牛口蹄疫的诊断与防控

翟 艳

贵州省毕节市七星关区农业农村局，贵州毕节 551700

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的人畜共患传染病，偶蹄兽最易感。其临床症状主要表现为口黏膜、身体四肢下部和胸部等处的皮下产生水疱和烂斑。口蹄疫已被OIE（世界动物卫生组织）确认为A 类动物疾病，且一直以来把口蹄疫病列入发病前必须报告的A 类动物疾病名录之首，我国将其作为一类传染病。

口蹄疫病在全世界范围传播，特别是欧、亚、非、南美洲地区最为严重，在我国及周边国家疫情也十分严峻。成年动物感染，一般呈良性经过，死亡率较低，但是幼龄动物感染，往往发生恶性口蹄疫，死亡率最高可达100%。口蹄疫病包括7 个主型、80余个亚型，主型相互之间无交叉免疫，而亚型相互之间则有交叉免疫，我国主要是A、O 和亚洲I 型，口蹄疫主要通过空气传播，呈跳跃式、直线式流行，此种传播方式可以使口蹄疫从一个地区传播到很远的非疫区，造成口蹄疫的大流行。

1 临床症状

口蹄疫潜伏期长短不一，最长可达2 周，最短仅2 d。病畜体温升高，最高达41 ℃，全身症状明显，并伴有大量流涎、开口时有吮吸声；发病1 d 后唇内、口、舌面等黏膜起疮，起初黄豆大小，此为一期水疱，随着病情发展，水疱融合，大小有核桃大，颜色也由原来的淡黄转为灰白色，此时口挂白沫，像极胡须。2 d 后，水疱完全破溃，破溃处形成红色溃疡，体温恢复正常。当口腔发生水疱后，趾间和蹄冠的柔嫩部位会产生水疱，此为二期水疱，二期水疱很快破溃，继而逐渐痊愈。有些患畜乳头皮肤上也可见水疱。一般患病动物呈良性经过，7 d 后可以痊愈；如果蹄部有病变，病程会有所延长，14～21 d或者更长时间；病死率较低，一般在1%～2%，该病型叫良性口蹄疫。原发部位水疱出现1～2 d 后，蹄、乳房皮下等其他部位开始出现水疱，并很快破溃，形成糜烂，大约1 周愈合。如发生继发感染，则有跛行，若有化脓性细菌感染，可引起化脓，严重的造成蹄匣脱落，此现象称为“脱靴”，再严重者还可见蹄部变形，无法站立，常卧地不起。

恶性口蹄疫，病死率可达50%。恶性口蹄疫病牛一般是患牛在病情好转过程中，病情突然恶化，表现虚弱、肌肉颤抖、心跳加速、心率不齐、食欲废绝、反刍停止、站立不稳、行走摇摆，最后常由于心肌炎导致的心脏麻痹而突然死亡。恶性口蹄疫往往发生在犊牛，犊牛主要表现为出血性肠炎、心肌麻痹。

2 诊 断

2.1 分子生物学诊断

随着科技的发展，分子生物学诊断技术也得到了快速发展，针对口蹄疫诊断，分子生物学方法可以采用核酸杂交、RT-PCR 等技术，诊断更加简便、快捷和敏感。

核酸杂交技术：从病牛身上采集病料，提取遗传物质，将获取的遗传物质通过电泳固定在硝酸纤维素膜上，利用生物素与DNA 克隆片段进行标记与杂交，通过氢键作用把不能融合的探针洗去，进而得到结合明显的探针显影。最后，利用芯片扫描技术，读取标记的遗传物质，对读取的数据进行分析，从而确定病毒株的基因型和血清型[1]。

RT-PCR 技术：首先，从病毒牛身上采取病料，提取口蹄疫病毒基因RNA，由于RNA 提取对操作人员的要求较高，需特别注意操作流程，避免污染致使RNA 被酶分解，导致提取失败，出现假阴性结果。根据口蹄疫病毒基因序列，设计引物，合成引物，根据所扩增基因大小、引物情况，设计RT-RNA 参数，利用RT-PCR 仪进行扩增，对扩增产物进行电泳，比对扩增产物大小，从而确定是否为口蹄疫病。

2.2 血清学诊断

对于口蹄疫病毒毒型的鉴定可以采用血清学试验法，利用鉴定毒性对于现阶段流行毒株可以有针对性地选用同型口蹄疫疫苗，进行紧急免疫接种。常用的血清学试验有补体结合试验（CFT）、微量补体结合试验、（乳鼠病毒）中和试验（NT）、免疫扩散沉淀试验（IDPT）、荧光抗体技术等。近年来，OIE 推荐的间接夹心ELISA 在国际贸易中广泛使用，在数小时内可获得试验结果。因为免疫接种动物3ABC 抗体呈阴性，而感染动物3ABC 抗体则呈阳性，若要区分感染动物和免疫接种动物，可通过检测血清中口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC 抗体情况[2]。

