扯根菜化学成分及其保肝活性

2022-12-05郝丽亚李冰洁王中林郑新华

中成药 2022年9期

郝丽亚，李冰洁，王中林，郑新华

(平顶山学院医学院，河南平顶山 467000)

扯根菜PenthorumchinensePursh.为虎耳草科扯根菜属植物的全草[1]，分布在广西、云南、湖南等地，具有利水除湿、平肝解毒、祛瘀止痛的功效，临床用于治疗肝炎、黄疸、经闭等[2]，以其为主要药材的中成药及保健品治疗病毒性肝炎、肝硬化、脂肪肝等疾病疗效显著[3-4]，但因需求量大，导致野生资源被严重破坏[5]。该植物化学成分为黄酮、有机酸、木脂素等[6]，具有保肝护肝、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、利尿等[7]，可有效拮抗肝星状细胞生长分化，降低大鼠血清转化生长因子-β1和I型胶原的水平[8]，可降低醉酒小鼠血液中乙醇含量[9]。本实验研究扯根菜化学成分及其保肝活性，以期为该植物后续开发提供参考。

1 材料

Agilent 1290-microTOF Q II型高分辨质谱仪(美国Agilent公司)；SYS-600型核磁共振波谱仪(德国Bruker公司)；BSA124S-CW型分析天平(德国Sartorius公司)；JJ124BC型电子天平(常熟市双杰测试仪器厂)；Sephadex LH-20葡聚糖凝胶(瑞典Amersham Pharmacia公司)；HH-S型恒温水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)；柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂)；Rotavapor R-205型旋转蒸发仪(瑞士Buchi公司)；氘代试剂DMSO-d6(德国Sigma-aldrich公司)；人肝正常细胞HL-7702(山东玉宝生物科技有限公司)；APAP培养基(北京安诺伦生物科技有限公司)。所用试剂均为分析纯。

扯根菜采自河南平顶山市，经平顶山学院郑新华教授鉴定为扯根菜PenthorumchinensePursh.的全草。

2 提取与分离

取扯根菜全草18.4 kg，分别用90%、50%乙醇浸渍提取，得浸膏1.7 kg，溶于水中，分别用石油醚、丙酮、正丁醇萃取，得石油醚层浸膏(Fr.A)、丙酮层浸膏(Fr.B)、正丁醇层浸膏(Fr.C)。

取Fr.A 127.4 g，经硅胶柱分离，石油醚-丙酮 (70∶30～50∶50～30∶70)梯度洗脱，得8个流分 Fr.A1～Fr.A8。Fr.A3 (6.8 g)经硅胶柱分离，石油醚-乙酸乙酯 (80∶20～20∶80)梯度洗脱，得7个流分Fr.A3-1～Fr.A3-7，Fr.A3-3 (173.4 mg)经硅胶柱分离，石油醚-乙酸乙酯 (40∶60)洗脱，得化合物1(22 mg)；Fr.A3-5 (173.4 mg)经Sephadex LH-20分离，甲醇洗脱，得化合物13(21 mg)；Fr.A3-4 (173.4 mg)经硅胶柱分离，石油醚-乙酸乙酯(40∶60)洗脱，得化合物10(18 mg)、12(27 mg)。Fr.A5 (5.2 g)经硅胶柱分离，石油醚-乙酸乙酯(70∶30～30∶70)梯度洗脱，得6个流分Fr.A5-1～Fr.A5-6，Fr.A5-2 (151.3 mg)经硅胶柱分离，石油醚-乙酸乙酯(30∶70)洗脱，得化合物6(17 mg)；Fr.A5-3(109.2 mg)经Sephadex LH-20分离，甲醇洗脱，得化合物20(21 mg)；Fr.A5-5 (105.4 mg)经硅胶柱分离，石油醚-乙酸乙酯(30∶70)洗脱，得化合物8(29 mg)。Fr.A6 (4.3 g)经硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇(60∶40～40∶60)洗脱，得4个流分Fr.A6-1～Fr.A6-4，Fr.A6-2 (98.2 mg)经Sephadex LH-20分离，甲醇洗脱，得化合物7(18 mg)；Fr.A6-4 (83.9 mg)经硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇(20∶80)洗脱，得化合物9(21 mg)。

