子痫前期患者血清miR-17 miR-25表达的临床意义及对妊娠结局的影响

陈志萍， 黄丽珊， 吴明秀， 陈文婷

(南方医科大学附属东莞医院/东莞市人民医院产科, 广东 东莞 523000)

子痫前期(Preeclampsia，PE)属妊娠期高血压疾病范畴，是母婴死亡的重要因素，其预防及治疗一直是产科难题[1]。近年来，研究表明，微小RNA(miRNA)参与调控PE发病进程[2]。研究表明，胎盘发育异常，尤其滋养层细胞增殖、侵袭能力不足是PE发病的重要诱因，而胎盘氧化应激可引起滋养细胞损伤，使其增殖、侵袭能力降低及凋亡增加[3]。miR-17、miR-25作用机制及功能尚不明确，据报道，miR-17对肿瘤细胞增殖、浸润、凋亡等功能都均有重要影响；miR-25作为内源性调节剂，在心血管疾病、肿瘤等疾病的氧化应激过程、促炎细胞因子调节中发挥重要作用[4]。因此，miR-17、miR-25可能在PE发病过程中也有一定作用，但目前此类研究甚少。基于此，本研究探讨PE患者血清miR-17、miR-25表达的临床意义及对妊娠结局的影响，旨在为PE防治提供参考。报道如下

1 资料与方法

1.1一般资料:选取我院PE患者74例为PE组(2018年2月至2020年8月)，同期选取正常孕产妇74例为健康组。纳入标准：孕前体健；PE组均符合PE诊断标准；均签署知情同意书。排除标准：心脏、肝肾疾病；胎儿染色体异常；多胎；甲状腺功能异常、糖尿病等内分泌系统疾病；急慢性炎症。

1.2方法:①资料收集：包括年龄、孕次、孕前体质量指数(BMI)、产次、血压、分娩孕周、新生儿出生体重。②血清miR-17、miR-25检测：采集空腹静脉血3mL，离心(时间15min，半径8cm，转速3500r/min)，取血清，提取总RNA，将RNA逆转录为cDNA，以cDNA为模板，U6为内参，检测miR-17、miR-25相对表达量。

1.3观察指标:①两组一般资料及血清miR-17、miR-25水平。②血清miR-17、miR-25水平与PE发生的关系。③血清miR-17、miR-25对PE发生的诊断价值。④不同血清miR-17、miR-25水平患者临床特征和妊娠结局。⑤血清miR-17、miR-25水平与PE患者临床特征和妊娠结局的相关性。

2 结 果

2.1两组一般资料及血清miR-17、miR-25水平:两组年龄、孕前BMI、孕次、产次比较，差异无统计学意义(P>0.05)；PE组舒张压、收缩压、血清miR-17水平高于健康组，分娩孕周、新生儿出生体重血清miR-25水平低于健康组(P<0.05)。见表1。

表1 两组一般资料及血清miR-17 miR-25水平比较

2.2血清miR-17、miR-25水平与PE发生的关系:以PE发生为因变量(否=0，是=1)，以血清miR-17、miR-25水平作为自变量(<均值赋值为0，≥均值赋值为1)，纳入Logistic回归分析模型，结果显示，血清miR-17、miR-25水平均与PE相关(P<0.05)。见表2。

表2 血清miR-17 miR-25水平与PE发生的关系

2.3血清miR-17、miR-25对PE发生的诊断价值:以PE组血清miR-17、miR-25水平作为阳性样本，以健康组血清miR-17、miR-25作为阴性样本，绘制各指标诊断PE的ROC曲线，结果显示，miR-17、miR-25诊断PE的AUC分别为0.871、0.885；应用SPSS软件的联合应用ROC理论模式，构建各指标联合诊断PE的ROC模型，结果显示，联合诊断AUC最大，为0.918。见图1、表3。

图1 ROC曲线

表3 血清miR-17 miR-25对PE发生的诊断价值

2.4不同血清miR-17、miR-25水平患者临床特征和妊娠结局:以miR-17、miR-25均值为界，<均值为低表达，≥均值为高表达。不同血清miR-17、miR-25水平PE患者舒张压、收缩压、分娩孕周、新生儿出生体重存在明显差异(P<0.05)。见表4。

