獾子油对慢性肾功能衰竭小鼠血液生化指标的影响※
2022-09-16周禹彤潘子怡赵婉婷孙高原王思涵刘美琦何晓燕
●周禹彤 潘子怡 赵婉婷 孙高原 王 楠 刘 璐 王思涵 徐 岩 刘美琦 何晓燕
(通化师范学院生命科学学院 吉林 通化 134002)
獾(Meles meles)别名狗獾、山狗、貆等,是狗獾属哺乳类的半冬眠动物[1]。獾肉可食用,且味道鲜美。獾子油是由獾的皮下脂肪提取的淡黄色、气味辛凉的油脂,具有清热解毒、止痛、润肠等诸多功效[2-3]。獾子油经常以外敷的方式用来治疗烫伤。《本草纲目》中关于獾子油的药用记载也有很多,可用于治疗小儿疳疮、子宫脱垂、咯血、白秃等病症[4]。
慢性肾功能衰竭(CRF)是各种原因引起的肾脏损害进展恶化达终末期的表现。在临床上患者一般表现为双下肢水肿,胃气上逆,头晕,乏力,胸闷气短等[5]。致病的原因一般有药物诱导、进食不规律、酗酒等。近年来,中医学在预防和治疗CRF方面获得了许多的经验,中药用于治疗CRF疾病也已经得到肾病学者的关注,目前研究最多的治疗CRF的中药是大黄[6],但对于獾子油治疗CRF的研究尚未见报道。本文通过腺嘌呤诱导小鼠CRF来探究獾子油对CRF小鼠的治疗作用,以期为今后开发新的治疗CRF药物或保健品提供一定的试验数据依据,也可为獾子油的药用价值研究提供新的方向。
1 材料与方法
1.1 实验动物
昆明种小白鼠,雄性,体重为(20.03±2.13)g,购自辽宁长生生物技术股份有限公司,许可证号:SCXK(辽)2020-0001。
1.2 实验药品和仪器
腺嘌呤(美国Sigma公司);尿毒清颗粒(康臣药业有限责任公司);獾子油;羧甲基纤维素钠;尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)试剂盒;URIT-880型半自动生化分析仪;高速离心机;PMA7500动物天平;恒温水浴锅。
1.3 动物模型建立
除正常空白组外,在实验的第1、3、5天,小鼠灌胃给予250 mg/kg的腺嘌呤混悬液(配置0.5‰羧甲基纤维素钠溶液,再加入腺嘌呤配置成25 mg/mL的腺嘌呤混悬液)[7-8],为维持小鼠CRF状态,在后续给药的28 d期间,每隔7 d灌胃1次,灌入同等剂量的腺嘌呤混悬液。
1.4 分组和给药
蛇形分组法将60只小鼠分为6组。根据《中药药理研究方法学》[9],可计算出每天小鼠灌胃尿毒清的剂量为0.38 mg/10 g,并按照0.1 mL/10 g给药,正常空白组和模型组灌胃给予相同体积的蒸馏水,而獾子油高、中、低剂量组每天獾子油的灌胃给药剂量为0.2 mL/10 g、0.15 mL/10 g、0.1 mL/10 g,试验周期为28 d。
1.5 血清中BUN、Cr、UA的测定
饲养周期结束后,随机取10只小鼠,将小鼠颈椎脱臼处死,立即取其心脏血液,用离心机在3500 r/min条件下离心20 min,取上清液即血清,测定血清中BUN、Cr、UA的含量。
2 结果与分析
2.1 獾子油对腺嘌呤致慢性肾衰竭小鼠血清中BUN、Cr含量的影响
由表1可知,灌胃给药28 d后,与正常空白组小鼠比较,模型组小鼠血清中的BUN、Cr含量存在差异性显著(P<0.05),说明腺嘌呤混悬液致小鼠CRF模型建立成功;与模型组比较,尿毒清组和獾子油高、中、低剂量组小鼠血清中的BUN、Cr含量均表现存在差异性显著(P<0.05),说明尿毒清和獾子油高、中、低剂量对腺嘌呤混悬液致小鼠CRF均有明显的恢复作用,且随着獾子油给药剂量的增加,恢复作用逐渐增强,同时与尿毒清组作用越接近。因此,獾子油高剂量作用最佳。
表1 不同处理腺嘌呤致慢性肾衰竭小鼠血清中BUN、Cr含量
2.2 不同处理腺嘌呤致慢性肾衰竭小鼠血清中UA含量
由表2可知,灌胃给药28 d后,与正常空白组小鼠比较,模型组小鼠血清中UA含量存在显著性差异(P<0.05),说明腺嘌呤混悬液致小鼠CRF模型建立成功;尿毒清组和獾子油高、中、低剂量组小鼠血清中的UA含量与模型组比较存在差异性显著(P<0.05),说明尿毒清和獾子油高、中、低剂量对腺嘌呤混悬液致小鼠CRF均有明显恢复作用;且随着獾子油给药剂量的增加,恢复作用逐渐增强,同时与尿毒清组作用越接近。因此,獾子油高剂量作用最佳。
表2 不同处理腺嘌呤致慢性肾衰竭小鼠血清中UA含量
3 讨论
獾子油常用于治疗烫伤、烧伤且可淡化疤痕,说明其有杀菌、消毒功能,可促进细胞再生。獾子油中含有不饱和脂肪酸及饱和脂肪酸,其中不饱和脂肪酸含量较高,主要有降血脂、抗炎、抗肿瘤等诸多药用功效[10],饱和脂肪酸含量较低,其可通过减少炎症及纤维化对酒精性肝病进行防治。本试验选择腺嘌呤诱导并建立CRF小鼠模型,是因为腺嘌呤诱导小鼠CRF致病机理与人类患病者的病理过程相类似。腺嘌呤诱导CRF的致病机理是浓度较高的腺嘌呤混悬液进入体内后,在黄嘌呤氧化酶的作用下生成不溶于水的2,8-二羟基腺嘌呤沉积,影响氮质化合物的排泄和电解质等物质的代谢[11-12]。此诱导方法可导致肾脏形态异常、代谢功能紊乱,从而实现CRF模型的构建。
BUN和Cr均是体内除蛋白质外的一类含氮化合物,经过肾小球滤过作用再排出到体外,若肾功能异常,肾小球滤过率降低,BUN和Cr排出量下降,从而导致血清中BUN和Cr含量升高。因此,它们可作为判断肾功能是否正常的重要指标。UA既是非蛋白含氮化合物,也是嘌呤代谢的终产物,血中UA也需经肾小球滤过后再排出到体外。若肾功能异常,则只有少量的UA排出体外,从而使UA在血清中的含量升高,因此,血液中UA含量的多少也能反映出肾功能的好坏。
4 结论
本试验结果表明,獾子油可降低由腺嘌呤所致CRF小鼠血清中BUN、Cr、UA的含量,说明獾子油可以改善腺嘌呤致CRF小鼠的肾功能。因此,獾子油作为一种新型治疗CRF的药物,有进一步研究的意义。