玉竹石斛护肤霜修复皮肤屏障的功效研究

皮肤屏障作为人体第一道防线，主要由角质层、角质细胞间的脂质及天然保护因子等组成。皮肤屏障在抵御外界变应原及微生物侵袭的过程中发挥重要作用

。多项研究表明，皮肤屏障障碍是导致特应性皮炎

、食物过敏

、哮喘

和过敏性鼻炎

等疾病发生发展、反复发作的重要原因。中医学认为皮肤屏障功能受损的病因病机主要与血燥、血热、湿热有关

。随着中医药技术的不断进步，中医药在屏障功能受损皮肤的修复和治疗过程中发挥越来越重要的作用。

石斛为我国传统中药，具有益胃生津、滋阴清热之效，临床上与玉竹相须为用，用以治疗肺胃阴虚证

。现代药理学研究表明，石斛主要成分多糖具有抗肿瘤、增强免疫、抗氧化等作用

，玉竹活性成分具有抗炎、降糖、调节免疫、抗肿瘤作用

，但两者合用于皮肤屏障功能修复研究未见报道。本研究构建皮肤屏障功能受损小鼠模型，局部给予玉竹石斛护肤霜后检测小鼠皮肤水分、油分比例、表皮厚度、神经酰胺含量，验证玉竹石斛护肤霜对屏障功能受损皮肤的修复作用，并初步揭示其作用机制。

材料与方法

01 材料与仪器

SPF级KM小鼠，雄性，体质量20-22g，购自上海杰思捷实验动物有限公司，许可证号码：SCXK（沪）2018-0004，合格证编号20180004046312；鼓槌石斛（江苏三才五妍医疗科技发展有限公司提供，产地：云南麻栗坡）；玉竹（吴江上海蔡同德堂中药饮片有限公司，产地：湖南邵东）；神经酰胺试剂盒（上海江莱实业股份有限公司）；RM2016病理切片机（上海徕卡仪器有限公司）；RBX-916智能数显多功能皮肤检测仪（宁波市瑞尔芭比医疗设备有限公司）； KZ-II高速组织研磨仪（Servicebio）；Epoch酶标检测仪（BioTeK）；Eclipse Ci-L正置白光拍照显微镜（Nikon，Japan）。

02 实验方法

经上海市皮肤病医院中药学博士潘会君鉴定，所用石斛为兰科植物鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxum Lindl.的干燥茎，玉竹为百合科植物玉竹Polygonatum odoratum(Mill.) Druce的干燥根茎。按处方量称取以上两味药材饮片并置10倍水中浸泡30min，第一次煎煮2h，第二次8倍水煎煮1h。合并滤液，低温静置过夜。取上清液旋转蒸发进行浓缩，得含生药1.0g/ml的提取液。

按处方量称取油相成分聚氧乙烯（21)硬脂醇醚、聚氧乙烯（2)硬脂醇醚、十六-十八醇、单硬脂酸甘油酯、液状石蜡等加热熔化，保温70℃-80℃；另取水、甘油、玉竹石斛提取液置另一容器中加热至70℃-80℃；置搅拌机上，边搅拌边将油相缓缓加入水相中，不断搅拌至冷，按该工艺分别制备含中药量10%、5%的玉竹石斛护肤霜及不含中药的护肤霜基质。

随着造模次数增加，模型组皮肤呈红肿状态，具备明显渗血点，部分皮损处出现结痂。各干预组均能够不同程度改善症状，其中玉竹石斛护肤霜高剂量组效果最为明显。

专栏小编：接下来我们谈谈经济方面的内容。2018年11月中国制造业P MI为50.0，环比小幅回落0.2个百分点，处于临界点；欧元区11月制造业P MI终值51.8，创2016年8月以来低点；美国11月I S M制造业指数59.3，好于预期的57.5。对此，三位专家怎样看这些数据？

