奶牛DHI一次采样与多次采样之间的关系

文│范雪 宋阳（山东省龙口市动物疫病预防控制中心）

李春蕾（山东省烟台市动物疫病预防与控制中心）

奶牛生产性能测定体系是对奶牛泌乳性能及乳成分的测定，也叫做奶牛群体改良。DHI测定在国外已形成一套较为成熟完整的体系。我国一些奶业发展较快地区的实践也证明了这一技术的先进性。利用DHI报告分析奶牛场奶牛的生产性能，对奶户及整个乳品行业都有至关重要的意义。近年来，政府对奶牛良种登记和奶牛生产性能测定工作的支持力度也越来越大，有利于我国良种奶牛的登记和基础信息库的建立，但却大大增加了我国奶牛生产性能测定的工作量。因此，本试验通过研究一次采样与多次采样之间的关系，希望能用一次采样代替多次采样，从而减轻DHI测定的工作量，减少人力物力以及奶样的浪费。

一、材料与方法

1.试验动物。选取健康状况良好、处于正常泌乳阶段、产犊七天后的奶牛80头参加DHI测定。试验过程中，奶牛按照原有饲养方式饲喂，饮水方式、挤奶时间以及饲料配方等都不发生改变。试验动物及场地由格润富德农牧科技有限公司提供。

2.试验材料。50毫升采样管（内加0.03克重铬酸钾作为防腐剂）两箱，采样器，Foss乳成分分析仪MilkoScanTM Minor，体细胞计数仪，恒温水浴箱，保鲜柜。

3.试验方法。

（1）采集样品。由于该牛场每天挤奶两次，本次试验一天采样也是两次，分别在6点和18点采样。此场挤奶厅装有转盘式挤奶机，共有80个挤奶设备。采样前先安装采样设备，然后按正常的挤奶程序进行。奶牛排队进入挤奶转盘，依次用温水清洗乳头，用消毒液对乳头消毒，用干净的棉布擦拭乳头。随着挤奶工作的进行，不断有奶样进入采样设备。用加有0.03克重铬酸钾的采样管盛取50毫升奶样，盖好盖子，混合均匀。采样结束后，要在样品箱贴上标签，标明采样时间、地点、采样人员。

（2）样品的保存与运输。加有0.03克重铬酸钾的奶样在15℃的条件下可以保存4天，在4℃的冷藏条件下可保存一周。采样结束后，先放置在通风阴凉处，防止奶样腐败变质。样品应尽快运送到实验室，运输途中尽量保持低温4℃，减少摇晃。本次试验于采样后的第二天将奶样运送到实验室。

（3）检测指标的选择。试验选取具有代表性的乳脂率、乳蛋白率、非脂固形物以及体细胞数4个检测指标。乳脂率、乳蛋白率两项指标是通过乳成分分析仪测定的，乳脂率、乳蛋白率反应奶牛的营养状况，也反映牛奶品质的高低，进而决定牛奶的销售价格。非脂固形物是牛奶干物质中去除乳脂的剩余部分，它也是反映牛奶品质的重要指标。体细胞数指每毫升牛奶中白细胞的含量，当奶牛乳腺感染时，血细胞将进入牛奶中，使牛奶中的细胞数增加。牛奶中体细胞的数目取决于乳腺感染的程度，乳腺感染程度高则体细胞数目多，相反，则体细胞数目少。

（4）检测样品。运送到实验室的奶样先放置在4℃的保鲜柜中，以保持奶样的性质，并立即组织测定工作，先测定早晨奶样和晚上奶样，再将早晨奶样和晚上奶样以1∶1的比例混合测定。

使用乳成分分析仪测定奶样中乳脂率、乳蛋白率、非脂固形物。向恒温水浴箱中加入适量水，把水浴温度设定到37℃，将待测奶样放入水浴。打开乳成分分析仪，待达到一定温度后开始清洗、调零。轻微摇晃奶样，放入吸管，按下开始按钮，测定乳成分，记录数据。