表4 不同血清miR-17 miR-25水平患者临床特征和妊娠结局

2.5血清miR-17、miR-25水平与PE患者临床特征和妊娠结局的相关性:血清miR-17水平与PE患者舒张压、收缩压呈正相关，与分娩孕周、新生儿出生体重呈负相关，血清miR-25水平与PE患者舒张压、收缩压呈负相关，与分娩孕周、新生儿出生体重呈正相关(P<0.05)。见表5。

表5 血清miR-17 miR-25水平与PE患者临床特征和妊娠结局的相关性

3 讨 论

我国每100位孕妇中有3～4位患有PE，且近年来呈上升趋势，已引起社会广泛关注。长期以来对PE进行了大量研究，发现氧化压力增加及滋养细胞浸润减少在PE发展机制中起重要作用，与不良妊娠结局有关[5]。病理情况下，胎盘组织部分miRNA可调节氧化应激及滋养细胞功能，提示可能参与胎盘发育及PE发生、发展过程。

miR-17-92基因簇定位于第13号染色体上，目前，相关研究多在肿瘤方面，可调控肿瘤细胞增殖、凋亡和浸润功能。滋养细胞与肿瘤细胞增殖、浸润活性相似，因此，miR-17-92基因簇可能通过一定机制调控滋养细胞功能。miR-17是miR-17-92基因簇成员，研究显示，PE胎盘组织中miR-17呈病理性高表达[6]。但胎盘组织取材不便，而妊娠妇女血循环miRNA多源于胎盘。本研究测得PE患者血清miR-17表达显著升高，与既往研究一致。分析机制：①基质金属蛋白酶及其抑制物与滋养细胞浸润有关。研究显示，miR-17可通过靶向作用于MMP2，对胶质瘤U87细胞侵袭起到抑制作用[7]。推测miR-17可能通过调控其下游靶基因，影响滋养细胞功能，导致侵袭不足、浸润过浅，进而影响胎盘血流，引发一系列PE相关表现。②研究证实，PE与胰岛素抵抗、血管炎性反应、高脂血症密切相关，具有PE病史者日后代谢综合征发生风险明显增加[8]。miR-17可抑制小鼠胰岛素信号传导蛋白胰岛素受体激酶l(Insulin receptor substrate l，IRSl)表达，而IRSl表达降低可引起胰岛素信号无法正常传导，导致胰岛素抵抗，可能增加PE发生风险。③PE发生与自噬功能紊乱有关，PE患者胎盘组织中自噬激活，胎盘滋养层细胞自噬增强。研究表明，miR-17可调节细胞自噬。推测miR-17可能通过调控自噬、凋亡等过程参与PE发病及进展。

miR-25属于miR-106b-25家族，定位于7q22.1染色体上，参与多种疾病发生发展，如心血管疾病、糖尿病、肿瘤等[9]。目前，miR-25在PE发病机制中的作用研究较少。本研究显示，PE患者血清miR-25呈病理性高表达。相较于正常妊娠，PE患者氧化应激表达增加，循环和组织中活性氧增加[10]。结合现有研究分析可能机制是NADPH氧化酶4(NOX4)在胆固醇血症引起的氧化应激过程及促炎细胞因子介导的炎症损伤中发挥核心作用，NOX4高表达可抗机体氧化应激，而miR-25表达能靶向作用于NOX4基因非翻译区通过一系列生物学过程抑制NOX4表达，因此下调miR-25表达可增加NOX4表达实现抗氧化作用[11]。继续ROC曲线分析显示，血清miR-17、miR-25联合可提高对PE的诊断价值，临床可同时检测miR-17、miR-25，为诊断提供更全面、可靠的参考信息。另外，miR-17、miR-25表达水平与临床特征(舒张压、收缩压)和妊娠结局(分娩孕周、新生儿出生体重)相关，提示miR-17、miR-25表达水平在一定程度上还可反映疾病严重程度和临床预后，便于临床针对性完善相关干预策略。

综上可知，PE患者血清miR-17、miR-25均病理性表达，且与疾病严重程度和妊娠结局有关。本研究从转录水平揭示miR-17、miR-25与PE的关系，但仅局限在miR-17、miR-25表达水平方面的研究，未进行miR-17、miR-25与PE相关的功能性研究，仍需进一步实验验证。