2.3 动物接种

接种试验动物，需要选取2～7 日龄纯系乳小鼠，也可选用豚鼠或乳兔进行试验接种，选择其颈背部皮下接种法，接种病毒感染液0.2 mL，若接种后的小鼠在20～30 h 出现运动不灵活，用镊子夹住尾巴或四肢，其已失去知觉，随着病情发展，四肢麻痹，呼吸急促，最终死亡，可以确诊为口蹄疫。对于濒死期或新死乳小鼠，可以采集骨骼肌，研磨捣碎，制成10%的病料悬液，可用于传代接种和鉴定。

3 防控措施

3.1 非疫区的预防措施

非疫区的牛群应做好平时的饲养管理，保持舍内卫生干净，制定好平时消毒计划，定期清扫消毒，尽量减少应激，避免影响牛群健康。如引种或者其他需要引进牲畜，严禁从疫区或者曾经发生过口蹄疫的国家或地区引进动物或动物产品，即使引进动物或动物产品为非疫区，也需要进行隔离、检测，确保为阴性或者非患病动物才可混群，如果在隔离或者检疫过程中发现阳性病例，需要及时扑杀并上报，将动物尸体进行无害化处理，对于运载工具或者被污染的其他物品，必须就地严格消毒，经检测合格方可使用。

3.2 口蹄疫流行区的预防措施

对于口蹄疫流行区，应坚持免疫接种，免疫接种前需要鉴定当地流行口蹄疫的类型，确定病型后选择疫苗。目前，口蹄疫疫苗有灭活苗、合成肽苗，口蹄疫灭活苗应用较广，选择当地流行毒株同型的口蹄疫灭活苗接种动物后，需要定期检测抗体水平，对于漏免动物需要及时补免，对于不宜免疫的动物，当其恢复健康时需及时免疫，从而提高群体免疫水平。免疫接种的目的是为了建立免疫带，防止疫情扩散。

针对不同性别、不同用途的牛，其免疫接种程序不同。针对种公牛、后备牛，每半年免疫1 次，注射方式采用肌肉注射；针对生产母牛，在其生产前3个月肌肉注射灭活苗；犊牛，4、5 月龄首免，间隔半年加强免疫，以后每间隔半年免疫接种1 次[3]。

对于口蹄疫流行区，牛的圈舍、场地和抗腐蚀的用具均需要用2%烧碱液或者10%石灰乳泼洒消毒；动物排出的粪便，最好选用酚类消毒药进行彻底消毒或者堆积发酵后再处理；对于口蹄疫流行区内的动物皮毛需要利用甲醛熏蒸消毒，经检疫无问题后才可使用；对于肉品需要自然产酸熟化或者采用2%乳酸消毒处理。

3.3 发病时的防控措施

当牛群发生口蹄疫时，疫情需要在第一时间上报，不能超过24 h，以免耽误疫情。确定疫情后，立即划定疫点、疫区和受威胁区，按“早、快、严、小”的原则，立即采取封锁、隔离、检疫、消毒等措施。扑杀疫点疫区内所有易感动物，扑杀后尸体进行无害化处理，被污染的工具、饲料、垫草等均需严格按照要求就地处理，对于受威胁区易感动物可以采用康复血清或高免血清进行接种，也可以采用紧急免疫方式建立免疫带以防疫情扩散。当疫区内最后1 头患病动物痊愈或者死亡、扑杀后，连续观察14 d 后未出现新的病例，且检测无阳性病例，经终末消毒，采样检测无问题，经申请，原封锁单位可解除封锁。

3.4 口蹄疫的治疗

对于感染口蹄疫的患病动物不允许治疗，应就地扑杀，并对尸体与粪便进行无害化处理。但对于某些珍贵种用动物或其他特殊情况，可经报批后在严格隔离的条件下予以治疗。

4 结语

养牛业是当前热门的畜牧养殖种类，且每头牛经济价值较大，可为养牛户带来较为丰厚的经济收益，但是一旦发生口蹄疫，不仅给养牛业带来巨大经济损失，还会影响经济贸易。养牛人员应加强对口蹄疫的防控意识，积极落实口蹄疫防控工作，采取综合防控措施，配合政府做好口蹄疫疫苗接种工作，从而保障牛群健康，防止牛口蹄疫的发生和传播，减少经济损失。