取Fr.B 97.3 g，经硅胶柱分离，丙酮-甲醇(80∶20～50∶50～20∶80)洗脱，得9个流分Fr.B1～Fr.B9。Fr.B2 (5.7 g)经硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇(80∶20～20∶80)梯度洗脱，得9个流分Fr.B2-1～Fr.B2-9，Fr.B2-3 (161.8 mg)经硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇(30∶70)洗脱，得化合物11(19 mg)；Fr.B2-6 (117.2 mg)经Sephadex LH-20分离，甲醇洗脱，得化合物3(31 mg)；Fr.B2-5 (102.7 mg)经硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇(20∶80)洗脱，得化合物4(22 mg)、17(18 mg)；Fr.B2-8 (93.7 mg)经Sephadex LH-20分离，甲醇洗脱，得化合物19(21 mg)。Fr.B4 (4.9 g)经硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇(80∶20～10∶90)梯度洗脱，得7个流分Fr.B4-1～Fr.B4-7，Fr.B4-2 (125.3 mg)经硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇(20∶80)洗脱，得化合物15(23 mg)；Fr.B4-4 (92.8 mg)经Sephadex LH-20分离，甲醇洗脱，得化合物5(24 mg)；Fr.B4-6 (83.2 mg)经Sephadex LH-20分离，得化合物16(28 mg)。

取Fr.C 103.5 g，经硅胶柱分离，丙酮-甲醇(90∶10～50∶50～10∶90)洗脱，得7个流分Fr.C1～Fr.C7。Fr.C2 (7.3 g)经硅胶柱分离，乙酸乙酯-甲醇 (80∶20～20∶80)梯度洗脱，得8个流分Fr.C2-1～Fr.C2-8，Fr.C2-4 (85.6 mg)经硅胶柱分离，乙酸乙酯-甲醇(30∶70)洗脱，得化合物2(26 mg)；Fr.C2-6 (102.9 mg)经Sephadex LH-20分离，得化合物21(17 mg)。Fr.C4 (8.5 g)经硅胶柱分离，乙酸乙酯-甲醇(70∶30～30∶70)洗脱，得6个流分Fr.C4-1～Fr.C4-6)，Fr.C4-2 (135.2 mg)经硅胶柱分离，乙酸乙酯-甲醇(30∶70)洗脱，得化合物14(18 mg)；Fr.C4-3(95.2 mg)经硅胶柱分离，乙酸乙酯-甲醇(20∶80)洗脱，得化合物18(23 mg)。

3 结构鉴定

化合物1：黄色粉末。ESI-MSm/z：441.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：12.51 (1H，s，4′-OH)，10.13 (1H，s，5-OH)，8.02 (2H，d，J=8.2 Hz，H-2′，6′)，7.02 (2H，d，J=8.2 Hz，H-3′，5′)，6.81 (1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，6.42 (1H，d，J=8.2 Hz，H-6)，5.57 (1H，d，J=8.2 Hz，1″)，4.23 (1H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-2″)，3.95 (1H，d，J=8.2 Hz，H-4a″)，3.64 (1H，d，J=8.2 Hz，H-4b″)，3.35 (2H，d，J=8.2 Hz，H-5″)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：81.2 (C-1)，93.7 (C-2)，135.2 (C-3)，173.6 (C-4)，105.1 (C-4a)，159.3 (C-5)，97.6 (C-6)，161.7 (C-7)，93.8 (C-8)，156.4 (C-8a)，120.9 (C-1′)，128.3 (C-2′)，114.5 (C-3′)，114.5 (C-4′)，158.6 (C-5′)，130.2 (C-6′)，106.3 (C-1″)，77.5 (C-2″)，77.9 (C-3″)，73.9 (C-4″)，62.1 (C-5″)。以上数据与文献[10]报道的山柰酚-7-O-β-D-芹菜苷基本一致。

