胚胎移植技术在圭山奶山羊新品系培育中的研究与应用

赵燕，胡荣，朱兰，赵建科,4，米玛普尺,5，李卫娟*

(1.云南省畜牧兽医科学院，云南 昆明 650224；2.勐海县勐混镇农业综合服务中心，云南 勐海 666210；3.石林县畜牧兽医总站，云南 石林 652200；4.永平县厂街乡农业综合服务中心，云南 永平 672606；5.德钦县畜牧水产管理服务中心，云南 德钦 674500)

羊奶是奶业发展仅次于牛奶的第二大产业，是我国奶产业发展的重要补充。云南省石林圭山山脉一带养羊挤奶、制作奶豆腐具有300多年的历史，现代乳品加工行业的加入，加快了云南奶山羊产业的进程，形成以圭山山羊、萨能高代杂交羊、从国外引进的吐根堡、阿尔卑斯、努比奶山羊为基础的奶山羊生产群体。充分利用云南石林圭山山羊适应性好、乳脂率高、母羊利用年限长等优势，培育具有南方特色的优质奶山羊新品种。为缩短世代间隔，扩大优秀的个体数量，采用胚胎移植技术进行快速扩繁，对迅速提高育种群数量和质量，满足南方地区对黑色山羊产品的偏爱具有重要的意义。

1 材料与方法

1.1 试验材料的选择

1.1.1供体羊

选择以圭山山羊为母本、阿尔卑斯奶山羊为父本的杂交一代经产奶山羊，产奶性能好、体型外貌特征符合新品种培育目标的经产母羊30只作为供体，所选供体健康状况良好，繁殖性能好，无生理性疾病。

1.1.2受体羊

选择云南羊羊好农牧发展有限公司饲养的2～5岁、空怀、健康、无营养性、繁殖性疾病、膘情中等、产奶量高、具有母性的经产云上黑山羊和萨能奶山羊母羊220只作为受体。

1.1.3饲养管理

供体羊和受体羊试验前隔离饲养20 d，驱除体内外寄生虫，并进行三联四防、小反刍兽疫、口蹄疫、羊痘疫苗免疫注射；提供良好的饲养管理条件，不随意调整管理方式和更换饲草饲料。每日饲喂全株青贮玉米、苜蓿干草、花生秧等，补充维生素A、D和矿物元素，并供给清洁的饮水和食盐。

1.1.4主要器械及药品

孕酮硅胶栓(CIDR)，新西兰 Zoetis Australia 公司生产，每个 CIDR 含孕激素 0.3 g；国产海绵栓；垂体促卵泡素(FSH)，比利时、西班牙、宁波三生3个公司生产的不同品牌；孕马血清促性腺激素(PMSG)、促黄体素(LH)，宁波第二激素厂生产；胚胎回收液(PBS)，美国BIONICHE 公司生产；胚胎培养液(Holding)，美国ICP 公司生产；前列腺素(PG)，复合维生素A、D、E(Vade)。

1.2 试验方法

不同来源的FSH超排方法及同期发情处理，采用CIDR+FSH法对供体羊进行超排处理，孕酮硅胶栓(CIDR)和海绵栓对受体羊进行同期发情处理，方法对比见表1。

表1 超数排卵和同期发情

1.3 数据分析

所有数据采用Excel 2010整理，再用SPSS 20.0进行单因素方差分析和显著性检验，结果用“平均数±标准差”表示，P>0.05表示差异不显著，P<0.05表示差异显著。

2 结果

2.1 供体羊超排效果分析

由表2可见，西班牙、比利时和宁波三生3个不同厂家生产的FSH，对杂交一代圭山奶山羊新品系超排后生产的可用胚胎数量差异不显著(P>0.05)。

表2 不同试剂超排效果

2.2 受体羊同期发情效果分析

采用不同厂家的孕酮硅胶栓(CIDR)和海绵栓对受体羊进行同期发情处理，从表3可以看出，采用进口的孕酮硅胶栓和国产海绵栓对受体羊进行同期发情处理，受体羊的发情率和发情受体的可用率差异不显著，两种栓的平均同期发情率达到89%，发情受体的利用率达86.22%。

表3 受体羊同期发情处理情况

2.3 移植产羔效果分析

本次移植受体羊169只，产羔88只，产羔率52.07%。

3 讨论

本次试验分别使用比利时产FSH、西班牙产FSH和宁波三生产FSH对30只供体进行递减法超排处理，在超排过程中，4只供体由于乳房炎严重，注射了抗生素及其他相关治疗后淘汰，三种超排试剂平均回收可用胚胎数分别为16.5枚、17.91枚、17.40枚，高于吐根堡奶山羊的7.1枚[1]、龙陵黄山羊的7.40枚[2]、波尔山羊的8枚[3]，而低于努比山羊的20.8枚[4]，说明与品种有关。由实验结果可见，不同试剂的超排效果差异不显著，目前受疫情影响，进口超排试剂紧张和成本较高，在不影响超排效果的情况下，可采用国产的超排试剂替代。

选用进口孕酮硅胶栓(CIDR)和国产海绵栓对云上黑山羊和萨能奶山羊220只受体进行同期发情处理，发情196只，平均发情率86.22%，进口孕酮硅胶栓(CIDR)和国产海绵栓处理的受体发情率分别为85.19%和87.50%，两者差异不显著。在考虑成本的情况下，可以选用国产海绵栓进行同期发情处理，但是在用国产海绵栓时，要加强受体羊的饲养管理。

本次移植受体羊169只，发情母羊利用率86.22%，产杂交一代羔羊88只，为圭山奶山羊新品系培育提供了优质的育种群，具有较好的社会效益和利用前景。