宁波地区32 233例女性HPV感染情况及亚型特征分析

应欢欢 胡剑 莫翼军 牧启田

子宫颈癌位列女性最常见恶性肿瘤第四位，仅次于乳腺癌、结直肠癌和肺癌。具有较高的发病率和死亡率，据统计仅2018年，全球就新增57 万子宫颈癌患者，并有31 万人死于该疾病[1]。我国在2018 年新增子宫颈癌患者约10.6万，死亡人数约4.8万，且发病年龄呈年轻化趋势，严重危害着女性的生命健康。人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是一种无包膜的小环状双链DNA 病毒，目前已发现的HPV 亚型有200 多种，其中超过40 种与生殖道感染相关[2]。根据其致癌潜力可分为高危型HPV 和低危型HPV。有研究表明，大约99.7%的子宫颈癌中可检测出高危型HPV，高危型HPV的持续感染是导致子宫颈癌的重要因素[3]。很多报道证实，HPV 的感染情况和亚型分布特征在不同的地区间存在较大差异[4-5]。为了解宁波地区女性HPV 感染现状及基因型分布特征，本研究收集了宁波市第一医院2019-2021 年检测的32 233 例女性的HPV 分型结果，分析了宁波地区女性HPV感染情况和亚型分布特点，为本地区子宫颈癌的防治提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年1 月-2021 年12 月在宁波市第一医院妇科门诊就诊并行HPV 分型检测的32 233 例女性。纳入标准：（1）自愿接受HPV 分型检测，在月经来潮后10～18 d 采样；（2）检查前3 d 无阴道冲洗和阴道内药物使用，检查前1 d 无性行为。排除标准：行子宫切除术或盆腔放化疗。年龄13～89岁，平均（40.10±12.28）岁。按年龄分为＜30 岁、30～39 岁、40～49 岁、50～59岁和≥60 岁组。本研究已通过医院伦理委员会审批，获得入组人员或其家属的知情同意。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 医护人员以专用宫颈脱落细胞采集器进行采样。先以窥阴器暴露子宫颈，用棉拭子擦去子宫颈口过多的分泌物。取出宫颈刷置于子宫颈口，单方向旋转4～5 周以获得足量的上皮细胞样本，然后将宫颈刷头部放入洗脱管中，沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断，旋紧洗脱管盖，洗脱管中已加有专用细胞保存液，做好样本标识4 ℃保存待检，保存不超过24 h。-20 ℃保存不超过3 个月，样本应避免反复冻融。

1.2.2 HPV DNA 分型检测 全部检测流程均严格按照试剂盒说明书进行，可检测24 种HPV 基因型，包括18 种高危型（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83 型）和6 种低危型（HPV6、11、42、43、44、81 型）。

1.2.3 仪器与试剂 北京博晖创新生物技术股份有限公司生产的核酸芯片检测仪（型号BHF-VI）及其原装配套试剂盒。

1.3 观察指标（1）分析HPV 感染情况及各亚型分布情况。（2）分析各年份HPV 感染情况。（3）分析不同年龄组HPV 感染情况。

1.4 统计学处理 所有数据处理采用统计软件SPSS 22.0 进行，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV 感染情况及各亚型分布情况 32 233 例受检者中，HPV 阳性7 916例，总感染率为24.56%（7 916/32 233）。24 种型别均有检出，其中高危型HPV阳性5 715例，感染率为17.73%（5 715/32 233），占总感染例数的72.19%（5 715/7 916）；低危型HPV 阳性1 190例，感染率为3.69%（1 190/32 233），占总感染例数的15.03%（1 190/7 916）；高低危混合型HPV 阳性1 011例，感染率为3.14%（1 011/32 233），占总感染例 数的12.78%（1 011/7 916）。高危型HPV 各亚型检出率前5 位依次为52 型1 841 例（16.20%），58 型1 054 例（9.28%），16 型921 例（8.11%），51 型664 例（5.84%），53 型608 例（5.35%）。低危型HPV 各亚型检出率前5 位为42 型611 例（5.38%），81 型518 例（4.56%），44 型419 例（3.69%），6 型366 例（3.22%），43 型299 例（2.63%），见表1。

表1 HPV不同亚型分布

2.2 各年份HPV 感染情况 2019-2021 年进行HPV 分型检测的女性患者标本共32 233例，其中检出阳性标本7 916例，总阳性率24.56%。2019 年检测样本9 030例，检出阳性2 493例，阳性率27.61%，2020 年检测样本9 521例，检出阳性2 321例，阳性率24.38%，2021 年检测样本13 682例，检出阳性3 102例，阳性率为22.67%。不同年份HPV 阳性率比较，差异有统计学意义（χ2=71.769，P＜0.001），呈现逐年降低的趋势，见表2。

表2 2019-2021年宁波地区HPV感染情况

2.3 不同年龄组HPV 感染情况 不同年龄分组中，HPV 的感染率从高到低依次为，＜30 岁组，30～39 岁组，40～49 岁组，＞60 岁组，50～59 岁组，感染率分别为27.17%、25.54%、23.36%、22.31%、22.00%。HPV 感染者中，主要以单一型为主，阳性5 629例，感染率17.46%，占比71.11%（5 629/7 916），二重感染1 540例，感染率4.78%，占比19.45%（1 540/7 916），三重及以上者747例，感染率2.32%，占比9.44%（747/7 916），见表3。