化合物2：黄色粉末。ESI-MSm/z：441.3 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：6.81 (1H，s，H-8)，6.42 (1H，s，H-6)，5.59 (1H，s，H-1)，3.58 (1H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-5a″)，3.51 (1H，m，H-5b″)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：107.1 (C-1)，81.4 (C-2)，77.1 (C-3)，86.1 (C-4)，60.3 (C-5)。以上数据与文献[11]报道的山柰酚-7-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基本一致。

化合物3：黄色结晶。ESI-MSm/z：309.1 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：12.52 (1H，s，5-OH)，7.87 (2H，m，H-2′，6′)，6.81 (2H，m，H-3′，5′)，6.36 (1H，d，J=8.2 Hz，H-8)，6.22 (1H，d，J=8.2 Hz，H-6)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：103.5 (C-1)，146.9 (C-2)，135.6 (C-3)，175.3 (C-4)，102.6 (C-4a)，155.3 (C-5)，95.6 (C-6)，163.2 (C-7)，92.1 (C-8)，157.3 (C-8a)，117.6 (C-1′)，127.6 (C-2′)，113.6 (C-3′)，157.3 (C-4′)，113.9 (C-5′)，131.9 (C-6′)。以上数据与文献[12]报道的山柰酚基本一致。

化合物4：黄色粉末。ESI-MSm/z：376.4 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.91 (2H，d，J=9.6 Hz，H-2′，6′)，7.02 (2H，d，J=9.6 Hz，H-3′，5′)，6.63 (1H，s，H-3)，6.51 (1H，s，H-8)，5.19 (1H，m，H-2″)，3.27 (2H，m，H-1″)，1.81 (3H，s，4″-CH3)，1.52 (3H，s，5″-CH3)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：132.4 (C-1)，164.2 (C-2)，104.3 (C-3)，183.3 (C-4)，104.3 (C-4a)，163.1 (C-5)，112.3 (C-6)，165.1 (C-7)，93.6 (C-8)，158.4 (C-8a)，122.6 (C-1′)，130.2 (C-2′)，116.3 (C-3′)，159.1 (C-4′)，116.6 (C-5′)，130.2 (C-6′)，21.7 (C-1″)，122.6 (C-2″)，133.4 (C-3″)，18.3 (C-4″)，25.2 (C-5″)。以上数据与文献[13]报道的3-methylbut-2-enyl apigen基本一致。

化合物5：棕色粉末。ESI-MSm/z：441.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.79 (1H，s，H-5)，7.71 (2H，m，H-2′，6′)，7.02 (1H，s，H-8)，6.86 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5′)，6.54 (1H，s，H-3)，5.41 (2H，m，H-2″，2‴)，3.41 (4H，m，H-1″，1‴)，1.82 (6H，s，5″，4‴-CH3)，1.79 (3H，s，5‴-CH3)，1.71 (3H，s，4″-CH3)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：121.6 (C-1)，159.3 (C-2)，105.2 (C-3)，179.3 (C-4)，117.2 (C-4a)，125.6 (C-5)，131.2 (C-6)，163.5 (C-7)，103.2 (C-8)，157.2 (C-8a)，124.2 (C-1′)，128.1 (C-2′)，129.3 (C-3′)，159.7 (C-4′)，l 15.3 (C-5′)，30.1 (C-l″)，123.1 (C-2″)，135.3 (C-3″)，19.1 (C-4″)，25.3 (C-5″)，30.1 (C-1‴)，122.9 (C-2‴)，134.3 (C-3‴)，26.1 (C-4‴)，18.3 (C-5‴)。以上数据与文献[13]报道的enyllicoflavone A基本一致。

化合物6：棕色粉末。ESI-MSm/z：331.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：6.91 (1H，d，J=9.6 Hz，H-5)，6.73 (2H，m，H-2′，6′)，3.91 (3H，s，4′-OCH3)，3.83 (6H，s，1，3″-OCH3)，1.69-2.91(2，3，4，5，1′，2′-CH2)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：175.3 (C-1)，32.6 (C-2)，30.1 (C-3)，31.3 (C-4)，35.8 (C-5)，144.1 (C-1′)，119.2 (C-2′)，132.3 (C-3′)，146.1 (C-4′)，111.3 (C-5′)，115.2 (C-6′)，25.1 (C-1″)，34.1 (C-2″)，181.2 (C-3″)，56.1 (4′-OCH3)，52.1 (3″-OCH3)。以上数据与文献[14]报道的methyl-5-[4-methoxy-3-[2-(methoxycarbonyl)ethyl]-phenyl]pentanoate基本一致。

