不同杀菌剂对苹果黑星病菌的毒力测定

王 华，李 鹏

（1.伊犁职业技术学院，新疆伊宁 835000；2.先正达（中国）投资有限公司，北京 100005）

苹果黑星病菌［Venturia inaequalis(Cooke)Winter］是引起苹果黑星病的病原真菌，该病菌在苹果生长季节里能连续不断地产生大量分生孢子，反复侵染寄主。苹果树一旦被苹果黑星病菌感染，发病迅猛，蔓延快速。目前，苹果黑星病的防治主要依赖于化学药剂，随着杀菌剂的持续施用，在很多地区已发现苹果黑星病菌对腈菌唑和苯醚甲环唑产生了不同程度的抗药性[1-3]，导致杀菌效果减弱。

苹果黑星病发生范围较广，在我国黑龙江、吉林、内蒙古、辽宁、河南、河北、甘肃、宁夏、山东、山西、陕西、新疆、四川、云南等地都有分布，尤其在部分地区发生严重，已影响到苹果产业的可持续发展[4-5]。为寻找防治苹果黑星病更加有效的杀菌剂，本研究筛选了7种杀菌剂，并测定了其对苹果黑星病菌的室内毒力，以期为田间防治苹果黑星病药剂的选择和轮换提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试菌株：新疆伊犁地区苹果黑星病菌代表性菌株。

供试药剂：10%苯醚甲环唑WG，天津市华宇农药有限公司；50%啶酰菌胺WG，巴斯夫有限公司；50%嘧菌环胺WG、20%氟唑菌酰羟胺SC，先正达作物保护有限公司；80%嘧霉胺WG，烟台科达化工有限公司；20%吡噻菌胺SC，日本三井化学AGRO株式会社；25%吡唑醚菌酯SC，江西海阔利斯生物科技有限公司。

1.2 试验方法

采用菌丝生长速率法测定各药剂对病原菌生长的抑制情况。将稀释后的药剂与熔化后的PDA培养基以1∶9的体积比混合均匀，制成含药平板。每种药剂设置5个浓度梯度，每个浓度设置3个重复，用加入相同体积无菌水的PDA培养基作为对照。药剂有效质量浓度见表1。

表1 供试杀菌剂质量浓度梯度

将苹果黑星病菌培养20 d后，用5 mm灭菌打孔器打取若干菌饼，供毒力测定使用。将菌饼移接至含药培养基及对照培养基中央，在18℃，光照1 200 lx，12 h黑暗，12 h光照的条件下培养15 d后，用十字交叉法测量菌落直径并拍照。

1.3 数据分析

按式（1）计算菌丝生长抑制率。使用SPSS19.0软件基于Probit回归法[6]对所得数据进行毒力回归方程分析，得到半数有效浓度（EC50）。

2 结果与分析

2.1 7种杀菌剂对苹果黑星病菌的抑制效果

试验结果发现7种供试杀菌剂对苹果黑星病菌菌丝均有一定的抑制作用，14.280 μg/mL 10%苯醚甲环唑WG、333.300 μg/mL 50%啶酰菌胺WG、500.00 μg/mL 50%嘧菌环胺WG、53.330～533.300 μg/mL 80%嘧霉胺WG、6.666×10-3～6.666×10-2μL/mL 20%吡噻菌胺SC、1.923×10-2～1.923×10-1μL/mL 25%吡唑醚菌酯SC、4.00～40.00 μL/mL 20%氟唑菌酰羟胺SC对苹果黑星病菌的菌丝抑制率都可达到100.00%。药剂20%吡噻菌胺SC和25%吡唑醚菌酯SC在有效质量浓度较低时具有很高的菌丝抑制率；10%苯醚甲环唑WG、50%啶酰菌胺WG、25%吡唑醚菌酯SC、20%氟唑菌酰羟胺SC也表现出较好的抑制率，而菌丝抑制率最差的是50%嘧菌环胺WG。

表2 不同杀菌剂对苹果黑星病菌的抑制效果

2.2 7种杀菌剂对苹果黑星病菌室内毒力

从表3可知，R2值均大于0.70，说明毒力回归方程与观测值拟合程度较好。7种供试杀菌剂中，对苹果黑星病菌菌丝的EC50值从小到大依次是20%氟唑菌酰羟胺SC、25%吡唑醚菌酯SC、20%吡噻菌胺SC、10%苯醚甲环唑WG、50%啶酰菌胺WG、80%嘧霉胺WG和50%嘧菌环胺WG。毒力最好的是20%氟唑菌酰羟胺SC，EC50值为1.349 9×10-5μL/mL；其次为25%吡唑醚菌酯SC，EC50值为2.967 6×10-5μg/mL；最差是50%嘧菌环胺WG，EC50值为4.316 2 μg/mL。

表3 7种杀菌剂对苹果黑星病菌室内毒力测定结果

3 结论与讨论

目前，世界各地苹果产区苹果黑星病菌种群对苯醚甲环唑和腈菌唑已经具有了耐药性和抗药性[1-3]，苹果黑星病菌的抗性突变体能改变氧化酶、呼吸作用等，使黑星病菌对嘧菌酯由敏感变成抗药。也有研究表明，苹果黑星病菌的抗药性同DMI类杀菌剂的施用次数呈线性正相关。本研究选用7种杀菌剂对苹果黑星病菌进行毒力测定。结果表明，7种杀菌剂在不同浓度下对苹果黑星病菌均有不同程度的抑制作用。EC50值从小到大依次是20%氟唑菌酰羟胺SC、25%吡唑醚菌酯SC、20%吡噻菌胺SC、10%苯醚甲环唑WG、50%啶酰菌胺WG、80%嘧霉胺WG和50%嘧菌环胺WG。抑菌效果最好的是20%氟唑菌酰羟胺SC，其次是25%吡唑醚菌酯SC，其中20%氟唑菌酰羟胺SC、25%吡唑醚菌酯SC和20%吡噻菌胺SC 3种杀菌剂的抑菌效果都优于生产上常用的10%苯醚甲环唑WG。本研究结果与郭健等[9]的研究一致：氟唑菌酰羟胺和吡唑醚菌酯对苹果黑星病菌分生孢子萌发具有较好抑制作用。因此，上述药剂可进行田间试验以进一步明确防治效果。