TLRs对急性缺血性脑卒中预后的预测作用研究

宋耀宗

（河南科技大学第三附属医院洛阳东方医院神经内科一病区，洛阳 471000）

脑梗死具有极高的致死率和致残率，是人类三大致死疾病之一，全球每年约1500万人发生脑梗死，对人们健康造成极大威胁[1-2]。急性缺血性脑卒中（Acute Ischemic Stroke，AIS）病情危急，变化快，院内病死率较高，预后较差[3]。其防治的关键在于了解患者的病变程度并对预后进行预测，以采取针对性治疗手段。实验室指标检测是一种简单、安全、实用性强的方法，对于疾病的诊疗及预后预测有 重 要 作 用[4]。Toll样 受 体（Toll-like receptors，TLRs）是近年来发现的一类能够参与天然免疫的模式识别受体，通过识别病原微生物相对保守的某些共有成分，引发信号传导和炎症介质释放，并最终启动适应性免疫应答[5-6]。Toll样受体2（tolllike receptor2，TLR2）与Toll样 受体4（toll-like receptor4，TLR4）是TLRs的两种受体类型，能够通过介导炎症信号通路，加重脑卒中后炎症损伤。研究显示[7]，阻断TLR2与TLR4抗体可诱导脑缺血耐受，避免神经损伤，二者可做为AIS的检测指标。近年来，TLRs与AIS的关系引起重视。本文旨在探讨TLRs表达对AIS的预后作用，为临床诊疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2019年4月至2020年2月我院收治的120例动脉粥样硬化性急性脑梗 塞 （Atherosclerosis Acute Cerebral Infarction，ASACI）患者的临床资料。其中男78例，女42例，年龄48~82岁，平均（63.4±6.7）岁。纳入标准：所有患者均符合《中国畸形缺血性脑卒中诊断指南2014》[8]中有关AIS的诊断标准，并经颅脑磁共振或头颅CT扫描存在斑块，动脉存在伸长、扭曲、扩张，动脉狭窄率≥50%，且动脉内-中膜厚度≥1 mm，确诊为ASACI，有完整的病历资料。排除标准：轻中度肾功能不全、对相关治疗药物过敏的患者；多次发病者，不能长期随访者，不配合检查和治疗者。所有患者均于出院后随访6个月，由经验丰富的正（副）高级医师按照改良Rankin评分量表（Modified Rankin scale，mRS）[9]进行评估，（mRS=0分为完全恢复；mRS=1分为未完全恢复，但没有功能障碍；mRS=2分为轻度残疾，但可生活自理；mRS=3分为中度残疾，生活不可完全自理，但可独立行走；mRS=4分为重度残疾，无法独立行走；mRS=5分为卧床；mRS=6分为死亡），对患者评分并分组：mRS≥3分，为预后不良组（n=42）；0~3分，为预后良好组（n=78）。

1.2 方法 于患者住院24 h内抽取患者空腹外周静脉血约5 mL，将其放在EDTA管（试剂盒购于济南千司生物技术有限公司）中，3000 r/min（离心半径20 cm）离心10 min，取上清液并于-20℃环境中待用。应用实时荧光定量PCR法检测TLR2、TLR4，试剂盒购于山东锦沅新材料科技有限公司。所有患者均根据具体情况实施溶栓治疗、脑血管造影、支架植入术等对症方法支持治疗。

预后影响因素分析：设计影响因素调查表，统计可能引起AIS患者预后不良的危险因素，包括性别、年龄、体质量指数、TLR2、TLR4、吸烟、脑卒中家族史、心脏病。

1.3 观察指标 （1）比较预后良好组与预后不良组的mRS评分。（2）比较预后不良组与预后良好组的TLR2、TLR4水平及其他可能影响因素。（3）Logistic回归分析明确影响AIS预后不良的影响因素。

1.4 统计学方法 采用SPSS 21.0统计软件（SPSS公司，美国）分析数据，计量资料（mRS评分、年龄、体质量指数、TLR2、TLR4）以（±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料（性别、吸烟、脑卒中家族史、心脏病）以[n（%）]表示，组间比较采用检验，采用多因素Logistic回归分析法分析导致预后不良危险因素的比值比（OR）及95%可信区间（CI），P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组mRS评分比较 预后不良组的mRS评分高于预后良好组（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者mRS评分比较（±s）

