胃癌患者ANXA2、ANXA7水平的变化及其与临床病理因素和肿瘤标志物水平的关系

阮稳稳，陈永军，黄咪

1.安康市人民医院肿瘤内科，陕西 安康 725000；

2.空军军医大学第一附属医院整形外科，陕西 西安 710000；

3.安康市人民医院消化内科，陕西 安康 725000

胃癌常发于胃黏膜上皮，居于消化道恶性肿瘤首位，在胃各个部位均能发生病变[1]。胃癌早期多无明显症状，只有轻微上腹部疼痛，多数患者表现出食欲减退，部分患者进食过多腹部胀痛明显[2]。病症到达晚期时，癌肿扩散，患者会出现持续性剧烈疼痛，可放射至腰背部，患者全身症状进一步加重，日渐消瘦、疲乏、贫血，严重危害机体健康[3-4]。膜联蛋白A2(annexin A2，ANXA2)在外周血中分泌，是一种外分泌形式蛋白，在病毒感染与胆囊腺癌诊断中有一定价值[5]。膜联蛋白A7(annexin A7，ANXA7)为具有相结合型的蛋白，能够与Ca2+相结合产生对磷脂的依赖性，其亚细胞水平异常结合与很多肿瘤发生、转移以及浸润有着密切关系，其能够促进癌细胞增生，癌肿的分化程度越低，ANXA7表达水平越少[6]。肿瘤标志物是细胞在血液里释放出来的物质，每一种肿瘤都有相关的肿瘤标志物，当人体内出现恶性肿瘤时，其水平会升高，对于癌肿的预测有很好的价值。基于此，本研究对胃癌患者ANXA2、ANXA7表达水平的变化及其与临床病理因素和肿瘤标志物水平的关系进行研究，以期为胃癌的诊断与后续治疗提供参考，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料选取安康市人民医院2019年6月至2021年6月收治的80例胃癌患者作为观察组。纳入标准：(1)经过临床诊断，病理组织检查确诊为胃癌者；(2)既往从未治疗，首次在本院开始治疗者；(3)临床资料完整者；(4)患者及其家属均签署知情同意书。排除标准：(1)合并其他恶性肿瘤者；(2)精神异常无法配合者；(3)不同意提供其癌旁组织标本者；(4)合并有感染性疾病者。80例胃癌患者中男性46例，女性34例；年龄54～75岁，平均(58.46±6.20)岁；癌肿直径≥5 cm 35例，＜5 cm 45例；组织分化程度：高分化12例，中分化25例，低分化43例；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期32例，Ⅲ～Ⅳ期48例。所有患者均行手术治疗，术中取胃癌癌肿组织标本作为癌症组，同时取癌旁组织标本作为癌旁组。另选取同时间来我院体检的健康者80例作为对照组。对照组中男性45例，女性35例；年龄53～76岁，平均(57.64±7.01)岁。观察组和对照组受检者的性别和年龄比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 ANXA2、ANXA7表达水平测定观察组检测癌组织标本与癌旁组织标本，对照组健康群体仅检测血清。癌组织标本、癌旁组织标本经过4%的中性缓冲甲醛浸泡，浸泡之后用常规的石蜡包埋，所有标本均要裹上石蜡，包埋之后加入多克隆抗体进行克隆，按照1∶400的比例进行稀释后用免疫组SP法染色试剂盒相关操作说明进行染色，以磷酸盐缓冲液(PΒS)替代一抗作为阴性去对照。结果判读：利用显微镜随机用5个视野来观察，利用阳性表达细胞的着色强度，计数阳性细胞百分率。阳性表达细胞着色强度：没有着色-0分，浅黄色-1分，棕黄色-2分，棕褐色-3分；百分率：阳性细胞＜25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，76%以上为4分，两种标准相乘结果＞1为阳性，≤1为阴性。

1.2.2 肿瘤标志物水平测定在清晨空腹抽取所有患者(治疗前)外周血5 mL，对照组于体检当日清晨空腹状态下抽取外周血5 mL，所有血液标本通过离心分离出血清，用酶联免疫吸附法检测血清中ANXA2、ANXA7、癌胚 抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)、糖抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9，CA19-9)及 糖抗原24-2(carbohydrate antigen 24-2，CA24-2)。

1.3 观察指标(1)比较癌症组和癌旁组标本的ANXA2、ANXA7表达水平；(2)分析胃癌组织ANXA2、ANXA7表达与临床病理因素的关系；(3)比较观察组和对照组血清ANXA2、ANXA7表达水平及肿瘤标志物水平的差异；(4)分析胃癌患者血清ANXA2、ANXA7水平与肿瘤标志物的关系。

1.4 统计学方法应用SPSS22.0统计软件分析数据。计数资料比较采用χ2检验，等级资料比较采用秩和检验；计量资料符合正态分布，以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验；血清ANXA2、ANXA7与肿瘤标志物的关系采用Pearson相关性分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组标本的ANXA2、ANXA7表达水平比较癌症组标本ANXA2、ANXA7的阳性率明显高于癌旁组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 两组标本的ANXA2、ANXA7表达水平比较[例(%)]

