乳酸脱氢酶在红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷症引起的溶血性贫血诊治中的临床意义

周一男，樊小燕，熊梦云

（江西省九江市妇幼保健院儿内科，九江 332000）

红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase，G-6-PD）缺陷症是儿童溶血性贫血（Hemolytic Anemia，HA）的常见病因，可引发贫血、黄疸、呕吐等症状，严重溶血者还会出现无尿、酸中毒及急性肾衰竭等严重症状，对患儿生命安全造成威胁，需尽早诊治[1-2]。目前，临床主要依据患儿临床表现及血红蛋白、尿常规等实验室指标对G-6-PD缺陷症引起的HA进行诊断，但无法对HA所致的溶血危象进行快速预警，可能会延误患儿最佳治疗时间，促进疾病进展，增加不良预后发生风险[3]。因此，积极寻找可快速、准确预警G-6-PD缺陷症引起HA患儿溶血危象的指标十分必要。张凤奎[4]报道，HA严重程度取决于红细胞破坏速率，红细胞破坏速率越快，疾病越严重。乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase，LDH）是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一，在红细胞中含量较高，当红细胞遭到破坏时，LDH也会随之释放入血，导致血清中LDH活性异常升高[5]。因此，推测LDH可能对G-6-PD缺陷症引起的溶血危象具有一定评估价值，且LDH活性水平可能与溶血危象严重程度存在一定关系。本研究主要探究LDH对G-6-PD缺陷症引起的HA评估价值，并分析其与溶血程度的相关性。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析，收集自2015年1月至2021年8月因“G-6-PD缺陷症引起的HA”于九江市妇幼保健院儿童血液专科住院治疗的患儿临床资料，根据是否存在溶血危象分为溶血危象组和未发生溶血危象组，每组各收集病例30例。溶血危象组中男28例，女2例；年龄1~14岁，平均（3.12±1.23）岁。未发生溶血危象组中男28例，女2例；年龄1~14岁，平均（2.05±1.19）岁。（1）纳入标准：G-6-PD缺陷症引起的HA符合《诸福棠实用儿科学》[6]中相关规定：患儿面色苍黄，伴或不伴巩膜黄染、发热，尿色加深，或呈浓茶水样，或是呈酱油色尿，有进食蚕豆及蚕豆制品的病史，实验室检验提示各种程度的贫血，网织红细胞升高，胆红素升高，尿常规提示尿胆原升高等；红细胞G-6-PD活性测定减低；年龄在1~14岁者；病例资料完整，包括本研究所需资料者。（2）排除标准：非溶血原因所致的贫血者；红细胞膜的缺陷、血红蛋白病及红细胞外异常所致的HA者；合并有严重感染者；合并有泌尿道畸形、血液肿瘤恶性疾病、心、肝、肾等严重脏器功能疾病者。两组患儿一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可对比性。

1.2 方法

1.2.1 资料中溶血危象评估方法 溶血危象符合《内科学》[7]中相关规定：患儿突然出现寒战、高热、烦躁不安等症状，较大儿童能诉腰痛，四肢疼痛、腹痛、少尿或尿闭，尿色呈棕红色或酱油色，血红蛋白大幅度下降、贫血、黄疸骤然加重，脾脏较前明显增大，且经血分析及网织红细胞测定、尿常规、血生化检验及肝胆脾B超检查确诊。

1.2.2 资料中溶血危象组患儿疾病严重程度评估与分组方法 患儿入院时，采集空腹外周肘静脉血5 mL，采用全自动细胞分析仪（珠海科域生物工程有限公司，型号：KU-800）测定血红蛋白（Hemoglobin，Hb）水平，根据Hb下降程度评估溶血危象患儿疾病严重程度，将Hb＜60 g/L患儿纳入重度组，将60 g/L≤Hb≤70 g/L患儿纳入中度组，将Hb＞70 g/L患儿纳入轻度组。

1.2.3 资料中LDH活性水平测定方法 患儿入院时，采集空腹外周肘静脉血5 mL，以3500 r/min速率离心10 min，离心半径10 cm，取血清，采用乳酸底物法测定血清LDH活性水平，试剂盒选自深圳雷杜生命科学股份有限公司，严格按照试剂盒说明进行。