化合物7：黄色晶体。ESI-MSm/z：339.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：12.15 (1H，s，1-OH)，7.51 (1H，d，J=8.2 Hz，H-6)，7.26 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5)，6.37 (1H，s，H-2)，4.12 (3H，s，3-OCH3)，4.02 (3H，s，4-OCH3)，3.78 (3H，s，8-OCH3)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：160.8 (C-1)，95.1 (C-2)，160.2 (C-3)，127.9 (C-4)，145.2 (C-4a)，151.2 (C-4b)，113.6 (C-5)，123.2 (C-6)，150.1 (C-7)，147.5 (C-8)，116.1 (C-8a)，104.4 (C-8b)，57.3 (3-OCH3)，62.3 (4-OCH3)，63.1 (8-OCH3)。以上数据与文献[15]报道的1，7-二羟基-3，4，8-三甲氧基呫吨酮基本一致。

化合物8：黄色晶体。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：12.16 (1H，s，1-OH)，10.76 (1H，s，8-OH)，7.41 (1H，d，J=9.6 Hz，6-H), 6.83 (1H，d，J=9.6 Hz，7-H)，6.61 (1H，d，J=9.6 Hz，4-H)，6.41 (1H，d，J=6.3 Hz，2-H)，4.02 (3H，s，3-OCH3)，3.91 (3H，s，5-OCH3)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：162.1 (C-1)，99.3 (C-2)，168.1 (C-3)，94.6 (C-4)，138.3 (C-5)，119.3 (C-6)，111.4 (C-7)，156.7 (C-8)，185.3 (C-9)，158.4 (C-4a)，147.1 (C-4b)，109.6 (C-8a)，104.6 (C-8b)，58.3 (3-OCH3)，55.6 (5-OCH3)。以上数据与文献[15]报道的1，8-二羟基-3，5-二甲氧基呫吨酮基本一致。

化合物9：黄色粉末。ESI-MSm/z：325.1 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：6.41(1H，d，J=8.2 Hz，H-8)，6.23 (1H，d，J=8.2 Hz，H-6)，7.83 (1H，d，J=8.2 Hz，H-2′)，7.73 (1H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-6′)，6.91(1H，d，J=2.2 Hz，H-5′)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：113.4 (C-1)，152.7 (C-2)，136.9 (C-3)，181.3 (C-4)，157.3 (C-5)，103.5 (C-6)，164.3 (C-7)，96.1 (C-8)，159.1 (C-9)，103.6 (C-10)，118.3 (C-1′)，121.6 (C-2′)，146.4 (C-3′)，147.6 (C-4′)，115.2 (C-5′)，122.8 (C-6′)。以上数据与文献[16]报道的槲皮素基本一致。

化合物10：黄色针晶。ESI-MSm/z：291.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.85 (1H，d，J=9.6 Hz，H-5)，7.49 (2H，d，J=9.6 Hz，H-2′，6′)，7.13 (2H，d，J=9.6 Hz，H-3′，5′)，7.02 (2H，dd，J=9.6，6.3 Hz，H-6)，6.91 (1H，d，J=9.6 Hz，H-8)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：142.1 (C-1)，150.6 (C-2)，121.6 (C-3)，175.6 (C-4)，126.9 (C-5)，116.1 (C-6)，167.8 (C-7)，101.3 (C-8)，158.3 (C-9)，102.3 (C-10)，122.6 (C-1′)，129.3 (C-2′)，112.3 (C-3′)，161.3 (C-4′)，112.1 (C-5′)，129.5 (C-6′)，55.3 (6′-OCH3)。以上数据与文献[17]报道的芒柄花基本一致。