具有一定初速度的带电粒子垂直于电场线射入电场时，由于所受到的电场力与初速度不同向，那么带电粒子在电场中将做曲线运动，并且通过分析带电粒子的受力情况，可以发现其在电场中做的是类平抛运动。其中在水平轴方向上做的是匀速直线运动，运动方程为：

本报讯 工业和信息化部日前对申请立项的410项行业标准计划项目和64项国家标准计划项目予以公示并征集意见，其中包括《化肥追溯体系规范》化工推荐性行业标准制定项目。征集意见截止时间为11月28日。

50只小鼠随机分为5组，即皮肤屏障功能正常组、屏障功能受损模型组、护肤霜基质干预组以及玉竹石斛护肤霜高、低剂量干预组，每组各10只。实验前一天对小鼠背部剃毛、脱毛。参照文献[10]造模方法，除正常组外，其余各组小鼠采用胶带法建立皮肤屏障功能受损模型。具体方法如下：将医用胶带紧贴于剃去背毛的小鼠背部皮肤，随即快速撕下。每只小鼠每天进行 2 次造模刺激，每次刺激均重复 5 次“胶带粘贴-撕下”操作，2次造模刺激的间隔时间约为 8h，造模过程连续3d。

造模后，各组小鼠给予相应护肤霜涂抹在小鼠皮肤机械屏障功能损伤处，0.3g/只，轻轻按摩至吸收，连续5d。末次涂抹后24h，观察玉竹石斛护肤霜对屏障功能受损模型小鼠皮肤组织的修复作用，检测各组皮肤水分比例、油分比例、表皮厚度及神经酰胺含量，并进行皮肤组织形态学观察。

在曲靖市陆良县，食用菌产业一直都是地方经济发展的润滑剂。经过多年的持续发力，2017年全县生产面积已达204万平方米，产量15.9万吨，产值更是达到5.4亿元，形成了以马街、三岔河镇为重点，其他乡镇零星种植的生产格局。

末次涂抹后24h，取各组背部皮肤，用福尔马林固定，并将各组织固定、切片并染色，进行病理组织学检查。将切片置于正置显微镜下，随机选取一个视野，平行测量表皮厚度5次取平均值。

采用SPSS 24.0统计软件分析。计量资料采用均数±标准差（X±S)表示。两组数据若服从正态分布和方差齐性，采用成组t检验；若不满足方差齐性，可用t’检验,P＜0.05为差异有统计学意义。在正态性不满足的条件下，采用非参数检验。

末次涂抹后24h，采用RBX-916智能数显多功能皮肤检测仪测定小鼠背部皮肤的水分、油分比例（根据设备测试工作原理，其油份是根据水分油分比例换算出来的）。检测环境：室温22℃-25℃，空气相对湿度50%-60%。检测时使仪器与皮肤完全接触，并保持垂直。同一测试部位重复3次取平均值。

末次涂抹后24h，取各组背部皮肤，制备匀浆。参照试剂盒说明书的操作步骤，分别检测各组小鼠受损皮肤组织的神经酰胺含量。

开展全域旅游的地理基础是拥有足够的地域尺度和资源丰度。山西沿黄地区共包括19个县（市），涉及国土面积28675平方千米，地域宽广，地貌类型多样，峡谷、高原、山地、平原交相辉映，景点众多（见表1），拥有拓展养生休闲、体育探险等旅游产品的资源基础。山西沿黄地区还富集人文旅游资源，如表1所示，历史文化、红色文化、民俗风情[11]、工农业等旅游资源类型丰富、特色鲜明且地域组合多样。

首先,将对比组的所有病患进行子宫按摩和注射药物以进行治疗,并观察其状况,若病患的状况没有改善,将对照组的病患进行宫腔填塞手术。手术前需要将治疗所要用的纱布进行消毒,并将纱布裁成长度为2厘米,宽度为7厘米的条状,再对病患进行填塞处理,手术者在治疗过程中,应该将子宫在腹部做好固定处理,然后再实施填塞操作,填塞时应注意不能出现死腔,填塞需要使用卵圆钳。手术者应该将纱布条压住,并将其均匀的填入,手术者要时刻关注病患是否出现大出血状况,如果大出血则需要及时采取急救措施,以防病患在手术过程中危及生命。