1.3 统计学方法 采用SPSS 25.0软件处理数据，全部计量资料均经Shapiro-Wilk正态性检验，符合正态分布计量资料以（±s）表示，组间比较用独立样本t检验；三组间比较用单因素方差分析检验，组间两两比较采用SNK-q检验；计数资料用[n（%）]表示，采用χ2检验；绘制受试者工作曲线（ROC），并计算曲线下面积（AUC）值，以检验LDH评估G-6-PD缺陷症引起的HA患儿溶血危象发生的价值，AUC值＞0.9表示评估价值较高，0.71~0.9表示有一定评估价值，0.5~0.7表示评估价值较低，＜0.5表示无评估价值；用双变量Kendall的tau-b（K）直线相关性分析LDH与溶血危象患儿疾病严重程度的关系；检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 溶血危象组与未发生溶血危象组患儿LDH活性水平比较 溶血危象组患儿LDH活性水平平均为（523.16±23.85）U·L-1，未发生溶血危象组患儿LDH活性水平平均为（197.52±12.27）U·L-1，溶血危象组患儿LDH活性水平高于未发生溶血危象组患儿，差异有统计学意义（t=66.500，P=0.000）。

2.2 LDH评估G-6-PD缺陷症引起的HA患儿溶血危象发生的价值分析 将G-6-PD缺陷症引起的HA患儿溶血危象发生情况作为状态变量（“1”=发生，“0”=未发生），将LDH活性水平纳入作为检验变量，绘制ROC曲线（见图1），结果显示，LDH过表达评估G-6-PD缺陷症引起的HA患儿溶血危象发生的AUC为0.877（95%CI：0.788~0.965），具有一定评估价值，且当LDH活性水平为300.015 U·L-1时，其敏感度、特异性较高分别为0.900、0.667，约登指数为0.567。

图1 LDH评估G-6-PD缺陷症引起的HA患儿溶血危象发生价值的ROC曲线图

2.3 不同疾病严重程度溶血危象患儿LDH活性水平比较 全部30例溶血危象患儿中，11例疾病严重程度为轻度，占36.67%（11/30）；15例为中度，占50.00%（15/30）；4例为重度，占13.33%（4/30）；重度组LDH活性水平平均为（727.18±15.27）U·L-1，中度组LDH活性水平平均为（589.34±12.25）U·L-1，轻度组LDH活性水平平均为（383.27±11.53）U·L-1，重度组LDH活性水平高于中度、轻度组，且中度组LDH活性水平高于轻度组，差异有统计学意义（F=1564.105，P=0.000）。

2.4 LDH与溶血危象患儿疾病严重程度的关系分析 经双变量Kendall的tau-b（K）直线相关性分析，结果显示，LDH活性水平与溶血危象患儿疾病严重程度呈正相关（r=0.786，P=0.000）。

3 讨论

G-6-PD缺陷症引起的HA患儿溶血危象具有发病急、病情进展快、病情凶险等特点，若未及时诊治，可引发诸多并发症，威胁患儿生命安全[8]。因此，临床需寻找快速、有效的方法对HA患儿溶血危象的发生进行尽早评估与预警，从而为治疗方案的制定提供准确参考，挽救患儿生命，改善其预后。

LDH为含锌离子的金属蛋白，正常情况下，红细胞内LDH含量约为血清的100倍，当血清LDH水平异常升高时，多提示红细胞膜、血红蛋白及红细胞酶存在异常，机体可能存在HA[9-10]。因此，推测LDH可能与G-6-PD缺陷症引起的HA溶血程度存在一定关系。本研究结果显示，溶血危象组LDH活性水平高于未发生溶血危象组，初步提示LDH对HA所致的溶血危象具有一定评估价值，分析原因可能为，G-6-PD缺陷症可导致机体氧化作用所产生的过氧化氢无法被及时还原成水，而过多的过氧化氢会使血红蛋白和膜蛋白产生氧化损伤，最终造成红细胞膜的损伤及溶血，引起HA[11]。HA患儿因体内红细胞不断遭到破坏，红细胞中的LDH会不断释放入血，从而导致血清中LDH活性水平不断升高，且当机体出现溶血危象时，红细胞破坏速率会显著提高，进而导致血清中LDH活性水平显著升高[12]。因此，当血清LDH活性水平异常升高时，提示机体可能存在溶血危象，且血清LDH活性水平越高，红细胞破坏程度越严重，机体溶血程度越严重。为验证假说，进一步绘制ROC曲线结果显示，LDH过表达评估G-6-PD缺陷症引起的HA患儿溶血危象发生的AUC为0.877，具有一定评估价值，且经双变量Kendall的tau-b（K）直线相关性分析，结果显示，LDH活性水平与溶血危象患儿疾病严重程度呈正相关。建议临床今后可通过密切监测G-6-PD缺陷症引起的HA患儿血清LDH活性水平，可能对辅助判断HA所致的溶血危象，评估患儿溶血程度具有积极意义。

综上所述，LDH对G-6-PD缺陷症引起的HA溶血危象具有一定评估价值，且LDH活性水平与溶血程度呈正相关，可作为危重病例的警示指标，并为临床治疗方案的制定提供有力的依据。