化合物11：灰色针晶。ESI-MSm/z：293.1 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.41 (2H，d，J=9.6 Hz，H-2′，6′)，6.91 (2H，d，J=9.6 Hz，H-3′，5′)，6.43 (1H，s，H-8)，6.35 (1H，d，J=6.3Hz，H-6)，3.03 (1H，s，H-5)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：131.6 (C-1)，154.3 (C-2)，120.3 (C-3)，179.1 (C-4)，158.1 (C-5)，102.6 (C-6)，165.4 (C-7)，94.1 (C-8)，156.1 (C-9)，103.9 (C-10)，121.8 (C-1′)，129.(C-2′)，116.1 (C-3′)，163.6 (C-4′)，116.1 (C-5′)，131.6 (C-6′)。以上数据与文献[18]报道的染料木素基本一致。

化合物12：白色针晶。ESI-MSm/z：323.1 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：8.06 (1H，d，J=8.2 Hz，H-2)，7.41 (2H，d，J=8.2 Hz，H-2′，6′)，6.91 (2H，d，J=8.2 Hz，H-3′，5′)，6.51 (1H，s，H-8)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：127.1 (C-1)，155.1 (C-2)，122.9 (C-3)，83.1 (C-4)，157.6 (C-5)，133.9 (C-6)，156.9 (C-7)，96.1 (C-8)，154.9 (C-9)，105.1 (C-10)，125.1 (C-1′)，132.6 (C-2′)，115.3 (C-3′)，159.3 (C-4′)，115.4 (C-5′)，130.7 (C-6′)，59.8 (6-OCH3)。以上数据与文献[19]报道的tectorigenin基本一致。

化合物13：白色粉末。ESI-MSm/z：277.1 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：8.03 (1H，d，J=9.6 Hz，H-5)，7.41 (2H，d，J=9.6 Hz，H-2′，6′)，6.87 (1H，m，H-8)，6.81 (2H，d，J=9.6 Hz，H-3′，5′)，6.79 (1H，d，J=6.3 Hz，H-6)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：129.1 (C-1)，154.3 (C-2)，123.6 (C-3)，176.8 (C-4)，129.4 (C-5)，116.5 (C-6)，163.5 (C-7)，101.3 (C-8)，115.3 (C-9)，104.2 (C-10)，122.8 (C-1′)，129.3 (C-2′)，114.2 (C-3′)，158.4 (C-4′)，114.5 (C-5′)，129.4 (C-6′)。以上数据与文献[20]报道的daidzein基本一致。

化合物14：白色粉末。ESI-MSm/z：471.3 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.51 (2H，d，H-2′，H-6′)，6.93 (2H，d，H-3′，H-5′)，6.33 (2H，m，H-6，8)，5.39 (1H，dd，J=9.6，6.3 Hz，H-2)，4.92 (1H，dd，J=9.6，6.3 Hz，H-1″)，4.12 (1H，d，J=9.6 Hz，H-5″)，3.58 (1H，t，J=9.6，H-2″)，3.49 (2H，m，H-3″，4″)，3.16 (1H，dd，J=9.6，6.3 Hz，H-3a)，2.81 (1H，d，J=9.6，6.3 Hz，H-3b)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：103.6 (C-1)，81.4 (C-2)，43.2 (C-3)，197.3 (C-4)，106.2 (C-4a)，167.3 (C-5)，98.2 (C-6)，165.1 (C-7)，97.2 (C-8)，165.2 (C-8a)，131.2 (C-1′)，131.4 (C-2′)，117.1 (C-3′)，160.6 (C-4′)，117.8 (C-5′)，130.5 (C-6′)，102.3 (C-1″)，96.3 (C-2″)，73.6 (C-3″)，73.1 (C-4″)，70.5 (C-5″)，173.6 (C-6″)。以上数据与文献[21]报道的柚皮素-7-O-β-D-葡糖醛酸基本一致。

