孕晚期GBS感染孕妇蜕膜间质细胞死亡值、血清炎性因子对妊娠结局的预测价值

张聪颖,乔金凤,金 爽,陈 丹,刘宝娟

B族链球菌(GBS)是一种常寄生于人体下消化道及泌尿生殖道的典型条件致病菌，具有较高的侵袭性[1]。孕晚期GBS感染风险较高，可导致宫内感染、早产、胎膜早破、产褥感染等不良妊娠结局，对围生期母婴健康危害极大，已成为临床关注的焦点[2-3]。大量研究显示，GBS感染可导致机体释放大量炎性因子，如白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等，炎性因子水平升高可直接影响母婴健康，增加不良妊娠结局发生率[4-5]。IL-1β也是一种重要的炎性因子，其水平升高与妊娠期炎症反应密切相关，可导致不良妊娠结局[6]。但IL-1β在孕晚期GBS感染中的变化及作用尚未明确。此外，笔者在前期工作中发现，GBS暴露后蜕膜间质细胞死亡增多，且与炎症信号通路有关，尤其是蜕膜间质细胞死亡后会引起炎性因子水平升高。基于此，本研究探究蜕膜间质细胞、炎症信号通路相关因子在孕晚期GBS感染中的变化及对妊娠结局的预测价值，旨在为临床采取有效防治措施提供参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2020年1月—2022年1月我院收治的85例孕晚期GBS感染孕妇作为研究组，根据1∶1匹配(匹配指标包括年龄、经产情况、孕周)病例对照原则选取同期85例孕晚期无GBS感染孕妇作为对照组。纳入标准：①研究组符合GBS感染诊断标准[7]，对照组均无GBS感染；②孕周28～33周；③自然受孕、单胎妊娠；④已签署本研究知情同意书。排除标准：①妊娠期并发症未得到有效控制；②伴有宫颈炎、输卵管囊肿等其他生殖系统疾病；③合并其他感染性疾病者，如乙型肝炎、肺炎等；④习惯性流产患者；⑤胎儿宫内发育迟缓者。

1.2观察指标 ①比较2组一般资料(年龄、孕周、体质量指数、经产情况、流产史、孕期上呼吸道感染史、孕期吸烟史、文化水平、妊娠期合并症)，蜕膜间质细胞死亡值，血清炎性因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)水平等，分析研究组蜕膜间质细胞死亡值与血清炎性因子间的相关性。②统计研究组不良妊娠结局发生情况，比较不同妊娠结局患者蜕膜间质细胞死亡值与血清炎性因子水平。③分析蜕膜间质细胞死亡值、血清炎性因子水平预测孕晚期GBS感染孕妇不良妊娠结局的价值。

1.3检测方法

1.3.1蜕膜间质细胞死亡值检测：入组当日采用阴道拭子收集孕妇阴道宫颈外口脱落细胞，将收集的细胞置于流式管中，加入Binding Buffer工作液500 μl重悬细胞，加入Annexin V-FITC 5 μl和PI 5 μl，混匀后室温避光反应5～15 min，1 h内采用流式细胞仪检测蜕膜间质细胞死亡值。

1.3.2血清炎性因子检测：入组当日采集孕妇空腹静脉血2 ml，于4 ℃条件下以3000 r/min离心处理15 min后取血清，采用酶联免疫吸附试验检测血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平，试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。

2 结果

2.1一般资料、蜕膜间质细胞死亡值、血清炎性因子水平 2组年龄、孕周、体质量指数、经产情况、流产史、孕期上呼吸道感染史、孕期吸烟史、文化水平、妊娠期合并症比较差异无统计学意义(P>0.05)；研究组蜕膜间质细胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平均较对照组高(P<0.01)。见表1。

2.2研究组蜕膜间质细胞死亡值与血清炎性因子的相关性 Pearson相关性分析显示，研究组蜕膜间质细胞死亡值与血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平呈正相关(r=0.762、0.772、0.721，P<0.01)。见图1。

表1 孕晚期有无B族链球菌感染孕妇一般资料及相关指标比较

图1 孕晚期B族链球菌感染孕妇蜕膜间质细胞死亡值与血清炎性因子的相关性IL-6为白细胞介素-6，IL-1β为白细胞介素-1β，TNF-α为肿瘤坏死因子-α

2.3不同妊娠结局孕妇蜕膜间质细胞死亡值、血清炎性因子水平比较 研究组发生早产6例，宫内感染5例，胎膜早破6例，产褥感染4例，总发生率为24.71%(21/85)。妊娠结局不良孕妇蜕膜间质细胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平均较妊娠结局良好孕妇高(P<0.01)。见表2。

