北京昌平地区HBsAg阳性孕妇HBV血清标志物与HBV-DNA载量分析

邱 爽，孔 卓，徐东江，宗春杰，王 薇，金国红

(北京积水潭医院 检验科,北京100035)

母婴传播是乙型肝炎病毒(HBV)感染的最主要传播途径，可能发生在产前、产时或产后[1-2]，我国成年人慢性HBV感染50%来自母婴传播[3]，新生儿期感染后90%以上会发展成为慢性乙型肝炎[4]。加强慢性HBV感染的孕妇及其分娩婴儿的规范化管理是切断HBV母婴传播的有效措施。乙型肝炎病毒血清标志物五项是感染性疾病筛查的主要指标之一，能为临床分析乙肝患者病程和传染性提供重要依据；但对于判断HBV复制状况需要进一步检测HBV-DNA，病毒核酸载量(VL)是反映病毒复制及传染性强弱最直接可靠的指标。因此本研究对15 691例孕妇首次产前筛查乙型肝炎病毒血清标志物及HBV-DNA载量进行了分析。

1 材料与方法

1.1 研究对象

以2017-2021年北京市昌平区在北京积水潭医院回龙观院区妇产科建档的，17-48岁的15 691例孕妇为研究对象。首次产前筛查乙型肝炎病毒血清标志物五项，HBsAg阳性标本进行HBV-DNA载量检测。清晨空腹采集静脉血(血量不少于3 ml，排除溶血、乳糜血、高胆红素血的影响)，严格按照标准操作进行。

1.2 方法

乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒c抗体(HBcAb)均采用Abbott i2000免疫发光分析仪及配套试剂检测，执行定期实验体系校准和每日室内质控监测；HBV-DNA载量采用罗氏light Cycler 480 PCR扩增仪，试剂盒为上海科华生物工程股份有限公司的乙型肝炎病毒核酸测定试剂盒(PCR-荧光探针法)，以上检测均严格按照标准操作程序进行检测。

1.3 结果判读

采用美国Abbott i2000免疫发光分析仪检测乙型肝炎病毒血清标志物五项，结果由全自动免疫发光分析仪测定，HBsAg>0.05(IU/mL)、HBsAb>10.00(S/CO)、HBeAg>1.00(S/CO)、HBeAb<1.00(S/CO)、HBcAb>1.00(S/CO)、HBV-DNA>500copies/ml判定为阳性，反之阴性。

1.4 统计分析

采用SPSS 19.0进行数据分析，对相关数据进行描述；率的比较采用卡方检验、变化趋势采用Cochran-Armitage趋势卡方检验，两组HBV-DNA平均载量的比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2017-2021年15 691例孕妇产前筛查HBsAg阳性率情况

15 691例孕妇产前筛查出328例HBsAg阳性，阳性率为2.09%，2017～2021年间HBsAg阳性率逐年降低(χ2=9.404，P=0.002)，见表1。其中837例17-25岁孕妇阳性率为1.43%(12/837)，13 507例26-35岁孕妇阳性率为2.04%(276/13 507)，1 347例36-48岁孕妇阳性率为2.97%(40/1 347)，各年龄组孕妇HBsAg阳性率随年龄段升高而增加(χ2=6.777，P=0.009)。

表1 不同年份之间孕妇筛查HBsAg阳性率的比较

2.2 328例HBsAg阳性孕妇HBVM模式

328例HBsAg阳性孕妇HBVM模式有7种，其中模式Ⅰ(HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+，大三阳)、Ⅱ(HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+，小三阳)共有300例，占所有7种HBVM模式的91.46%(300/328)，为感染乙肝病毒孕妇的主要模式。占比最高的是模式Ⅱ，为82.32%，其次是模式Ⅰ，为9.15%，模式Ⅲ(HBsAg+、HBcAb+)排在第3位，为3.66%，见表2。

表2 328例HBsAg阳性血清HBVM模式与构成比

2.3 不同HBVM模式的HBV-DNA载量、阳性率分析

328例HBsAg阳性孕妇中，87例HBV-DNA载量阳性(>500 copies/ml)，阳性率为26.52%(87/328)；87例HBV-DNA载量阳性中，模式Ⅰ、Ⅱ共79例，占HBV-DNA载量阳性孕妇的90.80%(79/87)；模式Ⅱ有56例，占比最高，为64.37%(56/87)；其次是模式I为23例，占比26.44%(23/87)；孕妇7种HBVM的HBV-DNA阳性率为16.67%～100%，模式Ⅴ、Ⅶ最高(100%)，其次是模式Ⅰ(76.67%)，第三是模式Ⅳ(25.00%)，见表3。7种模式HBV-DNA的载量分布见表4。

表3 不同HBVM模式的HBV-DNA阳性率

表4 不同HBVM模式的HBV-DNA载量检测结果

2.4 HBeAg+孕妇与HBV-DNA阳性率及载量的关系

328例HBsAg+孕妇中，HBeAg+孕妇37例，HBeAg-孕妇291例；37例HBeAg+孕妇中有27例HBV-DNA阳性，阳性率为72.97%；291例HBeAg-孕妇中有59例HBV-DNA阳性，阳性率为20.27%；HBeAg+组HBV-DNA阳性率高于HBeAg-组(χ2=47.124，P<0.001)；HBeAg+组HBV-DNA载量高于HBeAg-组(t=11.676，P<0.001)，见表5。

