CK19、Ki67、CK7在肝细胞癌组织中的表达

周锦宏 崇杨

原发性肝细胞癌(HCC)发病初期不易被察觉，确诊时多处于中晚期，难以根治，因此早期筛查十分必要[1]。近年来临床对肿瘤的研究逐渐从生理层面深入至基因遗传组学、细胞信号传导和分子生物学，肿瘤相关蛋白特异性免疫组织染色逐渐应用于评估肿瘤发生和预后[2]。HCC患者体内含有少量卵圆细胞，其既可分化表达为甲胎蛋白，又可表达细胞角蛋白19(CK19)和细胞角蛋白7(CK7)，增殖细胞核抗原(Ki67)参与调控血管新生、肿瘤细胞增殖，已有研究发现CK19、CK7、Ki67与肿瘤发生、发展和预后具有较大关联[3-4]。本研究分析HCC患者癌组织及不同病理特征中CK19、Ki67、CK7表达情况，探讨其临床意义。

资料与方法

一、一般资料

选取泰州市第二人民医院2016年3月至2018年3月65例HCC患者作为研究对象，年龄(62.5±6.2)岁；男38例，女27例。TNM分期[5]：Ⅰ～Ⅱ期23例，Ⅲ～Ⅳ期42例；组织分化：低分化41例，中/高分化24例；肿瘤大小为(4.26±2.16)mm；淋巴结转移30例；被膜浸润29例。纳入标准：①符合HCC诊断标准[6]，并经病理检查确诊；②对象均知情同意。排除标准：①合并晚期肝病(肝功能衰竭、肝腹水等)；②合并其他重要脏器损伤；③凝血功能障碍；④伴有其他肿瘤；⑤弥散性肝癌。本研究获院医学伦理委员会批准。

二、方法

将所有标本组织制成4 μm切片，行苏木素-伊红染色和免疫组化染色。采用 Leica BOND全自动免疫组化及原位杂交染色，CK19、Ki67、CK7试剂为仪器配套试剂，CX41光学显微镜(日本Olympus)。染色结果判断：CK19、CK7表达于肿瘤细胞质，Ki67表达于肿瘤细胞核，阳性细胞呈浅黄色至棕黄色颗粒。400倍光镜下随机抽取5个视野，每视野至少对100个细胞计数，计算阳性占比，细胞阳性率<10%诊断为阴性；细胞阳性率≥10%诊断为阳性。出院患者随访3年，每半年1次。

三、统计学方法

采用SPSS 22.0软件进行统计学分析。计数资料以(%)表示，组间行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、癌组织和癌旁组织中CK19、Ki67、CK7表达

癌组织中CK19、Ki67、CK7阳性检出率较癌旁组织中高(P<0.05)。见表1。

表1 癌组织和癌旁组织中CK19、Ki67、CK7表达对比[份(%)]

二、不同临床病理特征HCC患者CK19、Ki67、CK7阳性检出率比较

不同年龄、性别、肿瘤大小患者的CK19、Ki67、CK7阳性检出率对比差异无统计学意义(P>0.05)；TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、组织低分化、淋巴结转移、有被膜浸润患者CK19、Ki67、CK7阳性检出率较高(P<0.05)。见表2。

表2 不同临床病理特征HCC患者CK19、Ki67、CK7阳性检出率比较[例(%)]

三、HCC患者3年预后

对所有患者随访3年，两组均无失访者，3年后CK19阳性、CK19阴性死亡各17例、5例，存活率：34.52%(9/26)、87.18%(34/39)，差异明显(χ2=19.250，P<0.01)；Ki67阳性、Ki67阴性死亡各20例、2例，存活率：58.33%(28/48)、88.24%(15/17)，差异明显(χ2=4.767，P=0.029)；CK7阳性、CK7阴性死亡各19例、3例，存活率：58.70%(27/46)、84.21%(16/19)，差异明显(χ2=3.910，P=0.048)。

讨 论

HCC以男性多发，全球范围内每年新增HCC约有78万例，HCC多发生于亚洲，我国HCC发生率约占全球50%[7]。HCC极易发生广泛转移，使治疗难度和患者死亡风险增加，早期筛查并及时治疗是提高HCC生存率的重要措施[8]。肿瘤的发生发展是多种基因作用的结果，随着近年来临床对肿瘤遗传学方面的深入研究，各种新的肝癌血清标志物逐渐在临床推广应用，这些标志物为临床诊断、靶向治疗提供依据[9-10]。

本研究中，癌组织中CK19、Ki67、CK7阳性检出率较癌旁组织中高，且其表达与肿瘤分期、组织分化、淋巴结转移、被膜浸润密切相关。CK共30种基因型，位于上皮细胞及以上皮为来源的肿瘤细胞骨架系统，对维持细胞完整性及连续性具有重要作用，在上皮源性类肿瘤中多表达为阳性[11-12]。CK7具有调控肿瘤转移的作用，其阳性表达会促进肿瘤转移，因此CK7阳性患者病灶为恶性可能性大大提高；CK19参与保护抗体的生成、肿瘤细胞增殖、转移[13]。CK7和CK19多在低分化的HCC中呈阳性，辅助肿瘤发生和发展，CK7、CK19阳性的肝癌恶性程度高，患者预后差[14]。

Ki67是一种核抗体，细胞周期不同Ki67表达差异明显，一般情况下Ki67阳性率越高，其肿瘤分期越晚，肿瘤为恶性可能性越大，患者肿瘤的组织分化、转移、被膜浸润等方面会往肿瘤恶性趋势发展[15-16]。本研究中，CK19、Ki67、CK7阳性HCC患者3年生存率较阴性患者低。

综上，HCC患者肿瘤组织中CK19、Ki67、CK7阳性表达率高，CK19、Ki67、CK7阳性患者肿瘤恶性程度相对较高。