氯胺酮和丙泊酚对版纳微型猪近交系麻醉效果的观察

2022-10-28赵丽琴

云南畜牧兽医 2022年5期

赵丽琴

(镇雄县动物卫生监督所，云南镇雄 657200)

版纳微型猪近交系具有体型小、性情温顺的特点，通过连续20世代以上的高度近交，基因高度纯合，其纯合度已高达98.6%以上，仅可能有1%左右杂合，用他们进行实验研究时，不会因为隐性有害基因的暴露而影响实验结果的一致性；遗传稳定性高，基因突变的概率很低，由此可以保证实验结果的稳定性，因此，在生物学、医学、药学等领域的研究中应用越来越广泛。版纳微型猪近交系成年猪体重为25 kg左右，具有基因纯合度高、遗传稳定性好、体型小、饲养成本低、易于实验操作和标准化质量控制等特点，是目前医学生物学研究中更为理想的实验动物[1]。

对版纳微型猪近交系实施外科手术实验，麻醉是进行手术首先考虑的问题，无论气管插管还是剖腹观察均需在良好的麻醉状态下进行，成功的麻醉是保障实验顺利进行的重要环节，实验中选择合适的麻醉剂和麻醉方法，既可以减少麻醉过深导致动物死亡，又可以避免因麻醉太浅动物术中躁动而影响手术进行。以往使用速眠新Ⅱ(864)、静松灵、保宁定等兽用麻醉药进行麻醉，但其使用效果一直不理想，麻醉维持时间较短，且需多次给药，给术者带来诸多不便，一直是手术麻醉过程中难以解决的问题。本研究参照人医麻醉管理策略，使用氯胺酮肌内注射和丙泊酚静脉推注分别对30例版纳微型猪近交系实施麻醉，并在麻醉后施行皮肤取皮和敷料手术，在整个操作过程中注意观察比较丙泊酚静脉推注麻醉与氯胺酮肌内注射麻醉在版纳微型猪近交系实验中的麻醉效果，摸索出适合版纳微型猪近交系的麻醉剂，掌握麻醉剂量及其维持时间，为寻求安全、有效、简单、合理的麻醉药和麻醉方法，以适应不同实验需求，为临床正确使用提供理论依据和实际指导。

1 材料与方法

1.1 动物

版纳微型猪近交系，由云南省版纳微型猪近交系重点实验室提供，年龄8～15月龄，体重15～25 kg，雌雄不限，共30头。麻醉与手术均在云南省版纳微型猪近交系重点实验室的实验动物手术室完成。

1.2 药物

盐酸氯胺酮注射液：100 mg/支，批准文号：兽药字100761663，江苏中牧倍康药业有限公司生产。丙泊酚注射液：200 mg/支，批准文号：兽药字191377031，广东嘉博制药有限公司生产。硫酸阿托品注射液：0.5 mg/支，批准文号：兽药字221381510，四川恒通动保生物科技有限公司生产。

1.3 麻醉方法及用量

1.3.1术前准备

根据使用麻醉剂的不同，将版纳微型猪近交系随机分为2组，每组15头，A组用氯胺酮注射液肌注麻醉，B组用丙泊酚静脉注射麻醉。每组实验猪于术前12 h禁食不禁水，术前洗澡；术前30 min肌内注射阿托品每千克体重0.05 mg，抑制腺体分泌，以减少唾液分泌，有利于保持呼吸道通畅。

1.3.2麻醉方法

A组猪在麻醉前先称重，按每千克体重0.01 mg的剂量在耳后部肌内注射盐酸氯胺酮注射液。B组每头猪均在术前称好体重，按每千克体重2.0 mg的量逐渐给予丙泊酚静脉注射，待实验猪呼吸减慢，肢体活动逐渐消失，进入麻醉状态后进行手术。在进行丙泊酚麻醉时，要根据手术类型、个体差异性及并发症等因素综合判断丙泊酚的注射量，并在手术过程中不断观察随时准备调整。

1.3.3手术及麻醉监测

对上述各组猪的背部两侧指定部位刮毛，先后用碘伏、酒精棉球消毒后实施手术取皮、敷料和包扎。在整个手术过程中记录麻醉诱导开始至意识消失时间，停止麻醉至自主呼吸恢复时间、至清醒时间，同时在进入麻醉维持期开始每隔10 min监测一次体温、心率和呼吸频率。

