气相色谱-三重四极杆串联质谱测定 芹菜中毒氟磷残留

巩 凡，郝莉花*，潘鹏云，黄君婷

（1.河南省产品质量监督检验院，河南郑州 450047；2.仲恺农业工程学院轻工食品学院，广东广州 510000）

我国作为农业大国，农药使用量位居世界首位，有机磷类农药使用量占农药总使用量的60%以上[1]。其中，毒氟磷是我国创制的植物免疫诱导抗病毒剂，对烟草、黄瓜、番茄病毒病具有良好的防治效果，市场前景良好[2]。因具有高效、低毒等优势，被广泛应用于农业生产[3]。目前，GB 2763—2021对蔬菜中毒氟磷规定了限量值但未指定检测方法，因此有必要建立毒氟磷的检测方法并开展监测。

目前，关于毒氟磷的检测方法主要包括气相色谱-质谱法（Gas Chromatography Tandem Mass Spectrometry， GC-MS）[4]、液相色谱-串联质谱法（Liquid Chroma- tography-Triple Quadrupole Tandem Mass Spectrometry， LC-MS/MS）[5-6]。LC-MS/MS检测毒氟磷前处理过程虽然简单，但检测要求前处理方法复杂，仪器维护成本高。气相色谱-质谱法使用单四极杆质谱，定性能力弱，容易出现假阳性。而气相色谱-串联质谱（Gas Chromatography-Triple Quadrupole Tandem Mass Spectrometry，GC-MS/MS）法不仅分离度好，抗基质抗干扰能力很强，具有高灵敏性和专属性及精确性更高的优点，因此建立有效的GC-MS/MS法测定果蔬中毒氟磷的残留量很有必要。

本研究采用气相色谱三重四极杆质谱建立蔬菜中毒氟磷检测方法，以芹菜为基质，通过优化气相色谱和串联质谱等测试条件建立了灵敏度高、重现性好的果蔬中毒氟磷检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

芹菜：市售。毒氟磷标准品（100 μg/mL，安谱）；石墨化碳黑氨基复合柱（1200 mg，纳普）；乙腈（色谱纯，美国Honeywell）；氯化钠（分析纯，恒兴试剂）；实验用水：GB/T 6682—2008中规定的三 级水。

1.2 仪器与设备

电子天平（0.1 mg，ME104E）、台式冷冻离心机（VElocity 18R，德国Dynamica）、气相色谱仪-串接三重四极杆质谱仪（7890-7000，美国Agilent）。

1.3 实验方法

1.3.1 样品前处理

称取10 g芹菜于50 mL离心管中，加入10 mL乙腈，涡旋混匀30 s，用滤纸过滤，收集滤液，加入3.0 g 氯化钠，振荡提取1 min，静置，待乙腈相与水相分层，分离出的乙腈相经无水硫酸钠干燥后待 净化。

净化：石墨化碳黑氨基复合柱经活化后，上样 1 mL，乙腈冲洗，收集流出液约10 mL，氮气吹干后乙腈定容至1 mL，过0.45 μm滤膜，待测。

1.3.2 检测条件

（1）气相色谱条件。色谱柱：DB-1701毛细管柱（30 m×320 μm，0.25 μm）。进样口温度：250 ℃；进样体积：1 μL，不分流进样。升温程序：初始温度60 ℃，保持1 min，以40 ℃/min升至170 ℃，然后以10 ℃/min升至310 ℃保持3 min。

（2）质谱条件。离子源：EI源；离子源温度： 230 ℃；传输线温度：270 ℃；采集模式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）模式。

（3）定性定量方法。以待测组分的保留时间和定性离子对作为定性依据，定量离子峰面积外标法定量。

1.3.3 标准溶液的配制

取毒氟磷标准品1 mL定容至10 mL，获得10 μg/mL 毒氟磷中间液。将中间液用空白样品基质梯级稀释为0.005 μg/mL、0.010 μg/mL、0.020 μg/mL、0.100 μg/mL和0.500 μg/mL的标准工作溶液。

2 结果与分析

2.1 仪器分析参数的确定

用1.3.2的检测条件，采用前级质谱SCAN扫描，扣除背景后得到毒氟磷质谱图，见图1。

图1 毒氟磷质谱图

从图1毒氟磷质谱图可以看出，m/z=408.0是毒氟磷的分子离子峰，其中响应最高的碎片m/z为270.9，因此选择响应较好的270.9为母离子，进行产物离子研究。

通过对270.9采用5 V、15 V、25 V、35 V和 45 V电压碰撞，结果发现子离子251.1、244.1、175、 148和123.1具有较高响应。子离子的响应见表1。

由表1可知，251.1、244.1、175在15 V条件下响应达到最高，148、123.1在35 V条件下响应达到最高，考虑到大多数化合物在高碰撞能条件下较难获得稳定产物，因此子离子148、123.1在35 V条件下更具有应用价值，因此选择270.9→251.1（15 V）定量，270.9→148（35 V）和270.9→123.1（35 V）定性。

表1 母离子为270.9条件下不同碰撞能时子离子的响应

2.2 检出限、线性范围、精密度和回收率

（1）在芹菜中添加毒氟磷标准品，按照1.3实验方法进行测定，根据3倍信噪比计算方法检出限，10倍信噪比计算定量限。最终得到毒氟磷检出限为0.003 mg/kg，定量限为0.01 mg/kg。

（2）将1.3.3配制的标准工作液按照1.3.2分析条件进样，以定量离子丰度响应为纵坐标、质量浓度为横坐标制作标准曲线并进行线性回归，毒氟磷在0.005～0.500 μg/mL线性关系良好，线性相关系数R2=0.9999。

（3）称取10 g阴性样品，分别在标准曲线低、中、高3种浓度进行加标实验，添加含量分别为 0.005 mg/kg、0.020 mg/kg、0.500 mg/kg，每个添加 水平平行测定6次，计算回收率和相对标准偏差（RSD）。毒氟磷农药的回收率在92.4%～121.0%，相对标准偏差（n=6）为2.29%～9.12%，回收率和精密度 良好。

3 结论

研究建立了气相色谱串接三重四极杆质谱法测定芹菜中毒氟磷残留。毒氟磷在0.005～0.500 μg/mL 线性关系良好，相关系数R2=0.9999；方法的检出限为0.003 mg/kg，定量限为0.01 mg/kg，回收率为92.4%～121.0%，RSD为2.29%～9.12%，方法准确性和精密度良好。该方法简便、快速、准确，可应用于市售蔬菜中毒氟磷农药残留的检测。