使用体细胞计数仪测定奶样中的体细胞数。样品在检测前必须在水浴锅中预热，水浴温度应在41～43℃，样品温度应达38～41℃。上下倒置样品5次，混匀样品，不要剧烈摇晃以免产生气泡。每检测一个样品，线路系统都将吸入一个气泡，这样可避免样品间残留，检测结束后，检测结果窗口中显示三个数值，分别为细胞数（Kcell/ml为单位）、Q-值和当前的斜率。

4.数据处理。把置信度设置为95%，使用Excel进行数据处理，得到早-混、晚-混、早与晚-混之间在乳脂率、乳蛋白率、非脂固形物和体细胞数方面的回归关系图表，并讨论是否有线性回归关系。

二、结果与分析

1.奶样中各乳成分及体细胞数早上取样与混样之间的关系。由表1可知，经过对早晨奶样和混合奶样在各乳成分和体细胞数上的回归分析得知：混合奶样对早晨奶样在乳脂率、乳蛋白率、体细胞数上存在极显著的回归关系，回归方程成立，依次为y＝1.70874+0.561587x，y＝0.213538+0.919992x，y＝18.98434+0.814582x；而在非脂固形物方面不存在显著的回归关系，回归方程不成立。因此，通过测定早晨奶样的乳成分及体细胞数，无法完全了解混合奶样中的乳成分及体细胞数，可以认为早晨奶样无法取代混合奶样。

表1 早上取样与混样之间各指标的回归方程数据列表

2.奶样中各乳成分及体细胞数晚上取样与混样之间的关系。由表2可知，经过对晚上奶样和混合奶样在各乳成分及体细胞数上的回归分析得知：混合奶样对晚上奶样在乳脂率、体细胞数两方面上存在极显著的回归关系，回归方程成立，分别为y＝1.628878+0.53374x，y＝36.0694+0.759109x；在乳蛋白率和非脂固形物方面没有显著的回归关系，回归方程不成立。因此，仅通过测定晚上奶样的各乳成分和体细胞数，无法完全了解混合奶样的各乳成分和体细胞数，可以认为晚上奶样无法取代混合奶样。

表2 晚上取样与混样之间各指标的回归方程数据列表

3.奶样中各乳成分及体细胞数早上和晚上取样与混样之间的关系。由表3可知，经过对早晨奶样和晚上奶样与混合奶样在各乳成分及体细胞数上的二元线性回归分析得知：混合奶样对早晨奶样和晚上奶样在乳脂率和体细胞数上存在极显著的回归关系，回归方程成立，分别为：y＝0.055347+0.490294x1+0.480307×2，y＝20.57284+0.542725x1+0.277273x2；在乳蛋白率和非脂固形物方面没有显著的回归关系，回归方程不成立。因此，仅通过测定早晨奶样和晚上奶样中各乳成分和体细胞数，也不能完全得知混合奶样中各乳成分和体细胞数，也就是说，早晨奶样和晚上奶样也不能取代混合奶样。

表3 早上取样和晚上取样与混样之间各指标的回归方程数据列表

三、讨论

由以上数据显示，在早晨奶样-混合奶样、晚上奶样-混合奶样、早上奶样晚上奶样-混合奶样三组数据中，指标乳脂率和体细胞数在三组回归分析中都存在线性回归关系，而乳蛋白率和非脂固形物在三组回归分析中部分或者完全没有回归关系。尽管有部分指标是存在线性回归关系的，但是在实际工作当中不可能单独采一次样来测量乳脂率和体细胞数的，把其他指标另测得，还是需要一天采多次样测量，这样才能保证较高的准确度。

四、结论

本试验通过对早晨奶样-混合奶样、晚上奶样-混合奶样、早上奶样晚上奶样-混合奶样在乳脂率、乳蛋白率、非脂固形物和体细胞数四方面的回归分析，发现无论是早晨奶样、晚上奶样还是早上奶样和晚上奶样都无法取代混合奶样，也就是说一天中DHI测定一次取样无法代替多次取样。在DHI测定中，我们还需要进行多次取样，严格按照DHI测定的规定进行操作，得到有效数据，形成正确的DHI报告，从而正确指导牛场的日常生产。