献血者性别和年龄因素对悬浮红细胞储存期末溶血率的影响

何智纯 徐蓓 邱颖婕 杨剑豪 林俊杰

悬浮红细胞（以下简称“红悬液”）具有储存时间长、输注过程较为流畅等特点，是目前国内临床用量最多的红细胞成分[1]。红细胞在低温储存条件下会产生不同程度的损伤，并且随着储存期的延长，其损伤会逐渐增加[2]。储存期末溶血率（以下简称“溶血率”）是评价红悬液储存损伤最常用的质量监测指标[3]。引起红细胞储存损伤的因素主要有：献血者自身原因、血液采集、血液制备、血液储存与发放、血液输注等。欧美等地已有研究表明，献血者的一些固有差异，如性别、年龄，种族、饮食及疾病等因素会影响储存红细胞的寿命、氧化损伤及溶血率，同样也影响红细胞储存质量[4]，但相关因素对中国人群的研究还未见报道，本研究旨在探究献血者自身因素对红悬液溶血率的潜在影响，对近10年来红悬液常规质量控制检测数据以及相关献血者资料进行了回顾性分析，报告如下。

资料与方法

1 样本来源 本研究资料源自上海市血液中心2012年6月～2021年6月质控抽检的红悬液样本，共计400例，保养液为血液保存液Ⅱ，献血者均为汉族，其中男性234名、女性166名，献血年龄为18～58岁。

2 标本制备 血液采集、保存、制备及检测均符合《血站技术操作规程》要求，制备得到规格为1单位的红悬液，放置在（4±2）℃贮血冷藏箱保存，于第35天无菌取样检测储存期末溶血率。

3 主要试剂与仪器

3.1 仪器：五分类全自动血细胞分析仪（美国Beckman Coulter公司）；759S紫外可见分光光度计（上海棱光技术有限公司）；低温高速离心机（德国eppendorf公司）；医用贮血冷藏箱（青岛海尔医疗器械有限公司）。

3.2 试剂与耗材：一次性使用塑料血袋（苏州莱士输血器材有限公司）；邻联甲苯胺（上海远航试剂公司）。

4 检测方法 1） 取红悬液通过血细胞分析仪测定献血者血红蛋白、 血细胞比容值。2） 采用邻甲联苯胺法测定游离血红蛋白值，严格按照试剂使用说明书步骤操作。溶血率合格标准见《全血及成分血质量要求》[5]、计算公式见《血站技术操作规程》[6]。

5 统计学分析 采用SPSS19.0统计软件进行统计学分析，应用Origin 2019软件制图。计量资料以均值±标准差表示，如数据服从正态分布，则采用参数t检验，如数据不服从正态分布，则采用非参数Mann-Whitney U检验；两组以上数据组间比较，采用单因素方差分析，方差齐性，进一步采用Tukey法分析结果；计数资料采用频数（百分比）表示，组间比较采用卡方检验；影响因素分析采用logistic回归模型，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 献血者基本资料 本研究共纳入400例献血者，按照性别、献血年龄分成6组，即18～30岁男性组、31～40岁男性组、≥41岁男性组、18～30岁女性组、31～40岁女性组、≥41岁女性组，其中≥41岁女性组人数最少，占比为5.75%，18～30岁男性组人数最多，占比为29.75%，见表1。

表1 献血者基本信息（n=400）

2 溶血率频数分布情况 本次研究纳入400例储存35 d红悬液的溶血率数据，经过描述性统计分析，溶血率均数为0.20%，其中1.75%（7/400）红悬液溶血率超过国家标准最大限度0.8%，见图1。

图1 储存期末溶血率频数分布图

3 不同性别的红悬液溶血率比较 将400例红悬液溶血率按照性别分组，男性组溶血率（0.21±0.10）%高于女性组（0.19±0.10）%，P＜0.05，组间比较差异有统计学意义，见图2。

图2 不同性别红悬液溶血率比较

4 不同献血年龄的红悬液溶血率比较 将400例红悬液溶血率按照年龄分组比较，≥41岁组溶血率分别高于31～40岁组与18～30岁组，P＜0. 05，组间比较差异有统计学意义，见图3。