2.2 胃癌组织ANXA2、ANXA7表达与临床病理因素的关系ANXA2、ANXA7表达与患者性别、年龄、肿瘤直径均无关(P＞0.05)，与肿瘤分化程度、TNM分期有关(P＜0.05)，见表2。

表2 胃癌组织ANXA2、ANXA7表达与临床病理因素的关系(例)

2.3 两组受检者的血清ANXA2、ANXA7和肿瘤标志物水平比较观察组患者血清ANXA2、ANXA7水平与CEA、AFP、CA19-9、CA24-2水平明显高于对照组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 两组受检者的血清ANXA2、ANXA7和肿瘤标志物水平比较(±s)

表3 两组受检者的血清ANXA2、ANXA7和肿瘤标志物水平比较(±s)

组别观察组对照组t值P值例数80 80 ANXA2(μg/L)23.1±6.2 4.3±1.8 26.046 0.001 ANXA7(ng/L)75.2±16.4 61.3±13.2 5.906 0.001 CEA(μg/L)9.7±2.4 2.8±1.3 22.611 0.001 AFP(μg/L)17.2±7.3 13.9±6.8 2.959 0.004 CA19-9(U/mL)48.4±6.3 27.5±5.4 22.529 0.001 CA24-2(U/L)3.3±1.5 2.1±1.6 4.894 0.001

2.4 血清ANXA2、ANXA7水平与肿瘤标志物的相关性将胃癌患者血清ANXA2、ANXA7与CEA、AFP、CA19-9、CA24-2水平进行Pearson相关分析发现，血清ANXA2、ANXA7水平与CEA、AFP、CA19-9、CA24-2呈正相关(P＜0.01)，见表4。

表4 ANXA2、ANXA7水平与肿瘤标志物的相关性

3 讨论

胃癌多发于45岁以上人群，可按照其形态特点和浸润方式分为四种类型：Ⅰ型，结节型，呈菜花样；Ⅱ型，溃疡局限性，似胃溃疡；Ⅲ型：浸润溃疡型，占50%；Ⅳ型：弥漫浸润型，胃壁显著增厚变硬[7-8]。胃癌主要治疗手段是手术切除，辅以化学疗法和放射疗法。免疫治疗是临床常用疗法之一，能够有效提高癌细胞扩散抵抗力[9-10]。由于胃癌早期无明显症状，当疾病被检出时，癌肿已发生扩散、转移，导致手术疗效差，蛋白水平变化在多种恶性肿瘤早期诊断与预后评估中发挥了重要作用，将蛋白水平与胃癌相关生物因素结合或可为疾病诊断与治疗提供支撑[11-12]。

既往有研究发现ANXA2、ANXA7等蛋白生物分子可用于胃癌的诊断，而国内对于蛋白类研究甚少[13-14]。ANXA7的表达缺失与肿瘤发展有着密切的关系，在胃癌中分化越差ANXA7表达越少[15]。ANXA2是一种有着多种生物效能的蛋白质，能够与细胞跨膜实现运输，与细胞外受体产生一定活性，还有信号之间转换传导功能[16-17]；谢小龙等[18]研究胰腺癌患者血清ANXA2及与临床病理特征和预后的关系时发现，胰腺癌患者血清ANXA2水平异常升高，血清ANXA2在评估病情程度和预后中具有一定价值，这与本研究结论相符合。本研究结果中，癌症组的ANXA2、ANXA7的阳性率(62.5%、65.9%)高于癌旁组(21.3%、18.8%)，说明ANXA2、ANXA7在胃癌组织中阳性表达率占比很大。万爱民等[19]研究提出临床病理因素、癌肿的大小、其所在位置、组织学类型、病理分期以及淋巴结是否转移与胃癌标本的生存和预后有着密切关系。本研究中发现，ANXA2、ANXA7表达水平与患者性别、年龄、肿瘤直径均没有关系，与肿瘤分化程度、TNM分期有关，这说明肿瘤的分化程度越高，TNM分期越高，ANXA2、ANXA7越高，说明ANXA2、ANXA7高表达影响着胃癌发生、蔓延、浸润和转移。

此外，CEA、AFP、CA19-9、CA24-2是肿瘤明显标志物。在本研究中，观察组患者血清ANXA2、ANXA7水平高于对照组，进一步证实了ANXA2、ANXA7对早期胃癌的检测有着极大的意义。同时，本研究采用Pearson相关结果显示，胃癌患者血清ANXA2、ANXA7水平与CEA、AFP、CA19-9、CA24-2呈明显正相关，这说明ANXA2、ANXA7或可与肿瘤标志物相同，在胃癌诊断与评估中发挥一定价值。

综上所述，胃癌患者血清ANXA2、ANXA7存在异常高表达，与血清肿瘤标志物水平有一定联系。同时，与癌旁组织相比，胃癌患者癌组织中ANXA2、ANXA7阳性率更高，其表达与肿瘤分化程度、TNM分期等临床病理因素有关。但本研究不足之处在于未对ANXA2、ANXA7表达进行多因素分析，未排除其他影响ANXA2、ANXA7表达的因素，仍有待后期完善研究再进一步加以证实。