1.4 观察指标及麻醉判定

1.4.1诱导期

从给药时间到进入麻醉状态的时间。表现为精神沉郁、头颈下垂、四肢无力、步履蹒跚，不能避让障碍物，进而倒卧在地，睫毛反射消失，全身肌肉松弛，痛觉消失，皮肤夹捏反应减弱，即为进入麻醉状态。

1.4.2维持期

从进入麻醉时间到开始苏醒(出现疼痛反应和开始骚动，不配合手术)时间。在维持期表现痛觉和触觉消失，瞳孔散大，腹式呼吸，肌肉松弛，肌张力进一步降低，皮肤夹捏反应消失，猪体无振动，手术切割无反应。

1.4.3苏醒期

从开始苏醒时间到站立行走时间。苏醒期表现为不配合手术或有轻微运动开始到完全能站立行走。

2 结果与分析

2.1 丙泊酚和氯胺酮麻醉对猪的诱导期、维持期和苏醒期的影响

B组丙泊酚静脉注射麻醉与A组氯胺酮肌内注射麻醉的诱导期、维持期和苏醒期的时间测定结果见表1。丙泊酚静脉注射的过程中，麻醉起效很快，诱导期时间为(0.87±0.14)min，很多时候药物(按体重计量的药物)还未推注完，猪便昏迷倒地。从表1可以看出，B组的诱导期比A组短，差异极显著(P<0.01)；但从两种麻醉剂对猪体麻醉维持时间和苏醒时间来看，用氯胺酮肌内注射麻醉的A组明显比丙泊酚静脉注射麻醉的B组长，差异也是极显著(P<0.01)。

表1 两组实验猪在麻醉各期的比较

2.2 麻醉后体温、心率和呼吸频率指标的检测结果

两组实验猪在麻醉维持期间的体温、心率、呼吸频率的测定分析结果见表2。从两组动物注射麻醉剂后进入完全昏迷状态开始，测定0、10、20、30、40 min的体温、心率、呼吸频率三个生理指标。从表2可以看出，麻醉维持期体温从麻醉起效开始至40 min均呈下降趋势，但幅度很小，至苏醒前略有回升；心率从麻醉起效开始至苏醒前幅度变化较小，较平稳，但丙泊酚静脉注射组在麻醉维持中期(20 min、30 min)比氯胺酮组略有降低外，在其他阶段均比氯胺酮组略有升高；呼吸频率从麻醉起效开始后的前30 min幅度变化较小，较平稳，但30 min后，呼吸频率开始呈现缓慢下降的态势。从表2可以看出，体温、心率和呼吸频率在两组间无差异。

表2 两组实验动物在麻醉中的生理指标测定

2.3 麻醉效果

采用的30头版纳微型猪近交系在背部取皮制作创面模型，均已成功麻醉并顺利完成手术，没有发生不良反应，无一例麻醉意外发生，成功率为100%。两组实验在麻醉操作之前由于注射麻醉剂均会对猪体产生应激，所以在麻醉前期心率和呼吸频率较高。进入麻醉状态后，表现为呼吸、心率下降，眼球向内下方，肌肉松弛，流涎、分泌增多，睫毛、角膜反射消失，肌张力进一步降低，皮肤夹捏反应消失。从表3可以看出，氯胺酮肌内注射麻醉起效慢，自行卧倒时间和麻醉时间较长，平稳进入麻醉后手术中体动少不易苏醒，无躁动，效果较好，手术过程平稳顺利；丙泊酚静脉注射麻醉，麻醉起效快，但维持时间不长，术中偶有躁动，体动次数较多，疼痛反应强，手术需要多次静脉追加药物剂量，但重复给药不会延长苏醒时间，对剂量要求不是很严格，使用安全，但成本高。

表3 两种麻醉方法的麻醉效果比较

3 讨论

猪在解剖学、生理学、疾病发生机理等方面与人极其相似，在生命科学研究领域中具有重要的实际应用价值[2，3]，尤其是小型猪，因其体型小，饲养成本低，便于实验操作，在教学、科研中应用极为广泛。但由于小型猪生性胆小，不温顺，易躁动，皮下脂肪较厚，耳静脉、大隐静脉等常用穿刺部位不是很清楚，不易准确定位，而且脆性大，血管很容易破裂，静脉穿刺失败率高，耽误时间较长，常常给静脉穿刺带来很大的困难[4]。猪脂肪组织多，麻药进入脑组织除取决于脑/血分布系数外，在更大程度上受到脂肪组织多少的影响，血药浓度只有在脂肪组织饱和后才能达到，因此，用量较大，起效晚，维持时间长[5]。

