经前腔静脉麻醉在巴马小型猪中小手术中的应用

李萍萍，邓达治，黄雪梅

巴马小型猪作为大型研究动物自1994年被正式命名并应用以来，其新品种如无特定病原体(specific pathogen-free,SPF)小型猪、基因敲除小型猪、无内源性反转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)小型猪等也已陆续开发。微生物组学、蛋白组学、代谢组学、基因组学等研究手段也逐渐在巴马小型猪中开展基础研究。目前，巴马小型猪已广泛应用于医学研究，包括冠心病研究、糖尿病研究、新药评价、心脏手术和肾脏手术技巧训练等。巴马小型猪的麻醉方法已比较完善，但需要动物呼吸机、体外循环机等贵重设备支持。原为中小手术开发的巴马小型猪无气管插管麻醉方法简单可行，但由于氯胺酮注射液自2020年受到严格管控，造成该麻醉方法实施不便。而巴马小型猪的外周静脉开放非常困难，因此亟待开发新的麻醉途经和方法。本课题组经锁骨上窝，将人用一次性单腔或双腔中心静脉导管置入巴马小型猪前腔静脉，通过前腔静脉实现丙泊酚中/长链脂肪乳复合舒芬太尼静脉麻醉及静脉抽血，效果良好，现报道如下。

1 材料与方法

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实验动物 选择6月龄普通级巴马小型猪15只，雌性7只，雄性8只，体重(23.17±0.35)kg，均由广西大学动物科学技术学院供应(动物许可证编号：SCXK桂2013-0003)。

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实验材料与设备 (1)14G单腔/7F双腔一次性使用无菌中心静脉导管套件(国械注准20173664588)，购自深圳市益心达医学新技术有限公司；(2)PM-8000便携式多参数监护仪[批准文号：国食药监械(准)字2005第3210843号]，购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。

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实验药物 (1)咪达唑仑注射液5 mg/1 ml(江苏恩华药业股份有限公司，国药准字H19990027)；(2)2%盐酸利多卡因注射液100 mg/5 ml(湖北天生药业有限公司，国药准字H42021839)；(3)丙泊酚中/长链脂肪乳注射液200 mg/20 ml(北京费森尤斯卡比医药有限公司，国药准字HJ20150655)；(4)舒芬太尼注射液50 μg/1 ml(宜昌人福药业有限公司，国药准字H20054171)。

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实验方法

1.4.1 前腔静脉穿刺置管建立深静脉通路 耳后肌肉注射咪达唑仑注射液0.1～0.15 mg/kg，10～15 min后动物昏睡。将巴马小型猪仰卧位固定于操作台，使两前肢向后外拉伸，并与体中线基本垂直，暴露出穿刺部位——气管旁的锁骨上窝。首选右侧入路，穿刺方向为垂直锁骨上窝最凹陷处皮肤，即略偏向胸廓入口和气管，与躯干呈40°～45°，与中线呈30°～40°。常规消毒、铺巾，予2%利多卡因注射液5 ml局部麻醉。术者沿穿刺方向负压刺入穿刺针3～5 cm，可见暗红色静脉血流出。随后依次按照人深静脉穿刺流程置入导丝，扩张皮下隧道，置入单腔或双腔中心静脉导管8～10 cm，无菌生理盐水封管，将肝素帽接至导管末端。丝线固定导管于皮肤，无菌敷料包扎伤口。

1.4.2 经前腔静脉行丙泊酚复合舒芬太尼静脉麻醉 深静脉通道建立后，予丙泊酚中/长链脂肪乳注射液20 mg静脉注射，随后静脉注射20～40 mg/h以维持麻醉；舒芬太尼注射液2 μg静脉注射，如麻醉时间超过2 h，再静脉注射1～2 μg舒芬太尼注射液维持镇痛效果。手术过程中，小型猪如出现睁眼、体动、摇头等清醒征兆，可临时静脉注射10～20 mg丙泊酚中/长链脂肪乳注射液。麻醉期间，贴胸前电极片给予心电、呼吸监护，将体温针插入直肠行体温监测，使用经皮血氧饱和度探头夹持巴马小型猪耳廓或下唇监测经皮血氧饱和度(percutaneous oxygen saturation，SpO)及脉搏，经鼻吸氧维持SpO>95%。

1.4.3 经前腔静脉采血 暂停静脉输液1～2 min，先使用5 ml注射器连接前腔静脉导管末端抽出5 ml血液弃用，随后使用20 ml注射器抽取所需血液量，并将血液分装至相应采血管待检，随后生理盐水封管。见图1。

图1 巴马小型猪经前腔静脉置管麻醉成功后抽血图

2 结果

15只巴马小型猪中，13只成功经右侧锁骨上窝入路将中心静脉导管置入前腔静脉，2只因穿刺到动脉导致局部血肿转为经左侧入路置管成功。经前腔静脉行全凭静脉麻醉1～3 h，顺利完成胃镜下胆囊切开术1例，肠镜下阑尾内口冲洗术1例，额颞入路大脑中动脉电凝术1例，左侧颈总动脉结扎+左咽升动脉内空气注射术12例。麻醉期间巴马小型猪无甩耳、摇头等情况，生命体征平稳。见表1。单次经前腔静脉采出的血液量20 ml，样本检测血常规、血生化及凝血功能结果见表2。

表1 巴马小型猪麻醉期间生命体征情况(=15)

