南蛇藤化学成分研究

高 阳 郑云枫 李新亮 彭国平∗ 刘延庆

（1.南京中医药大学药学院， 江苏 南京210023； 2.扬州大学医学院， 江苏 扬州225009）

南蛇藤是卫矛科南蛇藤属植物，有清热、祛风、除湿、活血、解毒、消肿等功效。其含有的化学成分主要有倍半萜、二萜、三萜、黄酮等。现代药理研究表明，南蛇藤具有抗肿瘤［1⁃3］、免疫调节［4］、抗风湿［5］等活性。本研究对南蛇藤茎乙醇提取物进行了分离和结构鉴定，得到8 个化合物，分别为7⁃hydroxy⁃3⁃ ［（4⁃methoxyphenyl）methoxy］ ⁃4H⁃1⁃benzopyran⁃4⁃one（1）、桦木酸（2）、platanic acid（3）、金色酰胺醇酯（4）、3⁃去氧苏木查尔酮（5）、异甘草素（6）、bonducelin（7）、7⁃羟基⁃3（4⁃羟基亚苄基）色满⁃4⁃酮（8）。其中化合物1 为新化合物，结构见图1。

图1 化合物1 的化学结构Fig.1 Chemical structures of compound 1

1 材料

AB SCIEX Triple TOFTM5600 高分辨质谱仪（美国AB 公司）；Bruker ASR⁃500 核磁共振仪（德国Bruker 公司）；Waters e2695 高效液相色谱仪（美国Waters 公司）；ELSD 6000 蒸发光散射检测器（美国奥特公司）；旋转蒸发仪（瑞士BUCHI公司）；SK8200H 型超声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；柱色谱硅胶（100～200目，青岛海洋化工有限公司）；乙腈（色谱纯，美国Tedia 公司）；甲醇（色谱纯，江苏汉邦科技有限公司）；Milli⁃Q 超纯水机（德国默克公司）。

南蛇藤Celastrus orbiculatusThunb.茎于2018年5 月采购自广州至信中药饮片有限公司，由中国药科大学秦民坚教授鉴定为正品，凭证标本（20100881）保存于扬州大学医学院。

2 提取与分离

10 kg 南蛇藤茎，粉碎成粗粉，无水乙醇渗漉提取，提取液40 ℃减压回收，浓缩，得浸膏150 g，浸膏用硅胶（1 kg）柱色谱分离，用石油醚⁃乙酸乙酯（100∶0～50∶50）梯度洗脱。洗脱液40 ℃减压浓缩，HPLC 检测，合并相似流份，得到Fr.1～Fr.14，然后用正相半制备液相和反向半制备液相进行分离纯化。正相半制备液相以Diol柱（10 mm×250 mm）为色谱柱，流动相石油醚⁃乙酸乙酯；反向半制备液相以CYANO 柱（10 mm×250 mm）为色谱柱，流动相甲醇⁃乙腈⁃水。Fr.13用正相半制备液相（石油醚∶乙酸乙酯＝63∶37，检测波长254 nm）分离制备得到化合物1（15 mg，tR＝27.2 min）和Fr.13A（tR＝23.8 min）。Fr.6 以乙酸乙酯溶解，重结晶，得到化合物2（1 g）。Fr.10 用反相半制备液相（乙腈∶水＝40∶60）分离制备得到化合物3（20 mg，tR＝14.3 min）。Fr.11 用正相半制备液相（石油醚∶乙酸乙酯＝63∶37）分离制备得到化合物4（30 mg，tR＝13.9 min）和Fr.11A（tR＝16.5 min）。Fr.14 用正相半制备液相（石油醚∶乙酸乙酯＝65∶35，检测波长254 nm）分离制备得到化合物5（14 mg，tR＝29.8 min）。Fr.11A 用反相半制备液相（甲醇∶水＝48∶52，检测波长254 nm）分离制备得到化合物6（17 mg，tR＝16.8 min）。Fr.8 用正相半制备液相（石油醚∶乙酸乙酯＝70∶30，检测波长254 nm），分离制备得到化合物7（27 mg，tR＝22.2 min）。Fr.13A 用反相半制备液相（甲醇∶水＝48∶52，检测波长254 nm）分离制备得到化合物8（10 mg，tR＝12.2 min）。