化合物15：白色粉末。ESI-MSm/z：484.1 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.02 (1H，brs，H-2′)，6.91 (1H，brs，H-6′)，6.75 (1H，brs，H-5′)，6.23 (1H，s，H-6)，6.12 (1H，s，H-8)，5.26 (1H，dd，J=9.6，6.3 Hz，H-2)，5.11 (1H，d，J=9.6 Hz，H-1″)，3.32 (1H，m，H-4″)，3.22 (1H，dd，J=9.6，6.3 Hz，H-3a)，3.14 (2H，m，H-2″，H3″)，1.84 (1H，dd，J=9.6，6.3 Hz，H-3b)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：101.3 (C-1)，79.7 (C-2)，44.3 (C-3)，199.1 (C-4)，105.5 (C-4a)，165.1 (C-5)，97.7 (C-6)，166.8 (C-7)，98.1 (C-8)，164.3 (C-8a)，131.6 (C-1′)，131.7 (C-2′)，147.6 (C-3′)，147.3 (C-4′)，116.3 (C-5′)，131.2 (C-6′),100.1 (C-1″)，76.1 (C-2″)，74.3 (C-3″)，72.8 (C-4″)，72.9 (C-5″)，172.1 (C-6″)。以上数据与文献[21]报道的圣草酚-7-O-葡萄糖醛酸基本一致。

化合物16：白色油状物。ESI-MSm/z：301.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.81 (2H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-3，6)，6.48 (2H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-4，5)，4.28 (4H，t，J=8.2 Hz，H-l′)，1.83 (4H，m，H-2′)，1.51 (4H，m，H-3′)，1.02 (6H，t，J=7.5 Hz，H-4)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：131.9 (C-1)，131.9 (C-2)，129.5 (C-3)，128.3 (C-4)，128.3 (C-5)，129.5 (C-6)，64.2 (C-l′)，31.6 (C-2′)，20.7 (C-3′)，14.1 (C-4′)，168.1 (7-OOC)，168.1 (7′-OOC)。以上数据与文献[22]报道的邻苯二甲酸二丁酯基本一致。

化合物17：白色油状物。ESI-MSm/z：413.4 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.75 (2H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-3，6)，7.61 (2H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-4，5)，4.18(4H，m，H-1′)，0.97 (6H，t，J=8.2 Hz，H-2″)，0.87 (6H，t，J=8.2 Hz，H-6′)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：131.5 (C-l)，131.5 (C-2)，129.1 (C-3)，128.6 (C-4)，128.6 (C-5)，129.1 (C-6)，69.3 (C-l′)，39.1 (C-2′)，31.6 (C-3′)，30.5 (C-4′)，22.9 (C-5′)，13.9 (C-6′)，24.1 (C-1″)，10.9 (C-2″)，165.1 (7-OOC)，165.1 (7′-OOC)。以上数据与文献[23]报道的邻苯二甲酸二 (2-乙基)己酯基本一致。

化合物18：白色粉末。ESI-MSm/z：401.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：6.97 (1H，d，J=8.2，H-2)，6.93 (1H，d，J=2.2，H-5′)，6.91 (1H，d，J=2.2，H-2′)，6.82 (1H，dd，J=8.2，2.2，H-6)，6.73 (1H，d，J=2.2，H-5)，6.71 (1H，dd，J=8.2，2.2，H-6′)，4.73 (1H，d，J=8.2，H-4)，4.28 (1H，m，H-7)，3.91 (1H，dd，J=8.2，2.2，H-8)，3.81 (1H，dd，J=8.2，2.2，H-4′)，3.76 (3H，s，3-OCH3)，3.47 (2H，t，J=8.2，H-9′)，3.28 (3H，s，3′-OCH3)，2.58 (2H，t，J=8.2，H-7′)，1.78 (2H，m，H-8′)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：133.9 (C-1)，114.6 (C-2)，148.5 (C-3)，47.9 (C-4)，120.3 (C-5)，122.6 (C-6)，75.3 (C-7)，87.2 (C-8)，61.3 (C-9)，131.2 (C-1′)，131.2 (C-2′)，117.2 (C-3′)，160.1 (C-4′)，117.1 (C-5′)，130.5 (C-6′)，139.1 (C-1″)，121.3 (C-2″)，153.9 (C-3″)，147.6 (C-4″)，116.2 (C-5″)，122.1 (C-6″)，33.2 (C-7″)，32.8 (C-8″)，63.4 (C-9″)，56.7 (3-OCH3)，46.4 (3′-OCH3)。以上数据与文献[24]报道的4，7，9，9′-tetrahydroxy-3，3′-dimethoxy-8-O-4′-neolignan基本一致。

