鸡传染性法氏囊病的临床鉴定方法及防控

陈圆圆，沈丹丹，李双双，周欣，李厚伟，李倩倩，张先锋，张真真，常照锋★

（1.商丘美兰生物工程有限公司，河南 商丘 476000；2.河南普华基因科技有限公司，河南 郑州 450000）

鸡传染性法氏囊病 （infectious bursal disease，IBD）首次发生于美国甘布洛镇的60 年代，如今已遍及世界，它是一种双链RNA 病毒，属于双RNA 病毒科，无囊膜，即传染性法氏囊病病毒（IBDV）主要引起以法氏囊内淋巴组织损伤为主的一种疾病，主要侵害雏鸡，以法氏囊肿胀、出血坏死为主要特征，引起被感染鸡的免疫抑制和死亡，部分鸡在发病初期出现自啄肛门羽毛的现象。该病毒在一般环境中比较稳定，能在鸡舍内存活122 天。对物理和化学因素具有较强的抵抗力，75℃高温30 分钟、0.5%氯化铵作用10 分钟即可杀灭病毒。

近年来，因IBD 疫苗的广泛使用，临床上该病的流行暴发明显减少，但却出现了混合感染、区域流行、疫苗免疫失败等新的特点，分子流行病学研究结果表明，各地IBDV 毒株来源复杂，不同地区、不同时间分离的流行毒株在抗原性、致病性和毒力方面均存在不同的差异。因此，IBD 的防控也面临着新的挑战。

2022 年5 月，山东某家养鸡场发现发病鸡啄肛现象，法氏囊有明显的肿大、出血和炎性渗出物等病变。临床症状疑似鸡传染性法氏囊病感染。取商品鸡法氏囊组织裂解液，并进行琼脂扩散试验、血凝试验、动物感染试验进行鉴定，具体试验情况如下。

1 血凝试验

采取3 月龄鸡全血与等量抗凝剂混合，然后用生理盐水洗涤3 次，每次以1500 转/分钟离心10 分钟，将沉积的红细胞配制成1%悬液，即为1%鸡红细胞。取鸡传染性法氏囊病病毒裂解液，按常规方法进行血凝试验，观察是否有红细胞凝集，同时用NDV 作阳性对照。结果显示，分离株样品没有出现红细胞凝集，而新城疫阳性对照有明显的红细胞凝集，表明无NDV 污染。

2 琼脂扩散试验

甲液：取Na2HPO4·12H2O 3.85 克，加水至1000 毫升。乙液：取KH2PO41.36 克，加水至1000 毫升充分溶解。

琼脂板制备：将甲液24 毫升、乙液76 毫升加到三角瓶内混匀，再加入1.0 克琼脂糖，8.0 克氯化钠，待琼脂糖完全融化。取灭菌的直径90毫米平皿，每个平皿中加20 毫升，待凝固后封装，置2℃～8℃保存备用。

用梅花打孔器进行打孔。中心孔加入鸡传染性法氏囊标准阳性血清，外周孔中加入不同倍比稀释的组织裂解液上清，同时设立阴性对照。置37℃恒温培养箱中，经24～48 小时观察结果。试验结果显示，该病鸡的组织裂解液上清与鸡传染性法氏囊标准阳性血清之间有明显的白色沉淀线，而阴性对照未出现，详见图1。

图1 琼脂扩散试验鉴定

3 动物回归试验

取反复冻融的组织液上清接种25 日龄鸡，感染组10 只，每只经点眼、滴鼻接种0.1 毫升，每天观察并记录鸡的临床症状和发病情况。同时设立空白对照组10 只。

对照组鸡全部健活，而感染组鸡于接种后第3 天开始出现典型的IBD 临床症状，精神萎靡，羽毛松乱，第4 天开始出现死亡，法氏囊严重水肿，内含淡黄色胶冻样渗出物，胸肌、腿肌有片状出血；肾脏轻度肿胀，感染鸡10 只，死亡2 只，死亡率为20%，对照鸡未见明显变化，详见图2。

图2 感染组鸡法氏囊病变照片、对照组鸡法氏囊照片

4 结果说明

该分离株病毒不具有凝集鸡红细胞的特性，能与鸡传染性法氏囊标准阳性血清出现明显的沉淀线，鸡感染试验证实了感染组能出现与临床自然发病鸡相同的症状与病变。因此该病鸡感染的确为鸡传染性法氏囊病毒。

5 临床防控措施

5.1 加强饲养管理

在养殖过程中，尽可能做到全进全出，保证饲料质量，尽可能降低更换饲料次数，减少人为的或外界因素的刺激可能引起的鸡群发生应激反应导致的免疫力下降。做好日常打扫和定期消毒工作。对圈舍定期进行清扫消毒，进雏前对基隆料槽水线等进行清洗消毒。

5.2 做好疫苗免疫

目前免疫接种是预防该病最有效的方法，市面上比较常见的主要有灭活苗和弱毒苗。所以制定合理的免疫程序，做好免疫接种工作，在免疫接种过程中尽可能保证一针一鸡，确保所有的鸡只免疫。在发病区和发病季节做好疫苗接种。另外，本病目前没有特效疗法。在发病初期用高免血清和卵黄抗体治疗，搭配抗生素可预防继发感染。