图3 献血年龄与红悬液溶血率比较

5 高溶血组与对照组红悬液溶血率的比较分析 将男性组和女性组，各献血年龄组数据按溶血率由高到低排列，以第90百分位数作为高溶血组和对照组分组依据[7]，溶血率≥0.40%为高溶血组（40/400），＜0.40%为对照组（360/400），男性高溶血组占比为7.5%，女性高溶血组占比为2.5%，男性组高于女性组；献血年龄18～30岁高溶血组占比为3.25%，31～40岁高溶血组占比为5.0%，31～40岁组高于18～30岁组；纳入性别、献血年龄构建多因素Logistic回归方程，结果发现：相对女性组，男性组增加溶血率发生的风险，差异具有统计学意义（OR=0.433，95%CI0.205～0.917，P＜0.05）；31～40岁组和≥41岁组较18～30岁组增加溶血率发生的风险，差异具有统计学意义（OR=1.637，95%CI1.077～2.487，P＜0.05；OR=1.613，95%CI1.082～2.313，P＜0.05），见表2。

表2 高溶血率危险因素的logistic回归分析

讨 论

我国2012版国家标准《全血及成分血质量要求》纳入了储存期末溶血率这一质量控制项目，要求溶血率小于0.8%作为红细胞成分溶血程度的判断标准，本研究对2012～2021年间规格为1单位的红悬液，按照《血站技术操作规程》要求抽检，共400例样本，并在红悬液保存第35天进行溶血率指标检测，每批次抽检符合率均大于75%，达到卫生行业标准《全血及成分血质量监测指南》规定的要求[8]，但其中1.75%的红悬液溶血率超过0.8%，未发现超过美国FDA红细胞成分储存期末溶血率标准（1.0%）的最大限度[9]。

影响红悬液溶血率的因素主要有，献血者性别、年龄、地域、遗传因素、饮食习惯等[10]，不同性别献血者的红细胞成分在结构、功能和代谢方面存在差异，其原因是表现在红细胞机械应力和氧化应激等方面，女性对红细胞储存损伤的影响小于男性，其红细胞储存质量优于男性[11]，本次研究发现男性溶血率明显高于女性。已有研究表明[12]，随着献血者年龄的增长，高脂血症、糖尿病及高血压等心脑血管疾病风险随之增加，而这些疾病易引起血红蛋白、血细胞比容等参数的改变，是影响红悬液溶血率升高的潜在因素。本研究通过献血年龄比较发现，红悬液溶血率随献血年龄的增加而升高，这与澳大利亚红十字血液中心的一项关于献血者去白悬浮红细胞溶血率研究相近[7]。此外，献血者种族背景的不同也会影响血液储存损伤的变化[13]，由于本研究人群均为汉族献血者，无法验证人种或民族遗传多态性与溶血率之间关系。

随着对红细胞储存损伤研究的不断深入，使人们意识到储存损伤不仅是体外存储引起，献血者差异也是影响储存损伤重要、难预测的因素，且个体差异可直接影响着红细胞的储存及输注疗效[14]。本研究按照0.4%作为高溶血率分组依据，发现献血年龄31～40岁组和≥41岁组发生溶血率的危险性高于18～30岁组，男性组高于女性组，根据这一情况，应在无偿献血的宣传招募方式上，针对女性特别是年轻女性制订相对应的招募策略，鼓励这部分人群献血，提高献血比例，以减少献血者性别、年龄差异引起的储存损伤风险。

血液从采集制备到运输和储存的过程，均可能对红悬液溶血率产生影响。2006年以来，各地血站根据原卫生部颁布的“一法两规”，均建立了覆盖采供血全过程的质量管理体系，并通过不断持续改进，有效保障临床输血安全。上海市血液中心在1999年率先根据ISO9000建立了质量管理体系，并在2019年荣获“上海市质量金奖”。中心的采供血全过程均符合国家法律法规的要求，并根据《血站技术操作规程》的要求，定期对血液采集、制备、储存和运输的过程进行监控，确保“血管到血管”全程的合规性、安全性和有效性。

综上所述，通过回顾性分析上海市血液中心10年的红悬液质量指标检测结果，可以表明献血者性别和献血年龄是影响红悬液储存期末溶血率变化的主要因素之一。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突