山羊病毒性关节炎-脑炎的诊断与预防
2022-12-12曹普
曹 普
(甘肃省定西市安定区畜牧兽医局葛家岔畜牧兽医站,甘肃定西 743000)
山羊病毒性关节炎-脑炎是由山羊关节炎-脑炎病毒(Caprine Arthritis-encephalitis Virus,CAEV)引发的慢性传染病,成年羊主要表现为慢性多发性关节炎,部分伴发间质性肺炎、间质性乳腺炎,羔羊主要表现为脑脊髓炎。本病呈现世界性分布特点,在许多国家呈现高感染率[1]。1982年,我国在山羊引种时首次将CAEV引入我国,此后许多省市暴发此种传染病。一旦山羊感染CAEV,终生带毒,传染性强,目前并无针对性治疗方法,最终会导致山羊死亡,病死率100%[2]。该病危害严重,会给畜牧养殖业造成沉重打击。因此,畜牧养殖户必须了解本病特点,积极防控。
1 概述
1.1 病原分析
CAEV是一种RNA病毒,归属于反转录病毒科、慢病毒属。此种病毒在形态、生物学特征方面,与梅迪-维斯纳病毒(Medi-Visner Virus,MVV)极为相似,二者有20%的同源性,存在血清学交叉反应。该病毒粒子直径80~100 nm,分子量2.5×106,浮密度1.15 g/cm3,含有64s、4s两个片段。山羊为该病毒的易感群体,尤其是奶山羊,小鼠、鸡胚、地鼠等其他动物感染实验证实均不发病[3]。
1.2 流行病学
山羊病毒性关节炎-脑炎,可发生于任何性别、任何年龄、任何品系山羊中,其中以成年羊为主。CAEV具有高传染性,潜伏期阴性患羊、患病羊均为传染源。CAEV主要经水平传播,有时会发生子宫内感染。消化道为本病主要感染途径,被污染的草料、水均可作为传染媒介,病毒还可经乳汁传染给羔羊。同居放牧12个月以上可发生水平传播,携带CAEV公羊与健康母羊持续接触1~5 d一般不会引发感染[4]。本病可发生于一年中的任何季节,除脑脊髓炎型外,多无明显季节特点。
山羊病毒性关节炎-脑炎多为慢性持续感染,CAEV潜伏期很长,至发现病情时,往往整个羊群都已被感染。饲养管理条件为影响本病发展的重要因素,良好的饲养条件多无明显症状表现;但饲养条件差会导致本病快速恶化、发展,患羊可在短时间内死亡。
1.3 症状表现
不同山羊病毒性关节炎-脑炎患羊症状表现存在一定差异,主要可以分为3种类型:
(1)关节炎型:见于1岁以上成年羊,主要表现为:腕关节肿大、跛行,可同时伴有膝关节、附关节行动异常表现,突然发病或病情日益加重。发病初期,可见关节软组织水肿、疼痛、不同程度跛行;病情逐渐加重,可见关节肿大、行动不便,严重者前膝跪地;部分患羊伴有淋巴结肿大。病程可持续1~3年,最终死亡。
(2)脑脊髓炎型:多发生在2~4月龄羔羊中,潜伏期53~131 d,常见于3~8月。发病初期,跛行、精神萎靡,进一步发展可见四肢强直、共济失调,有些患羊有眼球震颤、头颈歪斜、横卧不起、吞咽功能障碍。病程可持续6~12个月,最终死亡,少数能耐过疾病,留有后遗症。经尸检,可见小脑、脊髓中白芷呈现棕红色微小病灶[5]。
(3)肺炎型:此种类型较为少见,可发生于任何年龄段山羊中,主要表现为日渐消瘦、体质衰弱、咳嗽、呼吸困难,进行肺部听诊能闻及湿罗音。病程可持续3~6个月,最终死亡。经尸检可见肺部质地变硬,肺表面有灰白色小点,肺切面有斑块状实变区域,伴淋巴结肿大。
1.4 病理特征
山羊病毒性关节炎-脑炎患羊病理改变多样,主要集中于中枢神经系统、四肢关节、脏腑,部分患羊伴有乳腺病理改变。