3 结构鉴定

化合物 1：白色粉末，HR⁃ESI⁃MSm／z：297.077 2 ［M⁃H］－，其分子式为C17H14O5，不饱和度为11。1H⁃NMR 谱显示有个1，2，4⁃三取代苯环质子信号［δ：7.83（1H，d，J＝8.9 Hz，H⁃5），6.89（1H，dd，J＝8.9，2.0 Hz，H⁃6），6.85（1H，d，J＝2.0 Hz，H⁃8）］，在1H⁃1H COSY中，H⁃5 和H⁃6 有相关，进一步证实了这个结构片段。7.32（2H，d，J＝8.5 Hz）和6.84（2H，d，J＝8.5 Hz）表明有个1，4⁃二取代苯环，在1H⁃1H COSY中，H⁃2′和H⁃3′有相关，进一步证实了这个结构片段。化合物1 的13C⁃NMR中，显示有1 个羰基碳（δC175.0），2 个连氧sp3碳（δC67.2、55.5），以及14 个sp2碳。化合物1 的1H⁃NMR 谱和13C⁃NMR 谱数据见表1。在HMBC（图2）中，H⁃5 和C⁃4 有相关，表明C⁃4 连在4a 位上；H⁃2 和C⁃3、C⁃4、C⁃8a 相关，推测该化合物有色原酮结构；H⁃2′和OCH2存在相关，OCH2的H 和C⁃3、C⁃1′相关，推测出化合物1 的结构。

表1 化合物1 的1H 和13C⁃NMR 数据（500／125 MHz，氘代二甲亚砜）Tab.1 1H and 13C⁃NMR data of compound1（500／125 MHz，DMSO⁃d6）

图2 化合物1 的关键HMBC（H→C）相关信号Fig.2 Key HMBC correlations（H→C）of compound 1

化合物 2：白色粉末，HR⁃ESI⁃MSm／z：455.344 1 ［M⁃H］－，分子式为C30H48O3。1H⁃NMR（C5D5N，500 MHz）δ：4.93（1H，brs，H⁃29），4.76（1H，brs，H⁃29），3.51（1H，m，H⁃18），3.44（1H，m，H⁃3），2.73（1H，t，H⁃13），2.62（1H，d，H⁃16），1.78，1.21，1.06，1.05，1.00，0.81（6×CH3）；13C⁃NMR（C5D5N，125 MHz）δ：178.6（C⁃28），151.1（C⁃20），109.7（C⁃29），77.9（C⁃3），56.4（C⁃17），55.7（C⁃5），50.7（C⁃9），49.5（C⁃19），47.5（C⁃18），42.6（C⁃14），40.9（C⁃8），39.3（C⁃1），39.0（C⁃4），38.3（C⁃13），37.4（C⁃10），37.3（C⁃22），34.6（C⁃7），32.6（C⁃16），30.9（C⁃15），30.0（C⁃21），28.4（C⁃23），28.1（C⁃2），25.9（C⁃12），21.0（C⁃11），19.2（C⁃30），18.5（C⁃6），16.2（C⁃24），16.2（C⁃25），16.1（C⁃26），14.7（C⁃27）。以上数据与文献［6］ 报道基本一致，故鉴定化合物2 为桦木酸。

化合物 3：白色粉末，HR⁃ESI⁃MSm／z：457.329 6 ［M⁃H］－，分子式为C29H46O4。1H⁃NMR（C5D5N，500 MHz）δ：3.43（1H，t，H⁃3），3.67（1H，m，C⁃18），2.21，1.20，1.07，1.00，0.99，0.79（6×CH3）；13C⁃NMR（C5D5N，125 MHz）δ：211.4（C⁃20），178.5（C⁃28），77.8（C⁃3），56.3（C⁃17），55.6（C⁃5），50.6（C⁃9），51.8（C⁃18），49.5（C⁃19），42.4（C⁃14），40.8（C⁃8），39.3（C⁃4），39.0（C⁃1），37.5（C⁃13），37.3（C⁃10），37.2（C⁃22），34.5（C⁃7），32.1（C⁃16），30.0（C⁃15），28.5（C⁃21），29.4（C⁃29），28.4（C⁃23），28.1（C⁃2），27.5（C⁃12），21.0（C⁃11），18.5（C⁃6），16.2（C⁃24），16.1（C⁃25），16.1（C⁃26），14.7（C⁃27）。以上数据与文献［7］ 报道基本一致，故鉴定化合物3 为platanic acid。

