虎红平板凝集试验与试管凝集试验在布鲁菌病抗体检测中的应用对比

孔嘉名

（本溪市疾病预防控制中心检验科，辽宁 本溪 117000）

布鲁菌病又被称作布病，主要由布鲁氏菌感染引发所致，是全球广泛流行的人畜共患病[1]。与牛、羊、猪有密切接触史的屠宰人员和饲养员是布病高危群体[2]。若布病患者未得到及时、有效的治疗，则会由急性转为慢性，诱发隐性病灶，导致患者病情反复发作，严重影响患者身体健康和正常劳动能力。早期诊断对合理制订治疗方案、改善布病患者预后具有重要意义[3]。传统的细菌培养检测方法虽具有较高的准确性，但耗时较长，易延误治疗时机。随着医学技术的不断发展，布病血清学凝集试验成为临床行之有效的检测方法，具有操作便捷、快速、易于判断的优势，但仍存在漏诊情况。为探寻更加可靠的检测方法。基于此，本研究旨在分析虎红平板凝集试验与试管凝集试验在布病抗体检测中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2017 年7 月至2019 年7 月本心中366 例待检的疑似布病阳性标本，其中男208例，女158例；年龄25～73岁，平均（49.03±8.17）岁。患者均对本研究知情，本研究经医院伦理委员会审核批准。纳入标准：疑似阳性；均接受虎红平板凝集试验与试管凝集试验进行布病抗体检测。排除标准：依从性差，无法配合研究；血液系统疾病；临床资料不完整。

1.2 方法 ①采集血液标本，抽取患者晨起空腹静脉血3～5 ml，促凝处理后2～8 ℃冷藏备用。②虎红平板凝集试验，使用中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提供的虎红平板凝集抗原，于冰箱内保存备用，温度2～8 ℃。检测时取血清标本30 μl，滴于干净玻片上，取等量虎红平板凝集抗原，使其与玻片上血清充分混合，5 min后用裸眼判定结果。③试管凝集试验，使用中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提供的布鲁氏菌抗原液，于冰箱中保存备用，温度2～8 ℃。布鲁氏菌抗原液用0.9%氯化钠溶液稀释10倍，取血清40 μl添加到第1试管中，试管内含有0.9%氯化钠溶液960 μl，均匀混合，取混合液500 μl添加到第2试管中，试管内含有0.9%氯化钠溶液500 μl，按照1∶1的比例进行倍比稀释，其余各5管以此类推。将稀释10倍的布鲁氏菌抗原液500 μl添加至各血清稀释管中，混合均匀，常温放置24 h观察结果。根据《布鲁菌病诊断标准》[4]判断检测结果，虎红平板凝集试验阳性标准：出现25%凝集（+）或以上；试管凝集试验阳性标准：抗体滴度≥1∶100++。

1.3 观察指标 ①比较虎红平板凝集试验与试管凝集试验的检测阳性率。②以细菌培养结果为金标准，分析并比较虎红平板凝集试验与试管凝集试验在布病抗体检测中的结果。③比较虎红平板凝集试验与试管凝集试验两种检查在布病抗体检测中的诊断效能，包括准确度、敏感度、特异度、漏诊率和误诊率，敏感度=真阳性例数（/真阳性+假阴性）例数，特异度=真阴例数（/真阴性+假阳性）例数，准确度=（真阳性+真阴性）例数/总例数，漏诊率=假阴性例数（/真阳性+假阴性）例数，误诊率=假阳性例数（/真阴性+假阳性）例数。

1.4 统计学方法 采用SPSS 23.0统计学软件进行数据分析，计量资料以“”表示，采用t检验，计数资料以[n（%）]或率（%）表示，采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 虎红平板凝集试验与试管凝集试验的检测结果分析 两种检查方法检测布病抗体的阳性率比较差异无统计学意义，见表1。

表1 虎红平板凝集试验与试管凝集试验的检测结果分析Table 1 Analysis of the detection results of Rose bengal plate agglutination test and standard tube agglutination test

