外周血血管内皮生长因子和硫氧还原蛋白还原酶水平对卵巢癌的诊断价值*

史跃燕，刘红利，林 兰，顾益凤，张小霞

江苏省南通市肿瘤医院检验科，江苏南通 226000

卵巢癌、宫颈癌和乳腺癌是女性三大肿瘤，严重危害女性健康，卵巢癌的发病率在女性常见肿瘤中并不高[1]，但因其发病隐匿，早期症状不明显，同时缺乏大规模筛查的早期诊断方法[2]，病死率居妇科肿瘤之首[3]，2018年全球卵巢癌死亡病例超过新增病例万分之六[4]。近年来，随着检测技术及靶向药物等研究不断深入，卵巢癌的治疗也取得了突飞猛进的发展[5]。但早诊断、早治疗仍然是提高卵巢癌生存率非常有效的途径。病理学诊断操作繁琐且有创伤性，不适用于大规模筛查，肿瘤标志物测定方法简单，快速且无创，被广泛用于大规模筛查[6]。目前用于卵巢癌早期筛查的肿瘤标志物主要有糖类抗原125(CA125)和人附睾蛋白4(HE4)，其测定的主要方法主要为电化学发光法，对试剂和设备要求比较高，在偏远地区和基层很难大规模筛查。血管内皮生长因子(VEGF)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)在卵巢癌外周血中的表达情况鲜有报道，本文主要探讨外周血测定VEGF和TrxR作为卵巢癌早期筛查指标的可行性。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2020年9月至2021年8月本院收治的初诊住院患者，其中54例为卵巢癌患者，年龄30～85岁，平均60岁，作为卵巢癌组；40例为卵巢良性病变患者，年龄17～84岁，平均45岁，作为良性病变组。另外，将同期于本院体检的80例体检健康者作为健康组，年龄32～80岁，平均55岁。所有患者均经病理组织学或细胞学检查证实，入院前未经任何放化疗及抗肿瘤治疗。本研究经医院医学伦理学委员会批准，所有纳入研究者均知情同意。

1.2仪器与试剂 HE4采用罗氏电化学发光仪E601测定，检测试剂为罗氏公司产品，质控品为上海昆涞生物科技有限公司产品。VEGF采用迈瑞-96A酶标仪进行测定，试剂和质控品均为北京健平金星生物科技有限公司产品。TrxR采用KEA-TR100全自动分析仪(凯熙医药股份有限公司)测定，试剂和质控品均为武汉尚宜康健科技有限公司产品。

1.3方法 所有受试者均为清晨空腹抽取静脉血。HE4和VEGF的检测标本为静脉血血清，TrxR的检测标本为静脉血血浆(肝素抗凝)，行实验室质量控制，结果在控后测定结果。HE4的检测采用电化学发光法；VEGF采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定；TrxR采用分光光度法测定。比较3组外周血HE4、VEGF和TrxR水平，分析外周血HE4、VEGF和TrxR水平与病理特征(卵巢癌FIGO分期[7]、是否转移和病理类型)之间的关系。

1.4统计学处理 采用SPSS23.0进行统计分析。计量资料呈非正态分布，采用M(P25,P75)表示；多组间比较比较采用Kruskal-WallisH检验，进一步两两比较采用Nemenyi法；两组间比较采用Mann-WhitneyU检验；配对样本用Wilcoxon符号秩检验。采用Spearman相关性分析；ROC及AUC用于评价各指标对卵巢癌的诊断价值；以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.13组间外周血HE4、VEGF和TrxR水平比较 健康组、良性病变组和卵巢癌组各指标测定结果见表1，3组间两两比较，各项指标差异均有统计学意义(均P<0.05)。

表1 健康组、良性病变组和卵巢癌组各指标检测结果比较[M(P25,P75)]

2.2外周血VEGF和TrxR水平与病理特征之间的关系 各指标与卵巢癌FIGO分期、是否转移和病理类型均无相关性(P>0.05)，见表2。

表2 VEGF和TrxR水平与卵巢癌临床病理特征之间的关系[M(P25,P75)]

