1例牛支原体肺炎的诊治

张炯慧

新疆福海县畜牧兽医站，新疆 福海 836400

牛支原体是引起牛支原体肺炎的重要病原体，致病力强。牛支原体的感染呈世界性分布，常与关节炎、乳腺炎、结膜炎和耳炎有关。感染牛支原体的牛是主要传染源，可以通过呼吸道排出病菌，传染给健康牛，引发呼吸系统疾病。牛支原体肺炎严重危害牛群健康以及养殖户经济效益[1]。因此，养殖户应采取科学的方法进行防治，降低牛支原体肺炎感染率，并及时治疗病牛，保证牛群的健康成长。因此，如何有效防治牛支原体肺炎已成为许多学者与养殖户关注的重点。

1 牛支原体概述

1.1 牛支原体介绍

牛支原体是牛群养殖中相对常见的致病性病原体，多寄生在病牛的鼻腔或乳腺中，通常可从病牛的肺部病灶中直接分离，或是从病牛的淋巴结组织中检出。因为缺少细胞壁，所以抗热能力偏弱，对高温敏感，伴随温度升高，存活力减弱，处于无阳光状态下可存活数日，处于20 ℃温度中可存活1～2 周，在37 ℃环境中可存活1 周，在粪便中可存活37 d[2]。

1.2 流行病学

牛支原体是牛群较易感染的病原菌，可引发地方流行性疫情，其中肉牛及奶牛感染率更高，而水牛或小体型反刍动物感染率较低，不会感染人，牛支原体感染的潜伏期不明。我国牛支原体肺炎感染和暴发与运输密切相关，一般是在牛群运输至目的地后1 周发作[3]。部分牛群在运输至目的地后第2天便发病，部分架子牛在抵达目的地10 d 后发病。牛支原体肺炎可以同时与其他病原体形成混合感染，长途运输、饲养方法以及环境变化等因素也是诱发该病的主要因素。

2 病例介绍

2.1 病例资料与病理变化

2020 年11 月中旬，本地区养殖户分批次从外地引入肉牛48 头，1 周后少数牛发病，部分牛在到达目的地第2 天即发病。所有病牛临床症状相近：①病情严重的病牛，停止反刍；②体温明显升高，大部分病牛可达41.5 ℃左右；③呼吸困难，被迫采用腹式呼吸，期间自动伸颈，前肢分开，同时发出呻吟；④喜欢保持卧姿，按压肋骨有痛感反应；⑤伴发阵发性咳嗽，且在清晨与夜间尤为剧烈，外流鼻液呈透明或脓性，肺部听诊肺泡音明显减弱甚至消失，呼吸过程中有明显的支气管啰音及胸摩擦音；⑥后期病牛并发便血与关节炎，行走明显障碍，关节内有脓肿；⑦病情相对较轻的病牛，精神抑郁、毛粗乱，体型消瘦，容易出现干性短咳嗽；⑧犊牛病情相对严重，病死率多达25%。养殖户初期应用青霉素、链霉素以及磺胺类药物进行简单治疗，但无明显效果。总计有2 头病牛死亡，针对其中1 例病牛进行解剖，病理变化如下所示：牛支原体肺炎病变位置主要集中在胸腔及肺部，临床表现为肺部坏死，间质增宽，产生大理石样病变。胸膜显著增厚，胸腔内积液混浊，且混合了纤维素块的黄色液体。胸膜和肺部患处产生粘连，心包含积液，液体相对澄清，呈黄色；支气管与淋巴结明显肿大，且存在出血症状；肺部存在化脓性坏死灶，呈广泛分布的特点；其他病变与并发感染有关，病例肝脏表面存在化脓性坏死灶以及虫移行痕迹；肠系膜淋巴结肿大，呈暗红色，切面汁液较多，有液体外渗。

2.2 实验室诊断

1）细菌分类培养。无菌采用病死牛的肺脏血琼脂平板，置于37 ℃环境下培养12～48 h，以了解细菌的生长状况。

2）支原体分离培养。对牛肺脏组织予以研磨与过滤处理，依照10%的接种量把滤液接种至PPLO支原体培养基内，置于37 ℃环境中培养，为期4 d，之后接种在支原体固体培养基，同样置于37 ℃环境中培养，持续4 d，观察菌落情况。

3）PCR 扩增。采集病死牛肺部等器官并予以研磨处理。利用基因组RNA/DNA 提取试剂盒，提炼病料RNA/DNA，应用特异性引物RT-RNA/DNADE 检验牛支原体、化脓隐秘杆菌、牛传染性鼻气管炎病毒、牛冠状病毒、牛病毒性腹泻病毒以及溶血曼式杆菌等总计8 种病原，并通过电泳观察结果。

4）药敏试验。选用多西环素、氧氟沙星、林可霉素、阿莫西林以及头孢拉定等总计12 种药物开展药敏试验。

5）实验室结果。细菌分离鉴定方面，病死牛肺脏组织在血平板接种1～2 d 后并未发现菌落数生长。支原体分离培养方面，接种的PPLO 支原体培养从玫瑰色转为橘红色。支原体固体培养基上形成针尖样菌落，通过光学显微镜观测，可以发现煎蛋样菌落。从PCR 扩增结果而言，通过RT-RNA/DNA 检验牛支原体、多杀巴氏杆菌、牛传染性鼻气管炎以及溶血曼氏杆菌等病毒，结果显示，仅存在和牛支原体引物扩增相符的条带大小。药敏试验结果方面，该支原体对马波沙星、氧氟沙星、环丙沙星以及恩诺沙星等敏感；对多西环素、氟苯尼考、替米考星、阿莫西林、林可霉素、头孢拉定以及头孢噻肟耐药。