化合物4：白色针状结晶，HR⁃ESI⁃MSm／z：443.193 1 ［M⁃H］－，分子式为C27H28N2O4。1H⁃NMR（CDCl3，500 MHz）δ：7.72（2H，d，J＝7.7 Hz，H⁃j，j′），7.53（1H，t，J＝7.7 Hz，H⁃l），7.45（2H，t，J＝7.7 Hz，H⁃k，k′），7.29（1H，m，H⁃h），7.27（2H，m，H⁃g，g′），7.24（2H，m，H⁃f，f′），7.17（H，m，H⁃d），7.15（2H，t，J＝8.2 Hz，H⁃c，c′），7.08（2H，d，J＝7.8 Hz，H⁃b，b′），6.83，6.10（2×NH），4.81（1H，dd，J＝14.8，7.5 Hz，H⁃2′），4.37（1H，m，H⁃2），3.95（1H，dd，J＝11.5，5.0 Hz，H⁃1），3.85（1H，dd，J＝11.5，5.0 Hz，H⁃1），3.24（1H，dd，J＝12.5，6.2 Hz，H⁃3′），3.09（1H，dd，J＝12.5，6.2 Hz，H⁃3），2.77（2H，m，H⁃3），2.04（3H，s，CH3）；13C⁃NMR（CDCl3，125 MHz）δ：170.8（C⁃1′），170.3（COCH3），167.1（C⁃m），136.7（C⁃a），136.6（C⁃e），133.7（C⁃i），131.9（C⁃l），129.3（C⁃g，g′），129.1（C⁃b，b′），128.7（C⁃f，f′），128.6（C⁃k，k′），128.6（C⁃c，c′），127.1（C⁃h），127.1（j，j′），126.7（C⁃d），64.5（C⁃1），55.0（C⁃2′），49.4（C⁃2），38.4（C⁃3′），37.4（C⁃3），20.8（CH3）。以上数据与文献［8］ 报道基本一致，故鉴定化合物4 为金色酰胺醇酯。

化合物 5：黄色粉末，HR⁃ESI⁃MSm／z：269.080 0 ［M⁃H］－，分子式为C16H14O4。1H⁃NMR（CD3COCD3，500 MHz）δ：7.63（1H，d，J＝8.0 Hz，H⁃6′），7.59（2H，d，J＝8.5 Hz，H⁃2，6），7.58（1H，d，J＝16.0 Hz，H⁃β），7.50（1H，d，J＝16.0 Hz，H⁃α），6.92（2H，d，J＝8.5 Hz，H⁃3，5），6.60（1H，d，J＝2.0 Hz，H⁃3′），6.54（1H，dd，J＝8.5，2.0 Hz，H⁃5′），3.93（3H，s，OCH3）；13C⁃NMR（CD3COCD3，125 MHz）δ：189.0（C ＝O），162.3（C⁃4′），160.8（C⁃2′），159.4（C⁃4），141.0（C⁃β），132.5（C⁃6′），130.1（C⁃2，6），127.2（C⁃1′），124.5（C⁃α），121.4（C⁃1），115.8（C⁃3，5），107.7（C⁃5′），99.1（C⁃3′），55.2（OCH3）。以上数据与文献［9］ 报道基本一致，故鉴定化合物5 为3⁃去氧苏木查尔酮。