表3 不同年龄组HPV感染情况

3 讨论

中国是一个幅员辽阔，人口超14 亿的大国，HPV 在中国不同省份的流行程度差异很大。许多研究报道了不同地区HPV 感染和基因型分布情况[6-8]。然而，关于宁波地区的HPV 流行情况的报道还比较少。本文是一项关于宁波地区HPV 基因型流行情况的大规模研究。本研究发现宁波地区HPV 总感染率为24.56%，与Liu 等[9]报道的浙江地区感染率22.8%接近，高于北京（21.67%）[10]、深圳（13.70%）[11]、河南（19.7%）[12]，低于吉林（34.4%）[13]、黑龙江（32.16%）[14]、山东（28.4%）[15]的感染率。各地区HPV 感染率差异的原因可能与经济条件、生活习惯、文化多样性、采样方式和HPV检测方法等因素有关。

本研究发现，2019-2021 年HPV 检测的女性数量呈上升趋势，而感染率处于下降趋势，分析原因可能是，随着经济条件的增长，人们的健康意识越来越强，有更多的人去医院做子宫颈癌筛查，这其中会有很多的非子宫颈病变者，从而引起总感染率的下降。还有一个原因可能是阳性感染者经过几年的时间，由于自身免疫功能对HPV 的清除而使结果呈阴性，从而使总感染率下降。

全球各地女性HPV 感染的基因型各不相同。了解不同地区HPV 基因型的分布对疫苗的发展至关重要。据报道，在亚洲最流行的高危型HPV 基因型是HPV16、HPV52、HPV58、HPV18 和HPV56型，在欧洲最常见的高危型HPV 基因型是HPV16、HPV18、HPV31、HPV33 和HPV58 型[16]。本研究显示，宁波地区前5 位高危型HPV 基因型是HPV52、HPV58、HPV16、HPV51 和HPV53型，这与深圳地区、广州地区的前5 位高危型HPV 基因型一致，而与黑龙江、苏州、山东、北京等地区虽然在排序上有差异，但前5 个感染亚型还是一致的。与天津（HPV16、52、53、51、68 型），新疆（HPV16、52、58、53、66 型），三亚（HPV52、58、16、51、39 型）的前五位略有区别，但前三位还是一致的[8，10-14]。从国内的文献数据可以发现，高危型HPV 感染的前三位都是HPV52、16、58型，而在欧美多见的18 型在我国人群中的比例较低。这也跟Clifford 等[17]在研究中发现HPV58、52 型在亚洲人群中更常见一致。此外，本研究还调查了低危型HPV 的分布，结果显示前3 种最常见的低危型HPV基因型分别是HPV42、HPV81、HPV44 型。低危型HPV 在子宫颈癌中是非常罕见的，主要引起生殖器疣、普通疣、扁平疣和许多其他皮肤病变[18]。当前可用的HPV 预防性疫苗主要有3种，二价疫苗（HPV16、18 型），四价疫苗（HPV16、18、6、11 型），和九价疫苗（HPV16、18、45、52、58、31、33、6、11 型），本研究结果更支持九价HPV 疫苗在宁波地区的常规接种。但宁波地区高危型HPV 中常见的51、53 型未在九价疫苗内，还有低危型HPV 主要是42、81型，也不在九价疫苗里，所以研发适合本地区的疫苗更加迫切，预防性疫苗如果可以包括HPV51、53、42、81 型的话可以更好地保护宁波地区女性的健康。

既往的研究显示，HPV 感染率的年龄分布多呈U 形[11-14]。本研究发现宁波地区女性HPV 感染率具有独特的年龄分布特征。HPV 的感染率从高到低依次为＜30 岁组，30～39 岁组，40～49 岁组，＞60 岁组，50～59 岁组，感染率分别为27.17%，25.54%，23.36%，22.31%，22.00%，感染率随年龄的增长总体呈下降趋势。其中30 岁以下的女性总感染率最高，而且该组的单一型别、二重型别和三重及以上型别感染率也最高。这一现象可能的原因是年轻女性更易从事无保护措施的性行为，而且频率更高，再加上自身发育尚未完全成熟，更容易受到感染。据报道，年轻女性感染HPV 是暂时的，在大多数情况下，免疫系统会清除病毒[19]，因此，随着年龄的增长，HPV 的感染率会逐渐下降。本研究发现，随着年龄的增长HPV 的感染率逐渐下降，而在大于60 岁组中HPV 感染率略有上升（22.31%），但未出现常见的第二个高峰。对于60 岁以上的妇女，HPV 的感染可能发生在年轻时，而当前存在的感染可能是持续性感染。如果免疫系统不能消除HPV 并持续存在数年，这将是肿瘤发展的一个危险因素。本研究还提供了单一、二重和三重及以上HPV 感染率的年龄分布。单一型感染率＜30 岁组最高，随着年龄增长而下降。二重型别的HPV感染率以30～39 岁组最高，三重及以上型别的HPV感染率以＜30 岁组最高，且都随着年龄增长而下降，但在大于60 岁组又都有回升。回升的原因可能是该年龄段女性处于绝经期，免疫功能紊乱，机体抵抗能力下降所致。有研究显示多重HPV 感染比单一型HPV 感染发展为子宫颈癌的风险更高[20]。本研究中，单一型HPV 感染率高于二重和三重及以上HPV 的感染率，为17.46%，二重HPV 和三重及以上HPV 感染率分别为的4.78%和2.32%。研究人乳头状瘤病毒的双重和多重感染对研究人乳头状瘤病毒的流行具有重要意义，对开发多价HPV 疫苗也具有重要意义。

综上所述，宁波地区女性HPV 感染率为24.56%，总体偏高，感染类型以单一型，高危型感染为主，最常见的高危亚型前5 位是HPV52、58、16、51 和53 型。随着年龄的增长感染率呈下降趋势，其中小于40 岁的女性具有较高的感染率，应特别关注该群体。本研究提供的HPV 感染情况和亚型分布特征的大规模数据可为本地区HPV 预防疫苗的研发和子宫颈癌的防治提供数据支持。