(1)中枢神经系统病理改变:主要发生于患羊小脑和脊髓灰质,小脑与延髓切断左前庭核部位,在一侧脑白质中有棕色病变,镜检可见其周围有网状纤维、淋巴样细胞、单核细胞增生,可见套管,并且周围环绕一层胶质状质细胞和少突胶质细胞,神经纤维出现脱髓鞘现象。
(2)四肢病理改变:关节周边软组织有肿胀波动,伴明显皮下浆液渗出、关节囊肥大、滑膜与关节软骨粘连,关节腔扩大且内部有黄红色液体,组织液中有纤维蛋白、血凝块悬浮。镜检,可以看到关节腔滑膜处绒毛增生折叠,周围淋巴细胞、单核细胞聚集,生纤维化或蛋白性坏死。
(3)脏腑病理改变:主要表现为肺脏轻微肿大,触摸质硬,呈青灰色,表面有灰白色小点,肺切面可见大叶性、斑块状实变区域,支气管及纵膈淋巴结明显肿大,支气管中有黏液。镜检,可见淋巴小结、肺泡增生,并可观察到周围临近细胞纤维化。
(4)乳腺病理改变:少数患羊有乳腺病理改变,发生乳腺炎,乳房坚挺、肿胀,乳汁明显减少。镜检可见乳腺附近的血管、乳腺导管和腺叶间有淋巴细胞和单核细胞等流出,并可见到大量浆细胞,间质发生坏死。
2 诊断方法
山羊病毒性关节炎-脑炎症状表现多样,危害严重,既可使羔羊因脑炎、脊髓炎死亡,也可使成年山羊发生关节炎综合征、最终死亡,患羊病亡率100%。而且,本病与MVV感染症状较为相近,若不加以重视可能造成不可挽回的、严重经济损失。因此,必须重视本病,最好诊断与预防工作。临床中主要基于流行病学特点、临床症状、病理特征,对本病予以初步诊断,然而若要明确诊断需要进行实验室检查。具体诊断方法如下:
2.1 初步诊断
根据山羊病毒性关节炎-脑炎症状流行病学特点、不同类型患羊症状表现、病理学特征,可以初步发现病情。当羊群中有一种或多种类型山羊病毒性关节炎-脑炎症状表现时(具体症状参考“1.3症状表现”),可以初步判断为患病。
2.2 实验室检查
初步诊断为山羊病毒性关节炎-脑炎后,可以借助实验室检查技术,进一步明确诊断。主要检测方法包括:病毒分离鉴定、琼脂糖凝胶扩散试验(Agar Gel Immunodifusion,AGID)、酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked Immune Sorbent Assay,ELISA)。
(1)CAEV病毒分离鉴定:临床中多采集山羊滑膜细胞进行病毒分离培养、鉴定,细胞分离培养后5~10 d会发生明显的细胞病变,表现为出现多核巨细胞、发生细胞溶解等,在细胞病变观察基础上进行反转录酶试验、动物回归试验、免疫标记试验,鉴定CAEV,明确诊断[6]。此种方法是诊断本病的金标准,但是需要进行细胞分离、培养,操作步骤繁琐,耗时、耗力,不便于大量使用,而且可能延误病情控制时间。
(2)AGID:是一种在琼脂糖凝胶中进行的可溶性抗原和相应抗体沉淀试验,琼脂糖凝胶发挥网架作用,可溶性抗原、抗体能够自由扩散,如果抗原和抗体有相互对应关系、比例合适,就会在相遇处生成白色沉淀线,发生阳性反应。此种方法可以用于检测血清中CAEV,为国际兽医组织推荐的诊断方法。在检测中,多应用全病毒抗原,另外囊膜蛋白gp135、衣壳蛋白p25等也可作为AGID抗原,相比于全病毒抗原,应用囊膜蛋白gp135、衣壳蛋白p25更为省时,检测费用也更为低廉,但敏感性、准确性也变差。AGID比病毒分离鉴定操作简单,更为简便易行,但是其敏感性并不理想,存在假阳性。而且CAEV和MVV较为相近,两者存在交叉抗原性,无法经AGID鉴别两种病毒,可能发生误诊[7]。
