镇宁小黄姜脱毒原原种繁育技术

2023-02-08吴家丽牛力立谭体琼鲍菊

长江蔬菜 2023年2期

吴家丽，牛力立，谭体琼，鲍菊

（安顺市农业科学院，贵州，561000）

小黄姜（Globba racemosaSmith），姜科姜属植物，辛辣味浓，肉细嫩，味香，纤维较细[1]，具有多种药理活性，具有抗氧化、抗炎、抗癌、降血糖和保护心血管功效性[2]，是安顺市农业产业结构调整中药食兼用的重要经济作物之一。镇宁小黄姜作为安顺地方特色品种，根茎黄色或浅黄色，具有强烈辛辣味，味美品质佳，2020年获得国家地理标志农产品认证[3]，2021年种植规模达11 053.33 hm2。但由于采用块茎无性繁殖、反复重茬生产等原因，小黄姜主产区姜瘟病、茎基腐病等病害盛行，病毒积累多，导致近年来品质降低、产量和种植面减少的现象逐步显现，同时大量外地品种占据部分种植面积，使地方特色品种市场受到严重威胁。采用热处理结合茎尖分生组织培养，可脱除生姜病菌，进而建立种苗、种姜快繁体系，是防止病害和提高繁殖系数的有效技术措施[4]。我国山东、浙江、江苏、山西、广西、云南、安徽等省份的科研人员针对生姜茎尖脱毒、组培快繁体系建立、高产栽培技术、增产、抗病性等开展了大量的试验研究，在山东、云南等地进行了大面积推广应用，增产效果明显[5～15]，但在贵州省针对小黄姜原原种繁育技术研究详细报道少。笔者自2019年开始针对镇宁小黄姜组培脱毒及原原种繁育技术进行系统研究，旨在恢复和提高镇宁小黄姜优良种性，建立镇宁小黄姜脱毒种姜繁育技术体系，发展安顺市特色优势产业，助力乡村振兴。

1 培育脱毒试管苗

1.1 姜块催芽及热处理

选取皮色光亮、肉黄饱满、无病虫害的镇宁小黄姜健康块茎，冲洗干净，用0.5%代森锰锌浸泡30 min捞出晾干，放在高压灭菌后的无土栽培基质中，置于光照培养箱内进行恒温（28℃）催芽，保持无土栽培基质湿润。姜芽萌动后，于40～45℃（8 h/d）高温下热处理1 个月。

1.2 再生试管苗离体诱导

①外植体消毒灭菌选取光照箱中催芽热处理后长2 cm 左右的壮芽，用自来水冲洗30 min 左右，在超净工作台上用75%酒精擦拭或浸泡30 s，再用10%次氯酸钠（NaClO）灭菌15 min，无菌水冲洗4～5 次后用无菌滤纸吸干水分。

②外植体接种将消毒灭菌后吸干水分的壮芽，在体视镜下切取0.1～0.3 mm 的小黄姜茎尖分生组织，接种于以MS 为基本培养基，添加6-BA 2.0 mg/L 和NAA 0.1 mg/L 的培养基中诱导小黄姜再生植株。

③病毒检测将茎尖分生组织诱导的再生植株送至专业检测机构对黄瓜花叶病毒（TMV）和烟草花叶病毒（CMV）进行检测。

④脱毒试管苗增殖生根同步培养将检测无黄瓜花叶病毒（TMV）和烟草花叶病毒（CMV）、叶绿、无黄化的壮苗接种于MS+6-BA 2.5～3.0 mg/L+NAA 0.03 mg/L 的培养基中进行增殖和生根同步培养，可有效简化培养程序，减少接种工作量，缩短培养时间，降低培养成本。此方法与雷开荣[16]的研究一致。