氯胺酮是一种短效麻醉剂，术中镇痛作用强，对于血压、心率、呼吸无明显改变，易于麻醉管理。氯胺酮肌内注射后3～7 min可进入麻醉状态，呼吸开始平稳，睫毛、角膜反射迟钝或者消失，此时已进入麻醉状态可实施手术。氯胺酮对于内脏镇痛作用弱，躯体性镇痛作用强，特别适合体表及四肢的手术[6]。由于采取肌内注射法麻醉，因而不受手术时间长短的限制，可随时掌握麻醉的深浅度，如发现麻醉出现较浅时可以随时进行肌注，1 min后很快进入麻醉状态，麻醉和止痛作用可维持30～50 min，故在手术结束前半小时应停止用药，术后在很短的时间内可苏醒。采用肌内注射氯胺酮麻醉，操作简单，可操控性好。

丙泊酚是一种烷基石碳酸，以乳剂混悬液形式保存，其药理特性优于其他静脉麻醉药物，具有起效快、苏醒快及术后不良反应少等特点。在人医全麻手术中应用较广，重复给药在体内无蓄积作用，不会延长苏醒时间，因此，采用丙泊酚复合麻醉的方法对猪麻醉效果比较理想。但采用静脉注射，由于静脉不宜找到，增加注射难度，延长手术时间。丙泊酚麻醉起效快，平均(0.87±0.14)min，无蓄积作用，停药则快速平稳恢复，苏醒时间是(4.67±1.23)min，重复给药不会延长苏醒时间。此法比氯胺酮肌注给药(麻醉起效时间3～7 min，完全苏醒时间5～12 min)明显优越。在麻醉策略上，应首先于术前对每头猪肌内注射阿托品注射液。因阿托品可以减少支气管和唾液腺分泌，防止气道阻塞，保证呼吸道畅通，阻断血管-迷走神经反射，但能使心率加快，因此，对猪要减少用量。在手术部位肌注一定剂量的局麻药，有利于减轻手术部位的疼痛，以减少猪体的疼痛反应和体动，利于手术顺利进行。常用的局部麻醉药有盐酸普鲁卡因、盐酸利多卡因、盐酸丁卡因等，其主要功能是作用于神经干、神经小结、神经末梢，阻断神经兴奋的传达，使所支配部位痛觉消失，穿透力强，作用快、扩散广、持续时间长，安全指数比较高[7]。

不同实验动物对麻醉药的敏感度存在个体差异，麻醉药物起效剂量差别较大，因此，麻醉应遵循由浅入深的原则。猪由于皮下脂肪组织较多，肌内注射时部分麻药会进入脂肪组织，因而麻醉时与其他动物相比，药物用量较大，起效较慢。若手术时间较长，追加麻醉药要严格控制剂量，一般不超过初始剂量的1/3，因为有基础麻醉，麻醉药物稍微过量，便可能超过动物的耐受阈值，导致麻醉过深。但其短期应用可增强肝微粒体药物酶的活性，产生耐药现象，故每次应用时剂量应较前一次偏大[8-10]。

麻醉的深度是麻醉的关键。手术中要根据动物的体重及健康状况，仔细算好所需的麻醉药物剂量。在进行静脉注射麻醉时，要控制给药速度，不可将药物一次快速推入，而要间歇性的缓慢推进，在注射量达到预定剂量的1/2时，更要减缓给药速度，并一边注射，一边观察动物的睫膜反射、肌松程度和呼吸频率，一旦达到所需要的麻醉状态时，立刻停止注射。为防止麻醉过深而引起动物死亡，最好在手术前进行气管插管，以保持呼吸道通畅，争取抢救时间，同时建立静脉通道，连接三通接头，利于追加麻醉药物和输液，有条件时还应配备心电监护仪，随时监控动物的血压、脉搏，尽早发现问题，减少损失。同时一定要注意保暖，防止猪体因麻醉手术后低温死亡。