3 牛支原体肺炎的诊断

就本次案例而言，通过病牛临床症状、解剖症状、细菌分离鉴定、支原体培养以及PCR 扩增等检验方式明确该病症是因牛支原体感染所致。牛以呼吸道发病为主要临床症状的因素较多，包括病毒，如牛冠状病毒、牛副流感病毒3 型以及牛病毒性腹泻病毒等；细菌，包括多杀巴氏杆菌、溶血曼氏杆菌等；支原体、寄生虫单独或是联合感染等。同时，一些外界环境因素也可能诱发呼吸道发病症状，如卫生环境、交通运输环境等[4]。本次研究显示致病原因含2 个方面：一是，病牛所在牛群由外省引入，经过长时间的运输，身体抵抗能力减弱，容易患病；二是，该养殖户在我国新疆，气候干燥，天气炎热，容易引发牛呼吸道病症。本次病例解剖与试验中仅检出牛支原体，证明该病例主要是因为牛支原体感染引发。

牛支原体实验室诊断较为常用的方式包括血清学、病原学以及分子学。血清一般是用作流行病学调查以及前期诊断，酶联免疫吸附试验是牛支原体流行病学检验中应用最为广泛的血清学检验方式之一[5]。但是，不同试剂盒的特异性以及精确度也存在一定的差别。病原菌分离培养方式相对直观、可靠与便捷，是诊断该病症相对靠谱的方式，因为支原体缺少细胞壁，所以对培养条件要求较为严格，培养难度较高，且需要较长的时间，还需投入大量精力[6]。所以，检验常用PCR、高通量芯片技术以及LAMP 予以诊断，利用设计特异性引物，包括uvrC 以及OPPD/F 等。雌激素可以精准且迅速地区别牛支原体与其他支原体。就本次病死牛解剖即采用支原体分离培养技术以及PCR 鉴别诊断技术，结果显示二者均从病例中检测获得牛支原体。

4 病牛治疗方案

治疗应坚持早诊断与早治疗的基本原则，避免疫情进一步扩散。养殖户需要对病牛进行隔离饲养，并采用抗菌药物以及消炎药物予以治疗。急性：如果有超过30%的牛感染且需要治疗，其他健康牛可能处于隐性感染状态，最好使用不同的抗生素进行全群治疗。对病牛肌肉注射恩诺沙星注射液，剂量为0.1 mL/kg，2 次/d，持续注射3 d，牛饲料中添加5%的多西环素以及20%的替米考星粉剂。另外，建议用维生素C 注射液、维生素K3注射液、5%葡萄糖生理盐水注射液、能量合剂，以此控制病情的蔓延。慢性：肌肉注射抗生素，泰乐菌素4～10 mg/kg、土霉素10 mg/kg、螺旋霉素20 mg/kg、壮观霉素20～30 mg/kg。

5 牛支原体肺炎防治措施

5.1 及时隔离

如果养殖人员发现牛群中已经有感染牛支原体的病牛，必须及时对其进行隔离饲养，以限制病情的进一步蔓延。并及时对所有牛进行血清抗体检验，如果有牛血清抗体显示为阳性，即证明该牛可能患病，同样需要隔离。隔离期间，养殖户可以采用抗生素治疗。如果病牛的临床症状显著，且存在恶化趋势，应及时进行扑杀，并予以无害化处理。

5.2 强化监督管理

如果养殖场需要引入外地牛，养殖人员需要对牛进行检疫，在引种前预先调查病牛产地，严禁在病区或是隔离区内引入，并对牛支原体、泰勒虫等病症开展检疫接种，避免引入带病菌的牛群，落实检疫措施。另外，引入外地牛时，应确保没有疫情后才能实行混合饲养。

5.3 定期消毒

养殖户应严格落实卫生消毒制度，定期对养殖场及其附近环境进行消毒，建议采用25%的草木灰以及20%石灰乳喷撒养殖场，保证养殖场干燥度满足要求。定期清洁养殖场内的粪便，并进行无害化处理。保证良好的通风环境，以免有害气体的产生，进而损害牛的呼吸道黏膜。另外，养殖户应保证灭蝇以及灭鼠等工作，以免产生病原传播的问题。

5.4 强化饲养管理

牛患有牛支原体肺炎和环境等因素之间关系密切，养殖人员需要尤为重视饲养管理工作，确保牛舍的通风良好，环境干燥，且需要重视冬季的防风以及保暖工作。另外，养殖人员需要合理管控牛群的密度，结合年龄以及牛群来源分别饲养，避免病情蔓延。养殖场如果采用异地引种的方法，需要先调查引种牛相关信息，包括食欲、精神状况以及养殖档案，检验牛排便状况，确认引种牛是否健康。在正式引种前，还需调查牛的集散地以及生产地，明确是否有防疫证明。另外，引种在进入养殖场前，必须先隔离饲养，保证没有问题后才可引入牛场饲养。