(3)ELISA:是一种检测抗原、抗体的方法,对抗原/抗体固相载体予以酶标记,其表面的抗原/抗体仍然具有免疫活性,受检标本能与固相载体表面抗原/抗体发生反应,以洗涤方法分离固相载体上反应后形成的抗原抗体复合物,加入酶标记抗原/抗体,经过反应附着于固相载体上,固相中酶量和标本中受检物质含量形成一定比例,加入酶坟茔底物,底物经酶催化呈有色物质,可以根据颜色深浅进行定性、定量分析。ELISA对于CAEV的敏感性优于AGID,而且价格更为低廉,也适用于大规模血清学检测,被国际收益组织视为标准诊断方法。此外,还可以应用免疫荧光抗体技术,通过检测血清中的IgM抗体,用以判断是否发生CAEV,此种诊断方法在血清检疫中的应用逐渐增多。
3 预防措施
山羊病毒性关节炎-脑炎具有高病亡率,危害严重,积极防控是保证山羊养殖户经济效益的关键。目前,并没有治疗本病的特异性药物或治疗方法,也没有针对性疫苗,因此本病防治多以积极预防、及时淘汰患羊为主。
3.1 严格引种管理
山羊病毒性关节炎-脑炎多发生于活羊贸易当中,由流行病国家传播到非流行国家,本病最初在我国的流行就是国际引种的结果。因此,必须严格进行羊引种管理,尤其关注跨国活羊贸易,严格进行入境检疫、跨地域检疫,以避免本病跨地域传播。国际兽医组织规定,严格禁止引种任何有临床病症活羊;若引种羊年龄超过1岁,需要进行血清学检测、完成30 d隔离;确保引种地区3年内无CAEV感染;若为采精公羊,应连续进行两年血清学检验,均为阴性方可进口。
3.2 强化饲养管理
(1)加强羊舍、羊床清洁管理,定期清洁、消毒,每天通风,保持清洁环境。
(2)分群管理,将羊分为几个小群,分舍养殖,避免羊群过于聚集,以免一旦发病导致大面积流行。
(3)自繁自养,尽量避免引种其他地区羊;若需要引种,必须在引种前进行血清学检查,并单独饲养3个月以上,连续进行3个月血清学检查,检测均为阴性才能够混群养殖,并定期全面检查,确保健康。
(4)特别关注母羊及羔羊管理,于分娩前对母羊予以隔离养殖,助产时注意充分消毒相关医疗器械,并保证手卫生,避免病毒传播。羔羊分娩后,将初乳恒温加热(56℃)30 min后喂养,对羔羊同样需要隔离养殖,连续3个月血清学检查阴性后再混群。
(5)每年对羊群中的羊进行血清学检测一次,以便及时发现患羊,避免流行发作。
(6)科学喂养,保证营养均衡、充足,提升羊自身免疫力,使其具有良好抗病能力。
(7)严格进行共感染病原免疫接种,确保羊群中养只健康,并通过完善免疫接种提升羊只免疫力。
3.3 及时淘汰患羊及进行无害化处理
一旦发现山羊病毒性关节炎-脑炎应立即淘汰、扑杀,予以无害化焚烧处理。考虑到本病为慢性、进行性传染病,且发病初期较为隐匿,至发现明显症状时,多已经整群感染,因此发现病情后,需要隔离羊群中所有羊,依次进行血清学检查,一旦检测出阳性患羊,立即扑杀、无害化焚烧;对于羊群中幸存羊要单独饲养1年以上,每半年进行一次血清学检测,连续2次以上血清学检测阴性才能认为其无病,并判断羊群已经彻底净化。与此同时,要将共用工具,如挤奶设备、饲养工具,进行彻底消毒,避免工具上残留病毒,导致病毒传播;还要对羊舍、羊床进行彻底消毒,避免病毒残留。
4 结论
山羊病毒性关节炎-脑炎具有高传染性、高死亡率,一旦感染多为整群感染,目前尚无针对本病的针对性治疗方法,需要集体扑杀、无害化处理,给养殖户造成巨大经济损失。因此,必须充分了解本病发病特点、诊断方法及防治方法,重视本病防治工作,积极防控,保证羊养殖的安全性,进而保证羊养殖经济效益。在羊养殖过程中,需严格进行引种管理,避免引入病羊;并强化饲养管理,积极预防本病,加强检疫及日常养殖管理,保证羊只健康,预防发病;一旦发现患羊,应严格按照相关规定予以无害化处理,并对羊群做净化处理,避免病情蔓延。