表1 两组患者mRS评分比较（±s）

组别 mRS评分预后不良组（n=42）预后良好组（n=78）t值P值4.501.50 1.000.50 13.438 0.000

2.2 两组TLR2、TLR4水平及其他可能影响因素比较120例患者，预后良好患者78例（预后良好组），预后不良患者42例（预后不良组），两组患者的性别、体质量指数、脑卒中家族史、心脏病占比差异无统计学意义（P＞0.05），预后不良组年龄、TLR2、TLR4、吸烟占比高于预后良好组（P＜0.05），见表2。

表2 可能影响因素分析[n（%）]

2.3 Logistic回归分析影响AIS预后不良的危险因素 以是否预后不良作为因变量，将单因素分析有差异指标：年龄、TLR2、TLR4、吸烟史占比作为自变量，将预后不良记为1，否则记为0，进行Logistis回归分析赋值。经Logistis回归分析，年龄、TLR2、TLR4、吸烟均是影响AIS预后不良的危险因素（P＜0.05），见表3。

表3 多因素Logistic回归分析

3 讨论

AIS中又称脑梗死，是较常见的因供血不足而引起的大脑组织缺血性坏死的脑血管疾病，病情变化快，具有较高的致残率和病死率[10]。ASACI是AIS的一种特殊病理变化及病理类型，以动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）为主要临床表现。研究显示AS是由于脂质代谢障碍，纤维组织增生及钙质沉着，动脉中层逐渐钙化的一类病变，在AIS发病和病情进展过程中有着十分重要的作用[11]。AS可导致动脉壁异常增厚变硬、血管腔狭窄，累及多处动脉，可造成组织或器官坏死，严重者可危及生命[12]。TLR2、TLR4是重要的模式识别受体，是监视与识别各种疾病的免疫因子，与多种免疫相关疾病的发生相关，参与ASACI的发病过程。在ASACI临床治疗过程中，通过有效的方式对预后情况做出判断对于治疗方案的确定有重要意义，实验室指标具有操作简单、方便简捷的特点，是临床常用的预后辅佐判断方法之一。

本研究显示，120例ASACI患者的预后不良率为35.00%，与既往研究相符[13-14]，说明AIS的预后不良发生率较高；另外预后不良组年龄、TLR2、TLR4、吸烟的占比高于预后良好组，且经Logistic回归分析显示均为影响ASACI患者预后不良的独立危险因素，ASACI的预后受多种因素影响，而TLR2、TLR4是其独立危险因素，二者可作为预测ASACI预后的指标。TLRs是在人细胞上发现的一种介导天然免疫的跨膜信号传递受体家族，是启动炎症与免疫反应的“门户”[15-16]。TLR2、TLR4是非特异性免疫细胞因子，在天然免疫中具有重要作用，在ASACI的发生发展和最后斑块表面破裂并发血栓形成的所有阶段均发挥重要作用[17-18]。研究[19-21]发现，脑卒中后坏死的脑组织细胞会释放过氧化物酶家族蛋白，进而通过TLR2、TLR4信号通路促进巨噬细胞释放炎症因子，诱导神经细胞凋亡，加重ASACI的炎症反应及组织损伤，二者水平的异常升高是ASACI的独立危险因子。另外年龄是ASACI发生的主要原因之一，随着年龄的增加，血液流动逐渐缓慢，血管壁的脆性增加，易引起脑血栓的形成，因此，年龄越高的患者预后不良发生率更高[22]；吸烟患者烟草中含有的尼古丁等有害物质，对血管壁的内表皮细胞造成损害，会导致血管收缩、血压升高，血管内皮的直接破坏，导致动脉硬化[23]。因此，吸烟患者预后不良发生率更高。

综上所述，影响AIS预后不良的因素较多，而TLR2、TLR4是其独立危险因素，可作为AIS预后的预测指标。