表5 HBsAg阳性孕妇HBeAg与HBV-DNA阳性率及平均载量

3 讨论

本研究从15 691例孕妇中筛查出328例HBsAg阳性，筛查阳性率为2.09%，HBsAg筛查阳性率高于北京市东城区(0.66%～0.96%)和顺义区1.89%[5-6]，低于北京市1992～2005年孕产妇HBsAg年平均阳性率2.71%(1.99%-3.77%)[7]，低于上海市2013～2016年阳性率4.63%[8]，也低于全国育龄期妇女HBsAg总体阳性率5%～6%[9]。筛查阳性率存在的差异与各地区传染病防控管理效果参差不齐、城乡结合部人员构成复杂，及人员流动大有关。本研究还发现5年间HBsAg阳性率逐年下降(P<0.05)，可能与近年来政府部门及医疗机构推动国家“健康中国”政策，对母婴保健传染病管控力度逐年加大有关，同时也可能与近3年来新型冠状病毒疫情常态化防控对人员流动的限制、社会群体行为的约束等有关。本研究还发现孕妇产前筛查，HBsAg阳性率呈现随年龄段增加而增高(P<0.05)，与文献报道相符[7]，可能与国家生育政策放开，高龄孕妇人群增加相关。

本研究显示，328例HBsAg+的孕妇中有7种HBVM组合模式，以模式Ⅰ(HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+)、Ⅱ(HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+)为主，模式Ⅰ为9.15%，模式Ⅱ为82.32%，模式Ⅰ、Ⅱ共占7种模式的91.46%(300/328)，与沙启明、龚乾涛等报道相近[10-11]。另外在本研究中发现了HBsAg+HBsAb+10例，分别是1例模式Ⅴ和9例模式Ⅵ。机体感染HBV后产生的HBsAb会中和HBsAg，因而HBsAg与HBsAb很少同时被检测到[12]。本研究中HBsAg、HBsAb双阳性率为3.05%(10/328)，以模式Ⅴ为主，与朱锦宏等报道一致[13]。HBsAg和HBsAb双阳性的产生原因可能与免疫逃逸、HBV病毒基因变异等原因有关；也与现代检验技术进展迅速，全自动化学发光免疫分析仪采用的检测试剂灵敏度大幅提高，在抗体产生和抗原被中和的动态过程，同时检出抗原-抗体有一定关系[14-15]。模式Ⅰ、模式Ⅱ即通常所说的大三阳、小三阳，它们阳性率居前，且能一定程度反映HBV病毒复制活跃，是母婴垂直传播危害最大的，应对这两种HBVM组合模式的孕妇进行重点监控管理，预防发生垂直传播。

常规检测五项乙肝病毒血清标志物简便易行，检测方法及仪器设备多种多样，绝大多数医院及基层医疗机构均可开展，一直是临床诊断HBV感染的主要方法，但却难以准确表述HBV的复制活跃程度，因此开展HBV-DNA定量检测非常必要。HBV-DNA载量水平直接反映HBV的存在、病毒复制以及传染性大小，也是预测乙肝疾病进展或治疗效果的重要指标。在本次研究中328例HBsAg阳性孕妇中87例HBV-DNA载量阳性，占26.52%；87例HBV-DNA载量阳性中，模式Ⅱ 56例占比最高，为64.37%，模式Ⅰ 23例次之，为26.43%，模式Ⅰ、Ⅱ共占HBV-DNA载量阳性孕妇的90.80%，与文献报道相近[10-11,16]；7种模式的HBV-DNA阳性率有统计学意义(P<0.01)。本研究筛查出的37例HBsAg+HBeAg+孕妇中27例HBV-DNA载量阳性，阳性率为72.97%；291例HBsAg+HBeAg-孕妇中59例HBV-DNA载量阳性，阳性率为20.27%，HBeAg+组的HBV-DNA阳性率及载量均高于HBeAg(-)组(P<0.01)，与张丽等报道一致[17]。HBeAg是病毒复制活跃的间接指标，HBeAg阳性及高HBV-DNA载量与母婴传播密切相关[18]。乙肝病毒母婴传播多见于高HBV-DNA载量的孕妇，研究表明母亲外周血中HBV-DNA载量越高，新生儿感染HBV的概率就越高；HBV感染新生儿的时间主要是妊娠最后3个月和生产时，少数发生在产后的密切接触中，因此降低孕妇血中HBV病毒量尤其是妊娠最后3个月的病毒量，是阻断乙肝母婴传播的关键手段之一[9]。

世界卫生大会2016年在“全球卫生部门病毒性肝炎战略(2016-2021)”中提出消除乙型肝炎对公共卫生威胁，将5岁儿童的乙型肝炎病毒感染率降至0.1%。乙型肝炎病毒母婴传播是我国慢性乙型肝炎的主要原因，预防HBV母婴传播是控制慢性乙肝的关键。中国肝炎防治基金会在《阻断乙型肝炎病毒母婴传播临床管理流程》中明确指出筛查、抗病毒治疗和婴儿免疫是法治管理的核心内容，通过规范阻断乙型肝炎病毒母婴传播的临床管理，降低母婴传播发生率[1]。HBsAg阳性孕妇的新生儿是HBV感染的高危人群，务必在出生后12 h内，尽早肌内注射乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗，做到联合免疫预防接种[9]。从本研究数据可以看出看北京昌平地区孕妇HBsAg感染处于低水平，但是HBsAg+HBeAg+孕妇HBV-DNA载量处于高水平，母婴传播风险极大，因此加强对育龄期女性HBV感染的尽早监测和积极干预，开展母婴乙肝防治的工作仍不可忽视。