2.2 虎红平板凝集试验与试管凝集试验在布病抗体检测中的结果比较 细菌培养结果显示，366 例疑似布病感染者中布病抗体检测阳性15 例，阴性351 例，阳性率为4.10%（15/366）。以此为参照，虎红平板凝集试验与试管凝集试验两种检测方式诊断布病抗体检测的结果，见表2。

表2 虎红平板凝集试验与试管凝集试验在布病抗体检测中的结果比较（n）Table 2 Comparison of results of Rose bengal plate agglutination test and standard tube agglutination test in the detection of brucellosis antibody(n)

2.3 虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测布病抗体的诊断效能评价 虎红平板凝集试验检测布病抗体的敏感度高于试管凝集试验，漏诊率低于试管凝集试验（P＜0.05）；试管凝集试验检测布病抗体的特异度高于虎红平板凝集试验，误诊率低于虎红平板凝集试验（P＜0.05）；两种检测方法的检测准确性比较差异无统计学意义（χ2=0.612，P=0.433）。见表3。

表3 虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测布病抗体的效能评价[%（n/N）]Table 3 Evaluation of the efficacy of tiger red plate agglutination test and tube agglutination test for detecting brucellosis antibodies[%(n/N)]

3 讨论

布病起病缓慢，感染后患者缺乏特异性症状，可表现为亚急性、急性、慢性等多种类型，易出现误诊、漏诊情况，延误患者病情，影响预后[5-6]。由于细菌培养具有较高的检验条件要求，且检验时间较长，因此，多采用血清学方法进行布病检测。相关报道显示，虎红平板凝集试验快速易行，试验简便，有助于筛查布病患者；试管凝集试验是诊断布病的常用手段，具有较高的特异度和准确度[7-8]。目前，虎红平板凝集试验与试管凝集试验已被列入国家布病诊断标准，其中虎红平板凝集试验阳性即可判定为可疑病例，试管凝集试验滴度1∶100++及以上即可判断为阳性病例，可作为早期筛查布病的重要依据。

本研究结果显示，虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测布病抗体的准确度比较差异无统计学意义，提示两种检测方法在布病检测中均具有较高的准确性，诊断结果相近。其中虎红平板凝集试验检测布病抗体的敏感度高于试管凝集试验，试管凝集试验的特异度高于虎红平板凝集试验，可改善误诊情况，两种检查方法互为补充，能为医师鉴别布病感染病例提供可靠的参考依据。分析后可知，尽管虎红平板凝集试验与试管凝集试验两种方法在布病抗体检测中具有较高的准确度，但两种方法检测的抗体类型各异。其中虎红凝集抗原呈酸性，pH值3.6～3.9，而在酸性条件下会抑制IgM的活性，因此，该方法主要用于筛查IgG类抗体，试管凝集试验则主要以IgM 类抗体检测为主。动物和人在感染布病后，体内均会出现IgM、IgG 抗体，但IgM 水平随着病情的发展而快速下降，尤其是在慢性布病患者的血清中，IgM 水平呈低表达状态，因此，通常需依靠IgG检出此类病例。本研究中两种方法的检测阳性率存在一定差异，其中虎红平板凝集试验检测的阳性率为6.01%，试管凝集试验的阳性率为4.64%，证实了这一观点。结合本研究结果表明，虎红平板凝集试验检测成本较低，操作便捷，仅需依赖肉眼即可明确诊断结果，具有诊断快速、易于判断、敏感度高的优点，在布病的流行病学调查和大范围筛查中发挥着重要的作用。临床中为了保证检测结果的准确性，建议急性布病患者2 周后行血清学复查，以明确诊断结果，减少误诊，也可对虎红平板凝集试验阳性的样本进行试管凝集试验复查，以提高布病抗体检测的诊断效能，进一步改善漏诊、误诊情况[9-11]。

综上所述，在布病抗体检测中应用虎红平板凝集试验与试管凝集试验均可有效检出布病患者，二者的诊断准确性相当，其中虎红平板凝集试验检测布病抗体的敏感度更高，漏诊率更低，试管凝集试验的特异度更高，误诊率更低，两种检测方法互为补充，可为医师诊断布病提供可靠参照，具有重要的应用与推广价值。