肋柱花的研究进展

刘学良，石春兰，王永晶，祁彦凯，陈 鹏，年永琪，牛贵姗，汪永明，刘海青

(青海省药品审评核查中心，青海 西宁 810007)

肋柱花(蒙文名：哈比日根-地格达，亦称特木尔-地格达)为龙胆科植物肋柱花(Lomatogoniumcarinthiacum(L.)Fries ex Nym.)的全草，现收载于卫生部药品标准蒙药分册。蒙医认为肋柱花味苦，性寒、钝、糙、轻、燥；具有平息“协日”、清热、健胃、愈伤的功效。蒙医将其以“地格达”入药，用于“协日”热、瘟疫、流感、伤寒、中暑头热、肝胆热、黄疸、胃“协日”、伤热等[1-2]，也是蒙医治疗肝胆疾病的主要传统药物。同时，肋柱花也作为藏药“蒂达”(藏茵陈)的来源之一，被藏医用于治疗肝胆系统疾病[3]，临床疗效显著。目前，人们对肋柱花的研究较多，本文根据近30年的研究文献，对其化学成分分离鉴定、质量控制、药理研究等方面进行了系统综述，为今后深入研究、开发、利用肋柱花提供参考。

1 化学成分研究

2 质量控制研究

2.1 鉴别

王振旺等[11]、陈常莲等[12]对肋柱花的粉末及茎的横切片进行显微鉴别研究，观察到了不定式气孔、花粉粒、 非腺毛、螺纹导管、纤维；在茎横切片均可见角质层、表皮、皮层、韧皮部、木质部和髓部；后者还对叶横切面进行了研究。沙日娜[13]也对肋柱花茎、叶横切面进行了研究，用理化显色反应对黄酮类成分进行了鉴别。巴根那等[14]采用薄层色谱法建立了肋柱花中木犀草素、獐牙菜苦苷的定性鉴别方法。白翠兰等[15]分别取肋柱花全草、花、叶、根，采用薄层色谱法建立了熊果酸的定性鉴别方法。研究结果稳定可靠，操作简便，具有专属性，可用于肋柱花的的定性鉴别。

2.2 含量测定

肋柱花中有效成分、指标性成分的含量测定，主要集中在獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、当药黄素、当药醇苷、苦龙苷、木犀草素、异荭草苷、芹菜素、盐酸小檗碱等成分。巴根那等[14]采用HPLC法以甲醇-水(25∶75)为流动相，Diam onsil C18色谱柱( 250 mm×4.6 mm，5 μm)，检测波长为237 nm，柱温为50 ℃，测定椭圆叶花锚中獐牙菜苦苷的含量，獐牙菜苦苷对照品进样量在 0.313～1.563 μg范围内具有良好的线性关系，回收率为99.50%，RSD为0.92%。席海山等[16]采用HPLC法以乙腈-0.34%磷酸二氢钾溶液(30∶70)为流动相，Xterra色谱柱，检测波为345 nm，柱温为25 ℃，测定肋柱花中盐酸小檗碱的含量，盐酸小檗碱在6.25～50 μg/mL范围内具有良好的线性关系，平均回收率为97.7%，RSD为0.94%。包同力嘎[17]、王秀梅等[18]通过对提取时间、流动相等条件进行考察，采用HPLC法，分别以甲醇-0.1%磷酸溶液( 25∶75)、甲醇-水(25∶75)为流动相，色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)，检测波长为238 nm、237 nm，柱温为25 ℃、50 ℃，测定肋柱花中獐牙菜苦苷的含量；后者测定的4批不同产地样品中獐牙菜苦苷含量范围为1.493%～10.954%，差异较大。张召华等[19]采用HPLC法以甲醇-0.04%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，色谱柱为Kromasil-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)，检测波长为254 nm，柱温为30 ℃，测定肋柱花中当药黄素、当药醇苷、苦龙苷的含量，獐牙菜苦苷在0.675 0～4.050 0 μg、0.005 5～0.330 0 μg、0.027 5～0.165 0 μg范围内具有良好的线性关系，平均回收率分别为99.90%、99.15%、99.88%，RSD分别为0.42%、0.42%、0.11%。王秀梅等[20]采用HPLC法以甲醇-水为流动相，梯度洗脱，色谱柱为Dia-monsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)，检测波长为350 nm，柱温为 35 ℃，测定肋柱花中木犀草素的含量，木犀草素在0.052～ 0.312 μg范围内具有良好的线性关系，平均回收率为98.13%，RSD为1.04%。王振旺等[21]采用HPLC法以甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45)为流动相，色谱柱为Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)，检测波长为237 nm，柱温为25 ℃，测定肋柱花中獐牙菜苦苷、当药黄素的含量。獐牙菜苦苷、当药黄素分别在0.27～5.40 mg、0.165～3.30 mg范围内呈现良好的线性关系，加样回收率分别为 98.49%、97.35%，RSD分别为1.06%、1.45%。丁文雅等[22]采用HPLC法以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，色谱柱为Lichrospher C18，检测波长为254 nm，柱温为28 ℃，测定肋柱花等7种龙胆科药材中龙胆苦苷的含量，结果显示，龙胆苦苷在0.26～26.12 μg范围内呈现良好的线性关系，肋柱花中龙胆苦苷含量为0.45%，低于其他药材。吕颖等[23]采用HPLC法以甲醇-水为流动相，梯度洗脱，色谱柱为Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)，检测波长为237 nm，柱温为25 ℃，测定肋柱花等3种“地格达”类蒙药材中獐牙菜苦苷、当药黄素的含量，含量分别在0.27～5.40 mg、0.16～3.30 mg范围内呈现良好的线性关系，加样回收率分别为 98.49%、97.35%，RSD分别为1.06%、1.45%。研究认为三种药材中因种类和产地不同而差异较大，临床用药需斟情使用。孙兴姣等[24]采用HPLC法对15批不同产地的肋柱花进行指纹图谱研究，色谱柱为YMC C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈-0.4%磷酸水-甲醇，梯度洗脱，检测波长为254 nm，柱温30 ℃，共确定15个共有峰，指认獐牙菜苦苷、 异荭草苷、当药黄素、芹菜素、木犀草素5个共有峰，15批肋柱花与对照指纹图谱的相似度在0.881～0.997之间，为肋柱花质量控制提供了科学依据。

