MMP-3、Anti-CCP抗体、RF在类风湿关节炎患者中的表达及与免疫功能相关性

袁秀兰

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以滑膜炎和免疫功能紊乱为主要表现的自身免疫系统疾病，病因尚未明确[1]。患者可在发病2年内出现骨关节破坏，严重的可出现坏死甚至残疾，严重影响患者正常生活[2]。临床上针对RA的诊断主要依靠患者临床体征、影像学检查及血清学检测等手段综合考虑。由于患者临床表现复杂多样，加上缺乏特异性较强的有效指标，导致患者早期诊断不及时，错过了最佳干预时机，影响了治疗效果。因此，早期诊断、及时干预对RA患者提高治愈率十分重要。类风湿因子（rheumatoid factors，RF）的发现很大程度上提高了RA的诊断效率，但仍有部分患者血清中无法检测到RF[3]。基质金属蛋白酶 -3（matrix metalloproteinase 3，MMP-3）可以反映RA患者疾病的活动情况，在轻度活动期即可明显上升[4]。抗环状瓜氨酸（Anti-cyclic citrullinated peptide，Anti-CCP）抗体水平与RA患者血清中的多种炎症因子密切相关，对炎症反应起到促进作用[5]。本研究主要观察MMP-3、Anti-CCP抗体、RF在RA患者中的水平变化，分析其与免疫功能的相关性，旨在为RA的诊疗工作提供参考依据，具体结果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性收集2021年1-12月在咸宁市第一人民医院进行住院治疗的RA患者105例作为观察组，纳入标准：（1）初次就诊且符合文献[6]《类风湿关节炎诊疗规范》中关于RA的诊断标准；（2）临床资料完整，依从性高。排除标准：（1）合并其他免疫系统疾病；（2）既往有服用免疫抑制剂或者激素类药物史；（3）合并恶性肿瘤；（4）重要脏器功能障碍；（5）精神疾病史。患者年龄30～70岁，平均（55.12±6.87）岁；其中男30例，女75例；根据28处关节疾病活动度（DAS28）评分进行分组，DAS28评分＜2.6分纳入缓解组，共45例，DAS28评分≥2.6分纳入活动组，共60例。同期收集体检中心健康体检者100例作为对照组，年龄30～70岁，平均（54.97±6.90）岁；其中男28例，女72例。两组研究对象的一般资料进行比较，差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性。本研究经医院伦理委员会批准通过。

1.2 方法

所有研究对象空腹抽取静脉血3 ml，注入无添加剂促凝管中，静置 30 min，以 3 000 r/min 的速度离心10 min，分离上层血清保存于-80 ℃超低温冰箱中。MMP-3、Anti-CCP抗体采用酶联免疫吸附的方法进行检测，酶标仪为美国Biotek EXL-800酶标仪；RF采用贝克曼IMMAG800全自动生化分析仪及其配套试剂盒进行检测。所有操作严格按照试剂盒说明书进行，室内质控、阴阳对照均在控。

1.3 观察指标

观察所有研究对象的血清MMP-3、Anti-CCP抗体、RF水平及免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平。比较各组研究对象的MMP-3、Anti-CCP抗体、RF水平，分析其对类风湿关节炎患者的诊断价值。比较类风湿关节炎患者活动组和缓解组MMP-3、Anti-CCP抗体、RF及免疫功能指标（IgA、IgM、IgG）水平差异，分析各指标间的相关性。

1.4 统计学处理

采用SPSS 21.0统计学软件对所有数据进行分析，计量资料以（±s）来表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。采用ROC曲线分析诊断效能，利用Pearson相关性分析各指标间的关系。

2 结果

2.1 观察组和对照组MMP-3、Anti-CCP抗体、RF水平比较

观察组患者MMP-3、Anti-CCP抗体、RF水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 观察组和对照组MMP-3、Anti-CCP抗体、RF水平比较（±s）

表1 观察组和对照组MMP-3、Anti-CCP抗体、RF水平比较（±s）

RF（IU/ml）组别 MMP-3（ng/ml）Anti-CCP抗体（U/ml）观察组（n=105） 495.48±92.37 125.46±31.57 98.53±18.29对照组（n=100） 112.58±30.48 12.95±3.09 16.44±2.83 t值 40.83 36.06 39.81 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 MMP-3、Anti-CCP抗体、RF对类风湿关节炎患者的诊断价值

绘制MMP-3、Anti-CCP抗体、RF对类风湿关节炎患者的ROC曲线，结果显示，联合检测的曲线下面积（AUC）为0.840，敏感度和特异度可达到82.0%、70.1%，均高于MMP-3或Anti-CCP抗体或RF单项检测，进一步提高了诊断效能，见表2和图1。

