、豆甾醇和β-谷甾醇等多种活性成分作用于IL-6、IL-1β 和TNF-α 等 多 种 炎 症 及 神 经 细 胞 因 子，由IL-17 和NF-κB 等多条信号通路参与调控外周血中炎性细胞因子的表达、改善神经功能缺损症状以及促进神经功能的修复再生，减轻中枢神经系统的炎症反应，从而达到治疗效果。本研究为中药复方通过多组分、多靶点和多通路协同作用治疗NMOSD提供了理论依据。