献血者乙肝病毒表面抗原初筛反应性结果S/CO值与真阳性的关系研究

李冲 闫晓娟 尚高峰

(1.陕西省商洛市中心血站检验科,陕西 商洛 726000;2.武功县人民医院检验科,陕西 咸阳 712200)

异性病毒肝炎是临床上最为常见的传染病之一，主要由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)引起，以肝脏为靶器官，损伤其他多种器官[1]。由于ELISA灵敏度高，导致HBsAg假阳性较高，导致血液来源的流失，影响临床的供血需求[2-4]。因此如何对HBsAg初筛反应性标本进行确证，降低假阳性率，一直是临床研究的重点。本文通过对HBsAg ELISA反应性标本的S/CO值进行确证，分析不同ELISA试剂的S/CO值临界点，从而有效降低筛查的假阳性，满足临床供血需求。报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月至2020年12月期间我市采用两种试验：初复两次酶联免疫吸附试验(ELISA)及核酸扩增试验(NAT)筛查乙肝病毒表面抗原初筛出现反应性结果的600例无偿献血者作为研究对象，其中男性336例，女性264例。初次献血者419例，重复献血者181例。年龄21～55岁，平均年龄(36.4±5.3)岁。

1.2方法 (1)EISA HBsAg检测：初检仪器：Tecan公司FreedomEVO前加样系统，西门子公司BEPⅢ酶免后处理系统。复检仪器：Tecan公司FreedomEVO前加样系统，Ausbio公司FAME24/20酶免后处理系统。试剂：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒(酶联免疫法)，生产厂家分别为：北京万泰生物药业股份有限公司(以下简称北京万泰)，英科新创(厦门)科技股份有限公司(以下简称厦门新创)质控品：北京康彻思坦公司生产的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)血清(液体)标准物质。(2)NAT检测：仪器：罗氏COBAS201核酸检测系统(美国Roche)；试剂：罗氏公司乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 人类免疫缺陷病毒(1+2型)检核酸试剂(PCR-荧光法)(Procleix UltrioAssay)。质控品：北京康彻思坦公司生产的适用于罗氏二代混检系统的血筛核酸混合(HBVDNA/HCVRNA/HIV -1RNA)(液体)标准物质。以上所有使用的试剂均检查合格且在试剂有效期内使用；所有的仪器均按仪器说明书的要求进行保养和维护，并确保仪器在正常工作状态下运转。(3)献血者HBsAg确证：珠海丽珠试剂股份有限公司提供的HBsAg确证试剂盒，上海科华生物工程有限公司提供的核酸检测试剂盒(PCR荧光法)。将任意初筛ELISA呈反应性的标本进行中和试验，对结果不确定的标本进行双孔复试，检测步骤和判定标准严格按试剂盒操作说明书进行。

2 结 果

2.1两种ELISA试剂初筛结果对比 共有600例标本呈HBsAg ELISA反应性，将600例标本再进行中和试验，当S/CO<0.8时，两种ELISA初筛试剂的阴性率均为100%(487/487，80/80)；当0.8≤S/CO<1时，北京万泰试剂假阳性率为0，厦门新创试剂假阳性率100%(4/4)；当S/CO≥1时，北京万泰试剂和厦门新创试剂的ELSIA阳性率分别为51.33%(58/113)、28.88%(149/516)。见表1。

表1 两种ELISA试剂初筛结果对比

2.2ROC曲线绘制评估HBsAg ELISA初筛试剂S/CO的适宜临界值 当北京万泰试剂与厦门新创试剂的适宜S/CO值分别为1.628、3.229时，各自AUC值最大分别为0.995、0.968，灵敏度均为1，特异度分别为0.962、0.784。见表2。

表2 两种HBsAg ELISA初筛试剂结果与HBsAg阳性预测值(S/CO值)

3 讨 论

我国法律法规及相关部门对采血机构进行规定，需要采用两种不同厂家的ELISA和一种NAT试剂筛查献血者的HBV，从而降低血液相关疾病传播的风险[5]。目前对血液筛查反应性的献血者进行确证试验是血站筛查假阳性的主要手段[6]。中和试验是目前确证HBsAg阳性是否准确的主要方法，但由于其操作繁琐、成本较高，目前在血站难以大范围推广应用[7]。且由于我国献血量和临床用血量存在一定缺口，也导致了假反应性献血者的确证试验开展不足[8]。因此HBsAg假阳性一直存在，且发生率较高，导致了相当一部分血液来源的流失。目前大部分研究发现[9]，中和试验的HBsAg确证结果的分级与ELISA初筛结果中的S/CO值呈明显正相关。因此不少学者认为ELISA初筛时具有一个S/CO临界值，能反映患者是否存在假阳性情况[10]。

本文对我市献血者进行研究，选取600例ELISA初筛呈反应性的血液标本进行中和试验确证，采用ROC曲线找出不同ELISA试剂适宜的S/CO值，从而判断HBsAg的阳性情况，结果显示，在S/CO<0.8时，两种试剂的阴性率均为100%，表明在S/CO<0.8时ELISA试剂基本不存在假阳性，诊断的灵敏度、特异度较高。当0.8≤S/CO<1时，北京万泰试剂假阳性率为0，厦门新创试剂假阳性率为100%，提示不同ELISA试剂对HBsAg阳性率的诊断效能不同，厦门新创试剂在S/CO超过0.8时，存在假阳性，但北京万泰试剂仍然不存在假阳性。在S/CO≥1时，北京万泰试剂和厦门新创试剂的阳性率分别为51.33%、28.88%，提示当S/CO值超过1时，ELISA存在假阳性情况。对上述两种ELISA试剂进行ROC曲线绘制，结果显示，北京万泰试剂和厦门新创试剂在S/CO值分别为1.628、3.229时，各自AUC值最大分别为0.995、0.968，灵敏度均为1，特异度分别为0.962、0.784。提示使用北京万泰试剂对献血者进行ELISA初筛时，若S/CO值≥1.628，则可直接判断为HBsAg阳性，无需确证。而在使用厦门新创试剂对献血者进行ELISA初筛时，若S/CO值≥3.229时，则可直接判断为HBsAg阳性，无需确证。可见不同ELISA试剂的S/CO临界值不同，通过ROC曲线判断不同ELISA试剂诊断HBsAg阳性的S/CO临界值对采血机构的初筛具有重要意义。

综上所述，两种HBsAg ELISA试剂均有各自的适宜S/CO值，检测结果大于等于该值时，对HBsAg阳性的诊断准确率较高，可直接判断为阳性，无需确证。