表2 MMP-3、Anti-CCP抗体、RF对类风湿关节炎的诊断价值

2.3 活动组和缓解组MMP-3、Anti-CCP抗体、RF及免疫功能指标比较

活动组患者的MMP-3、Anti-CCP抗体、RF及IgA、IgM、IgG水平明显高于缓解组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 活动组和缓解组MMP-3、Anti-CCP抗体、RF及免疫功能指标比较（±s）

表3 活动组和缓解组MMP-3、Anti-CCP抗体、RF及免疫功能指标比较（±s）

组别 MMP-3（ng/ml） Anti-CCP抗体（U/ml） RF（IU/ml） IgA（g/L） IgM（g/L） IgG（g/L）活动组（n=60） 511.89±99.04 142.47±33.58 111.53±18.29 3.06±0.52 3.06±0.52 18.06±4.12缓解组（n=45） 473.59±87.97 102.78±29.07 81.44±2.83 2.28±0.36 2.00±0.31 14.89±3.24 t值 0.84 6.80 12.02 10.23 12.94 4.28 P 值 0.402 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.4 血清MMP-3、Anti-CCP抗体、RF水平与免疫功能相关性分析

根据Pearson相关性分析的结果显示，MMP-3、Anti-CCP抗体、RF与IgA、IgM、IgG呈正相关（P＜0.05），见表4。

表4 血清MMP-3、Anti-CCP抗体、RF水平与免疫功能相关性分析

3 讨论

类风湿关节炎是临床上比较常见的一类自身免疫系统疾病，全世界发病率为0.5%～1.5%，我国发病率略低，约为0.42%[7]。RA主要表现为小关节损伤，患者早期多不出现明显的关节畸形，因此临床很难给予准确评估，从而造成漏诊、误诊的发生，影响患者预后[8]。随着对RA疾病研究的进一步深入，疾病早期的血清学标志物也逐渐成了研究的热点。

基质金属蛋白酶是导致关节损伤的因素之一，其介导的机制降解可破坏关节和软骨，与炎症因子的形成和血管周围基质降解密切有关[9]。MMP-3是基质金属蛋白酶家族的重要成员之一，由关节滑膜的成纤维细胞和软骨细胞产生，在RA早期增生的滑膜向关节软骨面生长并侵蚀关节软骨，形成血管翳[10]。研究表明，RA患者处于炎症状态，炎症因子会破坏软骨及骨质，促进成纤维细胞分泌MMP-3，导致患者血清MMP-3水平升高[11]。Anti-CCP抗体是一种环状聚丝蛋白的多肽片段，属于自身抗体，对类风湿关节炎的诊断具有较高的敏感度，常用于RA的早期诊断[12]。RF是临床上最早用于RA诊断的血清学标志物，其诊断阳性率可高达80.00%以上，但在其他结缔组织疾病、感染性疾病中有会有所表达，因此其诊断RA的特异度也存在一定不足[13]。本次研究为RA的诊断筛选了MMP-3、Anti-CCP抗体、RF 3个有效指标，结果显示这些指标在RA患者中均明显更高（P＜0.O5），与上述理论研究的结论一致，可以推测这些指标参与了RA的发生、发展。进一步绘制ROC曲线发现，三者在RA疾病诊断上均具有一定的价值，3项联合检测可进一步提高诊断效能，对疾病早期诊断具有较高的价值。

近年来，有相关研究发现，RA疾病的发展与免疫失衡相关[14]。免疫球蛋白IgA、IgG、IgM是临床常用的免疫功能指标，RA患者主要是由于体内的IgG发生了改变，刺激机体产生了相应的IgG抗体，RF因子与变性的IgG可形成免疫复合物，这种免疫复合物会在关节滑膜处积聚，激活补体从而导致慢性炎性损伤，导致类风湿关节炎的发生[15]。对RA患者根据DAS28评分分组后发现，活动组患者的MMP-3、Anti-CCP抗体、RF及IgA、IgM、IgG水平明显高于缓解组（P＜0.05）。这在王晓亮等[15]的研究中也有体现，说明这些指标与疾病的进展密切相关。根据Pearson相关性分析的结果显示MMP-3、Anti-CCP抗体、RF与IgA、IgM、IgG呈正相关（P＜0.05），再次印证了上述结果。

综上所述，血清MMP-3、Anti-CCP抗体、RF在类风湿关节炎患者中明显升高，且与患者免疫功能密切相关，联合检测有助于疾病的早期诊断。但本次研究属于回顾性研究，可能存在一定选择偏倚，待日后进行前瞻性设计、扩大样本量来佐证此次研究的正确性。