结果

01 对小鼠背部皮肤状态影响

02 对皮肤水分及油分比例的影响

与模型组相比，高、低剂量组的皮肤油分比例显著升高（P＜0.001）。

如图1所示，泳道2、5、8、11分别是4种芋螺毒腺的DNA，其条带清晰、完整和无拖尾现象；其A260/A280值在1.80～2.00，表明芋螺的基因组DNA纯度符合PCR扩增要求，且能够从200 mg毒腺中提取约9.2 μg DNA；泳道1、4、7、10分别是4种芋螺毒管的DNA，其条带部分明亮，存在降解现象，有少量的RNA片段存在；泳道3、6、9、12分别是4种芋螺的肌肉组织，其条带也是部分明亮，但蛋白含量较多。根据上述结果，毒腺基因组DNA含量最高，其次为毒管，肌肉组织最少。因此，提取芋螺毒腺基因组DNA的纯度和产率均能够符合ITS-PCR扩增的基本要求。

与正常组相比，模型组小鼠皮肤油分比例明显降低（P＜0.05）。

与正常组相比，模型组小鼠皮肤水分比例明显上升（P＜0.001）。与模型组相比，高剂量组、低剂量组水分比例均显著降低（P＜0.01; P＜0.05），皮肤组织液渗出减少。

03 对皮肤组织形态学的影响

正常组小鼠表皮组织结构完整，无明显异常。模型组小鼠角质层出现破坏脱落，表皮层增厚明显，棘层肥厚向下突起；真皮层胶原纤维排列紊乱、疏密分布不均，大量炎症细胞浸润。

高剂量组角质层完整，表皮厚度较模型组减小，真皮层胶原纤维排列接近正常，无炎症细胞浸润；低剂量组角质层少量破坏，较完整，表皮厚度与模型组接近，真皮层胶原纤维排列接近正常，有炎症细胞浸润。

04 表皮厚度

与正常组相比，模型组表皮增厚明显（P＜0.01）。与模型组相比，高低剂量组可减少表皮厚度(P＜0.05),而基质组虽然能够减少表皮厚度，但差异无统计学意义（P＞0.05）。

05 神经酰胺含量

与正常组相比，模型组神经酰胺含量明显降低（P＜0.001）。与模型组相比，各干预组小鼠表皮神经酰胺含量均有升高，其中以高剂量干预组呈显著性差异（P＜0.001）。

讨论

角质层作为皮肤最外层结构，主要由角质形成细胞及细胞间脂质组成，在皮肤屏障中起主要作用

。其中细胞间脂质主要组成是神经酰胺。神经酰胺在屏障功能受损相关疾病中表达失衡，是评价皮肤屏障功能的一个重要指标

。表皮屏障结构及功能受损可使外界刺激物及过敏原进入人体，从而引发各种皮肤病

。

1)圈定防冲重点区域。某矿在2个时间段内高能微震事件的平面分布结果如图6所示，图6a为307和409工作面同时开采的情况，此时高能微震事件主要集中在307和409工作面之间的20 m区段煤柱区，超前工作面越200 m。这个区域也是需要重点防范的区域，需要开展卸压工程和人员管理。图6b为307工作面单独开采时的情况，此时高能微震事件发生明显转移到307回风巷超前工作面300 m范围内，防范重点也应及时调整。

玉竹、石斛是我国常见中药，近年来在功效性护肤领域的应用受到广泛关注。有研究表明，石斛发酵液具有抗氧化、抑制酪氨酸酶活性

，水提液具有防止光老化作用

，极具开发成功能性化妆品的潜力

。为了进一步探究其他可能的功效，本研究采用胶带法制备小鼠机械屏障障碍模型，用于评价玉竹石斛护肤霜屏障修复作用。实验表明，与正常组相比，模型组小鼠皮损处具有明显渗血点，受损皮肤出现组织液渗出现象，检测结果显示水分比例提高、油分比例减少、表皮厚度增加、神经酰胺含量降低。玉竹石斛护肤霜能够改善小鼠皮损症状，减轻皮肤组织液渗出而降低水分比例，提高油分比例，减少表皮厚度，提高神经酰胺水平，促进皮肤屏障恢复。