化合物 6：黄色粉末，HR⁃ESI⁃MSm／z：255.064 5 ［M⁃H］－，分子式为C15H12O4。1H⁃NMR（CD3COCD3，500 MHz）δ：8.13（1H，d，J＝9.0 Hz，H⁃6′），7.85（1H，d，J＝15.3 Hz，H⁃β），7.77（1H，d，J＝15.3 Hz，H⁃α），7.75（2H，d，J＝8.5 Hz，H⁃2，6），6.95（2H，d，J＝8.5 Hz，H⁃3，5），6.49（1H，dd，J＝8.5，2.5 Hz，H⁃5′），6.39（1H，d，J＝2.5 Hz，H⁃3′）；13C⁃NMR（CD3COCD3，125 MHz）δ：192.0（C ＝O），166.7（C⁃2′），164.7（C⁃4′），160.1（C⁃4），144.3（C⁃β），132.4（C⁃6′），130.9（C⁃2，6），126.7（C⁃1），117.4（C⁃α），115.9（C⁃3，5），113.6（C⁃1′），107.8（C⁃5′），102.9（C⁃3′）。以上数据与文献［10］ 报道基本一致，故鉴定化合物6 为异甘草素。

化合物 7：黄色粉末，HR⁃ESI⁃MSm／z：281.079 8 ［M⁃H］－，分子式为C17H14O4。1H⁃NMR（DMSO⁃d6，500 MHz）δ：7.75（1H，d，J＝8.5 Hz，H⁃5），7.64（1H，s，H⁃9），7.40（2H，d，J＝8.5 Hz，C⁃2′，6′），7.04（2H，d，J＝8.5 Hz，C⁃3′，5′），6.56（1H，dd，J＝8.5，2.0 Hz，H⁃6），6.33（1H，d，J＝2.0 Hz，H⁃8），5.36（2H，d，J＝1.5 Hz，H⁃2），3.82（3H，s，OCH3）；13C⁃NMR（DMSO⁃d6，125 MHz）δ：180.0（C⁃4），165.1（C⁃7），162.9（C⁃8a），160.7（C⁃4′），135.7（C⁃9），132.7（C⁃2′，6′），129.9（C⁃5），129.3（C⁃3），126.9（C⁃1′），114.8（C⁃3′，5′），114.7（C⁃4a），111.6（C⁃6），102.9（C⁃8），68.0（C⁃2），55.8（OCH3）。NOESY 谱中，H⁃2 和H⁃6′相关，说明C⁃3／C⁃9 位的双键为E构型。以上数据与文献［11］报道基本一致，故鉴定化合物7 为bonducelin。

化合物 8：黄色粉末，HR⁃ESI⁃MSm／z：269.081 4 ［M＋H］＋，分子式为C16H12O4。1H⁃NMR（CD3COCD3，500 MHz）δ：7.84（1H，d，J＝8.5 Hz，H⁃5），7.70（1H，s，H⁃9），7.34（2H，d，J＝8.5 Hz，C⁃2′，6′），6.98（2H，d，J＝8.5 Hz，C⁃3′，5′），6.62（1H，dd，J＝8.5，2.0 Hz，H⁃6），6.40（1H，d，J＝2.0 Hz，H⁃8），5.42（2H，d，J＝1.5 Hz，H⁃2）；13C⁃NMR（CD3COCD3，125 MHz）δ：179.7（C⁃4），164.2（C⁃7），163.0（C⁃8a），158.8（C⁃4′），135.7（C⁃9），132.3（C⁃2′，6′），129.5（C⁃5），128.7（C⁃3），126.1（C⁃1′），115.7（C⁃3′，5′），115.2（C⁃4a），110.8（C⁃6），102.6（C⁃8），67.9（C⁃2）。NOESY 谱中，H⁃2 和H⁃6′相关，说明C⁃3／C⁃9 位的双键为E构型。以上数据与文献［12］ 报道基本一致，故鉴定化合物8 为7⁃羟基⁃3（4⁃羟基亚苄基）色满⁃4⁃酮。

4 讨论

对南蛇藤茎化学成分进行研究，共分离得到8个化合物，包括2 个三萜类化合物（化合物2 和3），1 个酰胺类化合物（化合物4）及5 个黄酮类化合物（化合物1、5～8）。其中，化合物1 为新化合物，化合物2、3、5～8 均为首次从南蛇藤属植物中分离得到，进一步丰富了南蛇藤的化学成分。