监测项目波动范围直肠温度(℃)38.3～38.9心率(次/min)76.0～107.0呼吸(次/min)13.0～42.0SpO2(%)95.0～100.0

表2 巴马小型猪血液实验室检测结果(=15)

项目名称 结果血常规 白细胞计数(×109/L)22.72±8.94 粒细胞计数(×109/L)15.12±9.76 淋巴细胞计数(×109/L) 6.70±1.35 单核细胞计数(×109/L) 0.52±0.11 嗜酸性粒细胞计数(×109/L) 0.27±0.09 嗜碱性粒细胞(×109/L) 0.07±0.02 红细胞计数(×1012/L) 8.24±0.84 血红蛋白(g/L)143.20±12.73 血小板计数(×109/L)525.6±101.11凝血功能 血浆凝血酶原时间(s)13.73±0.71 活化的部分凝血活酶时间(s)41.41±0.42 凝血酶时间(s)20.50±0.14 血浆纤维蛋白原(g/L) 3.55±0.06肝肾功能 总胆红素(μmol/L) 2.14±0.56 直接胆红素(μmol/L) 0.67±0.29 总蛋白(g/L)65.45±5.73 白蛋白(g/L)38.73±0.92 球蛋白(g/L)26.73±4.81 丙氨酸氨基转移酶(U/L)59.93±7.07 天门冬氨酸氨基转移酶(U/L)111.80±7.07 碱性磷酸酶(U/L)120.33±21.21 γ-谷氨酰胺转移酶(U/L)68.40±23.33 腺苷脱氨酶(U/L)10.47±3.18 总胆汁酸(μmol/L)11.85±5.37 胆碱酯酶(U/L)380.53±17.68 α-L-岩藻糖苷酶(U/L)11.93±5.13 血清前白蛋白(mg/L) 3.73±1.51 尿素(μmol/L) 2.94±0.91 肌酐(μmol/L)88.42±10.20 碳酸氢根(mmol/L)24.03±1.70 尿酸(μmol/L) 5.73±1.41 单胺氧化酶(U/L)18.28±1.77

3 讨论

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小型猪前腔静脉置管及采血技术要点 (1)对巴马小型猪进行充分镇静及固定，确保穿刺定位点的暴露及穿刺时体位的稳定。(2)左侧入路容易穿刺到巴马小型猪膈神经，应首选右侧入路。(3)一次性使用5 ml无菌注射器配套的针头型号为0.7×32 mm TWLB，沿着穿刺方向刺入3 cm就有可能刺入巴马小型猪血管，故穿刺不宜过深。(4)参照检验科及护理采血流程及建议，小型猪不存在大量输液的抢救情况，停止静脉输液2 min后，先弃用前段5 ml血液，随后收集需要的血液量，不影响检测结果。

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前腔静脉穿刺置管的可能并发症及处理 参照人类应用深静脉穿刺置管的经验方法，分析可能的并发症及其处理对策：(1)无法找到血管，则可上、下或左、右稍微移动针头调整穿刺方向直至有血流出为止。(2)误入动脉，表现为血液可自动涌入注射器腔内，若术者经验不足，强行推注盐水置管则出现置管成功后，可通过导管抽血但不能通过导管输液的情况。处理办法为拔除导管后局部压迫3～5 min。(3)局部血肿形成，通常继发于局部反复穿刺入血管后置管不顺利。处理办法为拔除穿刺针后局部压迫3～5 min。(4)血胸、气胸，常见于穿刺角度过大误入胸腔，表现为可抽出气体或气体混合血液。处理办法为立即拔除穿刺针，局部压迫3～5 min。如小型猪缺氧、缺血症状严重，则需要实行胸腔闭式引流或安乐死。(5)心电监护上提示心律失常，通常见于中心静脉导管或导丝置入过深，干扰右心房内起搏系统，将导管或导丝退出1 cm以上即可消除。(6)右心房穿孔、心包填塞，通常为穿刺或置管较深、暴力导致，处理办法为对小型猪开胸补心或安乐死。(7)中心静脉血栓形成或感染，通常为留置导管时间过久时出现，建议能用单腔管则不选双腔或多腔管，导管不需要时立即拔除。(8)心脏空气栓塞，需要连续3～4 ml/kg的导管内空气注射才会导致猪死亡，出现风险较小。

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术前用药及麻醉用药选择 本研究单用咪达唑仑注射液0.1～0.15 mg/kg肌肉注射进行巴马小型猪镇静，未发现明显呼吸抑制情况。麻醉药物丙泊酚中/长链脂肪乳注射液药物半衰期仅3.5 min，首剂20 mg静脉注射，随后20～40 mg/h静脉注射，可取得较好的麻醉效果。镇痛药物舒芬太尼的注射液半衰期为2.5 h，使用生理盐水稀释成1 μg/ml，首剂2 μg静脉注射，麻醉超过2 h，静脉追加注射1～2 μg，可取得较好的镇痛效果。

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经巴马小型猪前腔静脉麻醉方法的优缺点及注意事项 本麻醉方法参照人类门诊麻醉方法为巴马小型猪中小手术而开发，简单易行，所需要器械、药物支持较少，经过住院医师规范化培训的人员均可操作。但课题组因实验研究需要减少对巴马小型猪的刺激而未进行有创血压监测，未能提供麻醉期间巴马小型猪的血压波动情况。另外，该麻醉方法无气管插管及呼吸机支持，所用药物均有产生呼吸抑制风险，应坚持“宁少勿多”的给药原则，注意给氧，防止动物舌根后坠，仅适用于对动物呼吸功能影响不大的中小手术。