脱毒试管苗培育各阶段培养要求均一致。即培养室温度为25～30℃，光照2 000 lx，12～16 h/d，培养基pH 值5.8～6.0。

图1 微茎尖分化诱导培养

2 原原种繁育

2.1 脱毒试管苗炼苗

移栽前1 周将生根良好、达到入土条件的脱毒试管苗放在培养室外、散射光下封瓶炼苗1 d、开瓶炼苗3 d 或封瓶炼苗3 d、开瓶炼苗1 d，使试管苗适应外部环境，提高移栽成活率。

2.2 基质选择与苗床制作

选用自配营养基质（无土栽培基质∶营养土=2∶1）进行移栽。移栽苗床采用厢床栽培，厢面宽1.8 m。移栽前30 d，在厢床底部铺细土+1 000 kg/667 m2腐熟兔粪或牛粪，将其混匀后再平铺40 cm 厚的自配营养基质（用1%甲醛、威百亩或棉隆消毒后使用）。

2.3 适期移栽

脱毒试管苗于3月下旬地温回升后至6月中旬移栽。移栽前1 d 将厢面浇透水，清洗干净试管苗根部的培养基，按照（12～15）cm×（40～50）cm 的株行距单株栽植于网室大棚中，栽后浇足定根水，加盖塑料拱棚、遮阳网进行保温、保湿、遮荫。

2.4 成活期管理

试管苗移栽后15～20 d 新根开始生长，要求白天温度不高于30℃，夜晚温度不低于15℃。晴天强光照射或阴天中午时，应及时揭开网室和拱棚膜两头进行通风透气，中午温度过高时，利用喷灌淋水1 min 左右。移栽后7～10 d 内保持拱棚湿度在85%～90%，以后逐渐降低，适时浇水，经常保持基质相对湿度65%左右。30 d 以后根据试管苗长势情况逐渐撤除拱棚膜，晴天强光照天气加盖遮阳网遮荫，避免中午强光直射，分枝开始发生后即可逐步撤除遮阳网。

2.5 肥水管理

①追肥管理小黄姜以地下块茎为产品器官，试管苗根系较弱，忌偏施氮肥，注重氮磷钾肥配合施用。试管苗新根开始发生时，以叶面喷施0.3%～0.5%磷酸二氢钾+尿素水溶液+2%腐熟油饼对水淋施为主，7～10 d 1 次，连施3 次；试管苗分枝发生2个以上至立秋（8月7日左右）前，分枝发生较少，根系开始大量发生，以10%～15%的一桶天下有机水溶肥（高钾型）或钾富贵水溶肥+4%腐熟饼肥+1%腐植酸液肥淋施为主，7～10 d 1 次，连施3 次；立秋后分枝开始大量发生，姜块迅速膨大，对钾肥需求量增加，以10%氮磷钾三元复合肥+5%硫酸钾水溶液+4%腐熟饼肥+1%腐殖酸液肥淋施为主，连施3次；姜块膨大后期看苗施肥，以5%硫酸钾水溶液+4%腐熟饼肥淋施为主，长势弱的追施2～3 次，长势好的追施1～2 次，7～10 d 1 次。

②水分管理小黄姜喜温怕寒怕旱不耐涝，原原种生产中及时喷水，保证基质湿润，避免长期干旱影响姜块膨大。雨天须注意网室周围排水防涝，忌阴雨天湿度过大，引起烂姜现象发生。

2.6 中耕培土

生姜属浅根系作物，在封行前须适时结合追肥、中耕除草培土2～3 次，保护块茎不露出地面，正常膨大。

2.7 病虫害预防与防治

图2 脱毒试管苗分化诱导培养

原原种繁育中，采取“以防为主，综合防治”原则进行病虫害预防与防治。脱毒试管苗抗病性强，在原原种繁育过程中无病害产生，在网室纱网被破坏的情况下会有姜螟虫、地老虎、斜纹夜蛾等虫害发生，可用1.5%精高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂1 000～1 500 倍液、15%辛硫磷乳液800～1 000 倍液等进行喷雾防治。