化合物19：黄色油状物。ESI-MSm/z：260.1 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：5.81 (1H，s，H-1)，1.37 (3H，s，H-12)，1.20 (3H，s，H-13)，1.14 (3H，s，H-15)，0.97 (3H，d，J=8.2 Hz，H-14)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：122.8(C-1)，199．3 (C-2)，40.8 (C-3)，41.3 (C-4)，41.9 (C-5)，40.2 (C-6)，44.1 (C-7)，28.1 (C-8)，33.1 (C-9)，174.1 (C-10)，72.4 (C-11)，26.1 (C-12)，24.8 (C-13)，14.1 (C-14)，16.1 (C-15)。以上数据与文献[25]报道的11-hydroxy-valenc-1(10)-en -2-one基本一致。

化合物20：白色油状物。ESI-MSm/z：223.3 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：7.12 (1H，d，J=8.2 Hz，H-2)，6.93 (1H，d，J=2.2 Hz，H-5)，7.03 (1H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-6)，5.91 (1H，dt，J=8.2，2.2 Hz，H-8′)，5.52 (1H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-9′)，5.37 (1H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-17′)，5.29 (1H，dd，J=8.2，2.2 Hz，H-16′)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：129.4 (C-1)，109.3 (C-2)，147.1 (C-3)，146.8 (C-4)，113.2 (C-5)，118.5 (C-6)，99.6 (C-7)，148.2 (C-1′)，134.6 (C-2′)，26.7 (C-3′)，29.7 (C-4′)，29.4 (C-5′)，30.1 (C-6′)，25.9 (C-7′)，33.4 (C-8′)，81.2 (C-9′)，71.3 (C-10′)，78.5 (C-11′)，127.4 (C-12′)，138.6 (C-13′)，28.7 (C-14′)，19.3 (C-15′)，33.1 (C-16′)，20.6 (C-17′)，15.1 (C-18′)，56.3 (3-OCH3)，51.2 (1′-OCH3)。以上数据与文献[26]报道的solacetal C基本一致。

化合物21：白色固体。ESI-MSm/z：231.1 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz，acetone-d6)δ：6.97 (1H，d，J=8.2，H-2)，6.64 (1H，d，J=2.2，H-5)，6.53 (1H，dd，J=8.2，2.2，H-6)，7.36 (1H，d，J=8.2，H-7)，6.41 (1H，d，J=8.2，H-8)，4.21 (2H，q，J=8.2，H-9)；13C-NMR (150 MHz，acetone-d6)δ：126.1 (C-1)，114.3 (C-2)，1147.2 (C-3)，150.1 (C-4)，117.1 (C-5)，123.5 (C-6)，147.1 (C-7)，1115.9 (C-8)，170.2 (C-9)，60.8 (C-1′)，15.3 (C-2′)。以上数据与文献[27]报道的咖啡酸乙酯基本一致。

4 保肝活性研究

取冻存于-80 ℃的人肝正常细胞株HL-7702适量，置于37 ℃水浴锅中，使液体融化，移至含10%胎牛血清的1640培养基内，振摇悬浮，离心6 min，去除上清液，再加入含10%胎牛血清的1640培养基，移至培养箱中培养48 h。采用胰蛋白酶消化后，将细胞密度稀释至8×104/mL，以每孔100 μL置于96孔板中，将具有肝损伤的APAP用含10%胎牛血清的1640培养基稀释为12 mmol/L。设置模型组(含12 mmol/L APAP培养基)、正常组(含10%胎牛血清的1640培养基)、化合物组(含12 mmol/L APAP培养基+50、100、200 μg/L化合物)、阳性对照组 (含12 mmol/L APAP培养基+200 μg/L联苯双酯)，分别取100 μL置于96孔板中，每组设6个复孔，在37 ℃下培养24 h，采用MTT法考察各化合物对HL-7702细胞相对存活率的影响[28]，发现化合物5、10、12、20具有显著活性，在高剂量下更明显(P<0.05)，见表1。