生血宝合剂对心衰大鼠心功能及MMP-2的影响*

张 洋 石志超

(1.大连医科大学附属第二医院中医科，辽宁 大连 116000；2.大连市中医医院石志超名老中医工作室，辽宁 大连 116000)

心衰是当今世界上最严重的疾病之一，5年内生存率为50%左右，低于癌症五年生存率；如伴有其他并发症其生存率更低。心衰作为临床多种心血管疾病的终末期表现，因其致残率、病死率高，治疗棘手，而成为了现代医学研究的重点与难点。心衰被世界著名心脏病学家Braunwald教授喻为“心脏病最后的大战场”。近半个世纪来对心衰的防治一直是心血管领域中基础医学与临床医学研究的重点课题之一。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组超过20种的锌依赖酶家族，因其需要Zn2+、Ca2+等金属离子作为辅助因子而得名。MMPs是一个较为庞大的家族，迄今为止被发现MMPs已有20余种。其中基质金属蛋白酶2(MMP-2)作为MMPs家族中重要成员之一，心肌中的MMP-2是降解心肌细胞外基质组分的主要酶类；心衰发生时，心肌组织中MMP-2表达升高，促使心肌胶原蛋白纤维化增加，导致心肌抗牵拉性、弹性作用丧失，引起心肌细胞拉长、室壁变薄、左心室扩大，引起心功能下降，最终导致心室重构[1,2]。赖诺普利为血管紧张素转换酶抑制剂，是目前治疗心衰的基石性药物，研究[3,4]表明其具有抑制MMP-2、抑制心室重构及改善心功能等作用。中医学认为，气血不足是心衰发生发展的基础，故益气养血为其有效治则，而中药生血宝合剂具有益气生血、滋补心肾的功效。本研究旨在观察中药生血宝合剂对心衰大鼠心功能及MMP-2的表达影响，为中医药治疗心衰提供新策略、新方药。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选用12周龄，普通级，健康、雄性SD大鼠100只，体质量220～260 g。实验所需动物由辽宁长生生物技术有限公司提供[SCXK(辽)2013-0002]。

1.2 造模与分组 随机选取10只未予任何处理的大鼠为空白对照组。90只大鼠7 d适应性喂养后，采用用注射用盐酸阿霉素10 mg/支，深圳万乐药业有限公司(国药准字号H44024359)，于每日腹腔注射盐酸阿霉素0.5 mg/kg，共注射4周；行心脏超声检测大鼠左室射血分数(LVEF)；以LVEF≤50%作为心衰成功造模的标准。将造模成功的大鼠随机分为模型组、赖诺普利组、生血宝合剂组，每组10只大鼠，余造模成功大鼠退出本次实验。

1.3 药物与给药剂量 生血宝合剂(每瓶100 mL)，由清华德人西安幸福制药有限公司生产，国药准字Z20050770。赖诺普利片(每片10 mg)，由上海信谊万象药业股份有限公司提供，国药准字H10960265。空白对照组与模型组灌胃蒸馏水1.8mL/次，日2次。各给药组大鼠按人鼠剂量换算，给药剂量(g/kg)=给出的人的剂量(g)×系数(0.018)/所求动物体质量(kg)，灌胃给药。各给药组，给药为9.2 g生药/kg/d，日2次；西药组，1.5 mg生药/kg/d，日2次[5]。上述各组均灌胃6周。

1.4 检测指标 给药6周后，各组大鼠行多普勒超声心动图机(型号SONO S5500，厂家Agilnet公司)检测心功能(LVEDd、LVEDs、FS、EF)；取心肌组织90 mg，用于PCR技术检测MMP-2的表达。

2 结果

2.1 各组大鼠心功能检测结果 与模型组比，生血宝合剂组LVEDd、LVEDs明显下降，FS、EF明显升高(P<0.05)。见表1。

表1 各组大鼠心功能变化情况

2.2 各组大鼠心肌MMP-2表达 与模型组比，生血宝合剂组MMP-2表达明显下降(P<0.01)。见表2。

表2 各组大鼠心肌中 MMP-2表达分)

3 讨论

通过对古籍及相关文献查阅发现，“心衰”一词共有出现20余次，在理法、方药、养生中均有涉及。心衰一词首见于春秋战国时期韩非子所著《韩非子·解老》，载“由是观之，礼繁者，实心衰也”。其文献中所记载的“心衰”是指人情感或感情的悲伤、衰落、枯竭而言。其与相对疾病而言的心衰无相关性。“心衰”作为病名首见于西晋王叔和《脉经·脾胃部第三》，载“心衰则伏，肝微则沉，故令脉伏而沉”。唐代孙思邈《备急千金要方·脾脏方》载: “脾者土也，敦而福…… 心衰则伏，肝微则沉，故令脉伏而沉”。孙思邈关于“心衰”的记载描述与王叔和《脉经》中的记载一致；由此可见孙思邈对于“心衰”的描述是源于《脉经·脾胃部第三》。北宋赵佶《政和圣剂总录·心脏门·心脏统论》曰: “心衰则健忘，心热则多汗”。明代《养生导引秘籍》载：“肾旺心衰，减咸增苦”。清代《形色外诊简摩》载：“面起浮光，久哑，无外邪实证者，心衰肺瘪，所谓声嘶血败，久病不治也”。《医述·脏腑》记载“心主脉，爪甲色不华，则心衰矣”。《临症验舌法·方略》载“济生归脾汤去木香加丹皮麦冬方主治心衰火盛……”。此外“心衰”在《黄帝素问宣明论方》《普济方》等书中亦有多次提及[6]。心衰其病机之根为阳微阴弦、本虚标实之证候。本虚以心肾气虚为主，标实则以心血亏虚为重。故补益心肾、调和气血为其有效治则。

本研究采用盐酸阿霉素腹腔注射法建立大鼠心衰模型，给予生血宝合剂及赖诺普利进行干预观察。行超声心动图发现，与模型组比，中药生血宝合剂组大鼠心功能较模型组有明显改善。通过PCR检查心肌组织中MMP-2发现，与模型组比，中药生血宝合剂组心衰大鼠心肌MMP-2的表达明显下降(P<0.05)。上述结果表明中药生血宝合剂具有改善心衰大鼠心功能及抑制心衰后心肌组织中MMP-2表达的作用。其作用机制可能是通过降低MMP-2活性，提高心肌收缩力，增强心脏输出量，进而达到抑制心衰的作用。生血宝合剂为棕褐色液体，气微香，味甜、微苦，其主要成分为黄芪、白芍、桑椹、何首乌、女贞子、墨旱莲、狗脊等，具有益气生血，滋补心肾之功效[7]。本研究表明，中药生血宝合剂中的各味中药配伍后，在治疗心衰过程中起到了协同及促进作用，为中医“气能生血，血能养气”的理论提供了科学客观的依据 。