表2 不同妊娠结局孕妇蜕膜间质细胞死亡值、血清炎性因子水平比较

2.4蜕膜间质细胞死亡值、血清炎性因子水平预测不良妊娠结局的价值 以研究组妊娠结局不良孕妇作为阳性样本、妊娠结局良好孕妇作为阴性样本，绘制蜕膜间质细胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平预测孕晚期GBS感染孕妇不良妊娠结局的ROC曲线，结果显示，各指标单独预测的曲线下面积(AUC)分别为0.752、0.758、0.784、0.779，联合预测的AUC最大，为0.903。见表3、图2。

图2 蜕膜间质细胞死亡值、血清炎性因子水平预测孕晚期GBS感染孕妇不良妊娠结局的ROC曲线GBS为B族链球菌，ROC为受试者工作特征，IL-6为白细胞介素-6，IL-1β为白细胞介素-1β，TNF-α为肿瘤坏死因子-α

3 讨论

GBS具有较强致病性和穿透力，孕晚期女性体内激素水平发生明显变化，致阴道微生态失调，易造成GBS感染，是孕妇病死率较高的主要原因，且可导致不良妊娠结局[8-11]。因此，加强孕晚期GBS感染的防治，对改善妊娠结局、保障母婴健康具有重要意义。

研究显示，孕晚期血清炎性因子水平可预测不良妊娠结局发生的危险性，且GBS感染孕妇IL-6、TNF-α等炎性因子水平异常升高[12]。本研究结果显示，孕晚期GBS感染可导致孕妇血清IL-6、TNF-α水平明显升高，与上述研究结果基本一致，提示血清IL-6、TNF-α水平升高与孕晚期GBS感染有关。IL-6、TNF-α均为临床常见促炎因子，妊娠期胎盘滋养层、子宫蜕膜细胞等均具有合成、分泌IL-6的能力，正常妊娠状态下孕妇血清中IL-6水平很低，当发生GBS感染时可刺激胎盘滋养层、子宫蜕膜细胞大量合成IL-6，并释放至羊水及母血中，引起血清IL-6水平升高[13-14]。TNF-α是一种小分子蛋白炎性因子，正常状态下其表达水平较低，GBS感染时在GBS释放内毒素的刺激下，TNF-α表达水平逐渐升高[15-16]。本研究还发现，孕晚期GBS感染孕妇血清IL-1β水平高于孕晚期无GBS感染孕妇，说明血清IL-1β水平升高也与孕晚期GBS感染有关。漆小霞等[17]研究显示，GBS感染可促进胎膜组织IL-1β表达增加，从而加重炎症反应，影响母婴健康。国外相关研究显示，GBS感染的人蜕膜基质细胞中IL-1β分泌量明显增加，是促进炎症反应的关键因子[18]。

此外，GBS感染后蜕膜间质细胞死亡是常见现象。本研究发现，孕晚期GBS感染孕妇蜕膜间质细胞死亡值明显增大，说明GBS感染可促进蜕膜间质细胞死亡。本研究还发现，孕晚期GBS感染孕妇蜕膜间质细胞死亡值与血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平呈正相关，提示孕晚期GBS感染孕妇蜕膜间质细胞死亡和炎性因子水平升高存在一定相关性。分析其原因在于，孕晚期GBS感染可引起血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高，其中IL-1β具有调节Th17细胞早期分化的作用，同时能激活IL-6、TNF-α等炎性因子的表达增加，并与其他炎性因子协同调节Th17细胞的增殖，从而加重炎症反应，促进蜕膜间质细胞死亡[19-20]。而即将死亡的蜕膜间质细胞会自发形成诸多生物分子，如细胞质、细胞核、线粒体等及部分化学成分，诸多变化易引起炎症反应加重，蜕膜间质细胞死亡与炎性因子水平升高形成恶性循环，共同影响母婴健康。本研究结果显示，孕晚期GBS感染孕妇不良妊娠结局发生率高于孕晚期无GBS感染孕妇，且妊娠结局不良孕妇蜕膜间质细胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平更高，进一步说明孕晚期上述指标异常升高可增加不良妊娠结局的发生风险。

表3 蜕膜间质细胞死亡值、血清炎性因子水平预测孕晚期GBS感染孕妇不良妊娠结局的价值

据此本研究推测孕晚期检测GBS感染孕妇蜕膜间质细胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平有助于预测不良妊娠结局的发生风险。进一步通过ROC曲线分析发现，蜕膜间质细胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平单独预测孕晚期GBS感染孕妇不良妊娠结局的AUC均在0.7以上，说明各指标均具有一定预测价值；但联合预测的AUC为0.903，预测价值更高，可为临床预测孕晚期GBS感染孕妇妊娠结局提供更准确的参考依据，从而指导临床采取合理有效的防范措施。

综上，孕晚期GBS感染可导致孕妇蜕膜间质细胞死亡值及血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高，且蜕膜间质细胞死亡值与炎性因子水平升高存在正相关关系，检测各指标水平有助于预测孕晚期GBS感染孕妇不良妊娠结局的发生风险。