金合欢素对酒精性脂肪肝的保护作用

张慧敏，李朝一，刘诗语，赵丽霞，李丽娟

（晋中信息学院，山西 太谷 030800）

0 引言

金合欢素不但具有解郁安神、理气通络的作用，还具有抗氧化、消炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用[1]。酒精性脂肪肝是由肝脏负责代谢的，超过90%的酒精会在肝内被分解，使肝细胞膜内的脂质被氧化，从而损害肝细胞的膜，从而影响到脂肪酸的分解和代谢[2]。本次课题研究实验将小鼠分为3组，分别为对照组、酒精组和金合欢素组。通过构建金合欢素模型，用酒精溶液对小鼠进行干预，在无菌环境下取出小鼠肝脏进行肉眼观察及显微镜镜下观察。实验过程中观察小鼠的身体状况的变化。经解剖对小鼠的肝脏进行病理分析，观察小鼠肝脏是否有病变等特征，分析血清ALT及AST，探讨金合欢素对小鼠酒精性脂肪肝的影响。结果表明酒精干预组的小鼠体重明显下降，肝脏表面出现大小不等的白色空泡，有明显的出血点，颜色变为暗红色，且质地变糟粕。镜下观察可见酒精干预组小鼠的细胞核分布较分散，且边缘模糊，无明显界限。而金合欢素药治组的小鼠体重无明显变化，肝脏表面颜色为鲜红色，并且光泽透亮。镜下观察其细胞核分布密集且轮廓清晰，界限明显。与对照组比较，酒精组和金合欢素组血清AST、ALT的差异性较显著，与酒精组比较，金合欢素组的指标明显降低。在对小鼠灌胃金合欢素溶液后，小鼠的酒精性脂肪肝病变症状显著减轻，揭示了金合欢素抗肿瘤的一种机制，在治疗酒精性脂肪肝疾病方面有良好的应用价值。

1 材料与方法

1.1 溶液的配置

以PEG∶蒸馏水=0.05 g∶100 mL的比例，用蒸馏水将PEG颗粒溶解；

取金合欢素最大溶解度为60 mg/kg，用被溶解后的PEG溶液将其分化，然后加入蒸馏水稀释；

将浓度为100%的酒精以酒精∶蒸馏水=60∶40的比例配置成浓度为60%的酒精。

1.2 用药方式

取ICR级健康雌鼠15只，体重为18～22 g，将其分为3组，1组5只。分组后各组小鼠的体重无明显差异。第1组小鼠为空白对照组，单独连续灌胃PEG溶液7 d；第2组小鼠连续灌胃PEG溶液6 d，第7天对其灌胃浓度为60%的酒精溶液；第3组小鼠先灌胃金合欢素溶液及PEG溶液6 d，造模成功后第7天进行酒精溶液灌胃；随后对所有实验所用小鼠进行称重，与第1次所称体重进行对比并将小鼠脱颈处死，取出小鼠的肝脏，并做出切片，在显微镜下观察其肝细胞结构的变化。

表1 药物注射情况

1.3 实验动物处置、标本采集

实验所用小鼠均采用颈椎脱臼法将其处死，碘伏液消毒腹部切口，打开腹腔，取出肝脏。将肝脏进行脱水，石蜡包埋，切片，HE染色，封片后，在显微镜下观察其病理变化。

2 结果

2.1 一般形态观察

肉眼可见正常肝脏及建模后的肝脏颜色鲜红，表面光泽透亮；而病变的肝脏表面有大小不等的白色空泡，质地变糟粕，颜色变为暗红色，见图1。

图1 病理解剖肝脏

2.2 体重

第1组小鼠体重前后无明显变化；而第2组小鼠体重明显降低，差异性较大；第3组小鼠体重差异卫浴第1组和第2组之间，差异性较小，见表2、图2。

表2 小鼠体重 单位：g

图2

2.3 镜下观察

用HE染色方法对切片进行染色，然后在显微镜下观察肝细胞。第一张图片可观察到肝小叶横断面呈不规则多边形，其中央有一条纵贯长轴的中央静脉，其外周是放射状相间排列的肝板和肝血窦，细胞核分布较密集，界限明显，轮廓清晰。而第二张病变组图片中，其细胞核分布较分散，细胞核边缘模糊，无明显界限。经治疗后可见第三张图中细胞核界限依旧分布密集且边缘清晰，可见明显的界限，见图3。

3 讨论与结论

个别小鼠在灌胃酒精进行干扰之前有食欲不振情况，可被认为是灌胃过程对其食道产生影响。从而影响小鼠正常进食，因此会导致其体重下降。

酒精对肝细胞的毒性主要是通过影响肝脏的代谢，使肝细胞膜表面的脂质成分过度氧化，从而破坏了肝细胞膜[3]。肝细胞肿胀，坏死，对脂肪酸的分解和代谢发生障碍，引起肝内脂肪沉积，形成脂肪肝。90%以上的乙醇都在肝内分解代谢[4]。

本实验在建立金合欢素的模型后，用酒精对其进行干预，在无菌环境下取出小鼠肝脏进行肉眼观察以及显微镜下观察，探讨金合欢素对小鼠酒精性脂肪肝的影响。