续表2 VEGF和TrxR水平与卵巢癌临床病理特征之间的关系[M(P25,P75)]

2.3Spearman相关性分析 外周血VEGF和HE4(r=0.530,P<0.001)、TrxR和HE4(r=0.581,P<0.001)、TrxR和VEGF(r=0.566,P<0.001)水平呈正相关。

2.4ROC曲线分析 外周血HE4、VEGF和TrxR水平单独及联合检测用于区分卵巢癌和卵巢良性病变的ROC曲线见图1，诊断价值见表3。TrxR诊断效能优于HE4和VEGF，3项联合诊断无明显优势。外周血HE4、VEGF和TrxR水平单独及联合检测用于区分卵巢癌患者和健康者的ROC曲线见图2，诊断价值见表4。TrxR诊断效能优于其他两项，VEGF和TrxR联合诊断的准确度最高，3项联合无明显优势。

表3 各指标用于区分卵巢癌和卵巢良性病变的诊断效能(%)

图1 各指标用于区分卵巢癌和卵巢良性病变的ROC曲线

图2 各指标用于区分于卵巢癌患者和健康者的ROC曲线

表4 各指标用于区分卵巢癌患者和健康者的诊断效能(%)

续表4 各指标用于区分卵巢癌患者和健康者的诊断效能(%)

2.5卵巢癌手术前后患者外周血HE4、VEGF和TrxR水平比较 卵巢癌手术前后，外周血VEGF和TrxR水平比较差异有统计学意义(P<0.05)，HE4水平比较差异无统计学意义(P=0.125)，见表5。

表5 卵巢癌手术前后HE4、VEGF和TrxR水平比较

3 讨 论

VEGF是一种血管源性蛋白质,其家族有A～F和胎盘生长因子(PLGF)共7个成员，其中VEGF-C是促进血管形成最重要的因子。VEGF通过与受体之间的相互作用，在肿瘤新生血管形成中起着重要作用，能增加血管通透性、促使细胞外基质变性及新生血管内皮细胞的分裂和增殖，从而促进肿瘤细胞生长和转移[8-9]。有研究显示VEGF在上皮性卵巢癌组织中阳性表达率高于良性卵巢囊腺瘤组织，卵巢正常细胞中表达率最低[10]。

TrxR是硫氧还蛋白系统含硒酶部分，参与体内氧化反应的信号传导，当细胞发生癌变时，高水平TrxR与肿瘤细胞生长和凋亡进程有着密切的关系，在多种原发性肿瘤中过表达，从而维持细胞氧化还原的稳定性，因此可以已成为其诊断和治疗的新靶点[11-15]，但其在卵巢癌中的研究罕有报道。

在本研究中，VEGF和TrxR在健康组、卵巢良性病变组和卵巢癌组中的水平依次增高，且与HE4水平有相关性,在区分卵巢癌和良性病变时TrxR的诊断效率优于传统肿瘤标志物HE4。在区分卵巢癌患者和健康者时，单独检测VEGF和TrxR均具有良好的诊断效能，高于HE4。VEGF和TrxR联合检测时诊断卵巢癌准确度最高，这说明VEGF和TrxR均可用于卵巢癌早期筛查。有研究表明，卵巢癌FIGO分期越高，VEGF表达率越高，转移卵巢癌组织表达率也高于未转移组织[16-17]。但在本次研究中外周血VEGF和TrxR的水平与卵巢癌的病理特征无关，还需扩大标本量做进一步研究。VEGF和TrxR在卵巢癌手术后均明显降低，HE4血清水平手术前后比较差异无统计学意义(P>0.05)，说明VEGF和TrxR或可用于卵巢癌术后疗效观察。

VEGF和TrxR外周血测定，方法简便快捷，设备要求低，可用于卵巢癌早期的大规模筛查，同时可用于术后疗效监测。