综上所述，玉竹石斛护肤霜对受损皮肤屏障具有修复作用，其机制可能与增加角质层中的神经酰胺含量有关。本研究将传统口服中药进一步开发成外用制剂，为中医药在功效性护肤品领域的应用提供新的思路。

[1] DeVore Stanley B,Gonzalez Tammy,Sherenian Michael G et al.On the surface: Skin microbial exposure contributes to allergic disease.[J] .Ann Allergy Asthma Immunol, 2020, 125: 628-638.

[2]Roesner Lennart M,Heratizadeh Annice,Barrier defect in atopic dermatitis - possibilities and limits of basic skin therapy.[J] .Allergol Select, 2021, 5: 287-292.

[3] Ashley S E,Tan H-T T,Vuillermin P et al.The skin barrier function gene SPINK5 is associated with challenge-proven IgE-mediated food allergy in infants.[J] .Allergy, 2017, 72: 1356-1364.

[4] Suzuki Yusuke,Kodama Motohiro,Asano Koichiro,Skin barrierrelated molecules and pathophysiology of asthma.[J] .Allergol Int,2011, 60: 11-5.

[5] Ho Jessica S S,Li Carmen H,Wang Ami et al.It is no skin off my nose: The relationship between the skin and allergic rhinitis.[J] .Ann Allergy Asthma Immunol, 2021, undefined: undefined.

[6]李璨宇,纳猛,马颖等.中医药修复皮肤屏障功能受损的研究进展[J].云南中医中药杂志,2021,42(08):94-98.

[7]周倩仪.241例原发性干燥综合征患者证治规律研究[D].广州中医药大学,2018.

[8]孙恒,胡强,金航等.铁皮石斛化学成分及药理活性研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2017,23(11):225-234.

[9]孟庆龙,崔文玉,刘雅婧等.玉竹的化学成分及药理作用研究进展[J].上海中医药杂志,2020,54(09):93-98.

[10]孙晓菲,杨皓然,方凯等.参苓白术散对有皮肤机械屏障障碍小鼠皮肤屏障功能的影响[J].中国皮肤性病学杂志,2016,30(04):406-408+414.

[11] Lee Ai-Young,Molecular Mechanism of Epidermal Barrier Dysfunction as Primary Abnormalities.[J] .Int J Mol Sci, 2020, 21:undefined.

[12] Uchida Yoshikazu,Park Kyungho,Ceramides in Skin Health and Disease: An Update.[J] .Am J Clin Dermatol, 2021, undefined:undefined.

[13] Meckfessel Matthew H,Brandt Staci,The structure, function, and importance of ceramides in skin and their use as therapeutic agents in skin-care products.[J] .J Am Acad Dermatol, 2014, 71: 177-84.

[14]Tsakok T,Woolf R,Smith C H et al.Atopic dermatitis: the skin barrier and beyond.[J] .Br J Dermatol, 2019, 180: 464-474.

[15]Lin Yuanyuan,Yang Ting,Shen Luoyi et al.Study on the properties of Dendrobiumofficinale fermentation broth as functional raw material of cosmetics.[J] .J Cosmet Dermatol, 2021, undefined:undefined.

[16] Li He,Qian Liu-Qing,Chen Xue et al.[Preventive effect and mechanism of ultrafine powder of Dendrobium candidum on photoaging model mice].[J] .Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 2019, 44:4677-4684.

[17] Wang Yue-Hu,Traditional Uses and Pharmacologically Active Constituents of Dendrobium Plants for Dermatological Disorders: A Review.[J] .Nat Prod Bioprospect, 2021, undefined: undefined.