2.3 微量元素测定

袁元园等[25]采用硝酸-微波消解肋柱花样品，结合ICP-OES方法检测微量元素，检出18种矿质元素，结果显示肋柱花中钙、镁、铁元素含量较高，线性相关系数在0.999 0～1.000 0，检出限低于0.004 0 mg·kg-1，各元素加标回收率在88%～106%，其中12种元素在95%～104%。肋柱花中铜元素含量低于相关标准，镉、砷、铅含量均高于国家标准，认为部分重金属元素含量超标的原因可能与药材采集地土壤生态环境的影响有关。该研究仅对1份样品进行了测定，样品不具有代表性，但其测定方法值得借鉴。

3 药理研究

3.1 保肝作用

包明兰等[26]以 CCl4致体外肝细胞损伤模型为研究对象，观察肋柱花水提物、含肋柱花血清、獐牙菜苦苷对损伤的体外肝细胞保护作用。结果显示，随药物浓度增加，Hela细胞的抑制作用增强、增殖活力下降；在安全浓度下部分实验药物表现出不同程度的抗CCl4所致体外肝细胞损伤作用。同时研究证明，肋柱花抗急性肝损伤的药效物质基础，除了獐牙菜苦苷以外，还与其他体内移行成分有关，但有待进一步研究。包明兰等[27]另以CCl4和D-GlaN诱导小鼠急性肝损模型为研究对象，给药后通过检测比较正常组、2个模型组、阳性对照组等小鼠血清中丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶活性及胆碱酯酶的含量，计算肝脏指数，对肝组织病理形态进行观察并评分。研究结果表明，肋柱花水提物对CCl4和D-GlaN致小鼠急性肝损伤有一定保护作用。白梅荣等[28]将肋柱花粉剂作用于HepG2.2.15细胞系，通过测定样品对上述细胞的毒性，检测细胞上清中HBsAg、HBeAg的变化，同时检测细胞与其上清中总 HBVDNA含量。研究结果显示，肋柱花对该细胞毒性较低，对该细内 HBVDNA拷贝数有一定的抑制作用，对该细胞分泌HBsAg、HBeAg无抑制作用。认为肋柱花在体外具有抗乙肝病毒作用，其机制可能是通过抑制HBVDNA、诱导感染乙肝病毒的 HepG2.2.15细胞凋亡，而发挥抗乙肝病毒活性。

3.2 抗菌作用

孙建军等[29]先后用75%乙醇和水提取肋柱花药材，将提取液浓缩成浸膏，再依次用不同极性的溶剂(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)分别萃取得到不同部位，加水溶解后，以平皿钢管法测定肋柱花不同部位对金黄色葡萄球菌等6种菌的抑菌活性都较强。结果显示，乙酸乙酯萃取部位对金黄色葡萄球菌等6种菌株具有较强抑菌作用。

4 讨论

肋柱花的药效显著，在蒙医、藏医临床应用较为广泛，但若无合适的质量标准来控制其质量，则难以保证其有效性和安全性。本文在结合前期肋柱花研究的基础上，对其研究现状与进展进行总结，旨在为肋柱花及其制剂的质量标准和质量控制研究提供参考，探明肋柱花的药效与物质基础的关系，建立完备的质量控制体系。

5 建议