强直性脊柱炎患者关节液特征分析

张红凤，郭庆昕，游主权，饶华春（泉州市正骨医院.检验科，.风湿科，福建泉州 362000）

强直性脊柱炎（ankylosing sponditis）是以脊柱和骶髂关节病变为特征的慢性进行性炎症疾病。24%～75%的强直性脊柱炎患者在疾病初期或中期出现髋关节和外周关节病变，外周关节病变多为非对称性，下肢大关节的关节炎为该病外周关节炎的特征之一［1］。关节囊肿胀及积液是强直性脊柱炎发生关节病变的重要变化。关节液是关节腔内最直接的内环境，其具体成分检查可以直观体现关节内微环境变化，能更好地提示强直性脊柱炎患者的局部组织炎症病变，也能反映外周关节炎的疾病活动。正常情况下，关节液中的成分大多比血液中低，但在病理情况下，许多具有阳性预示值的关键成分发生急剧改变［2］。目前，对强直性脊柱炎患者的关节液理学研究特征研究较少。本研究主要观察并分析强直性脊柱炎患者的关节液特征，为其治疗提供依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2015年1月至2020年12月泉州市正骨医院确诊的强直性脊柱炎患者88 例为研究对象，其中男63 例，女25 例；年龄12 ～63 岁，平均33.7岁。人类白细胞抗原（HLA）-B27 检查阳性率87.5%，X 线或CT 检查显示骶髂关节炎84例，膝关节彩超显示膝关节肿胀、滑膜增生78例。

1.2 主要仪器与试剂 Eclipse E100 普通显微镜（日本尼康公司），DMLB2偏振光显微镜（德国莱卡公司），BC6900全自动血液体液细胞计数分析仪及其配套试剂、质控品（深圳迈瑞公司），7180 生化仪及其配套试剂、质控品（日本日立公司），瑞氏-姬姆萨染色试剂（深圳贝索公司）。

1.3 标本采集与处理 由临床医生在无菌操作下采集患者膝关节液。关节液分3管，第1 管用于微生物检查；第2管用EDTA-K2抗凝，用于白细胞计数；第3管，400×g离心力离心10 min，取上清液进行生化免疫检测，沉渣用于形态学检查。

1.4 实验方法

1.4.1 一般性状检查 （1）颜色与送检量：在光线充足的背景下观察关节腔积液颜色与送检刻度量。（2）透明度：透过装有关节腔积液的试管是否可看清楚置于试管对侧纸片上的字迹，可看清的为透明，反之为不透明。（3）粘稠度：采用“拉丝试验”，拉丝长度高于2 cm 则为粘稠。（4）黏蛋白凝集试验：在盛有20 mL 5%冰醋酸的小烧杯中加入几滴关节腔积液，轻轻摇晃，观察结果（良好：形成球状或块状物；欠佳：形成松散较大的凝集块；不良：未形成凝块）。

1.4.2 白细胞计数 采用迈瑞6900全自动血细胞分析仪体液模式进行白细胞计数。

1.4.3 形态学检查 取离心后关节液沉渣充分混匀，制作2张涂片，分别为有尾和无尾涂片，采用瑞氏-姬姆萨染色。显微镜检查在低倍镜下捕捉可疑形态，在油镜下确认。在有尾涂片的“海岸线”查找分布完整的大细胞。在无尾涂片的无尾区查找成团的细胞、成簇状的结晶及大细胞等。计数100 个有核细胞，报告各类细胞的百分比。另将沉渣涂抹成厚涂片，用偏振光显微镜查找结晶，用阳性对照质控片观察偏振光检测效果。

1.4.4 生化检查 采用日立7180 生化仪检测葡萄糖、总蛋白、尿酸、类风湿因子、C 反应蛋白、腺苷脱氨酶。

1.5 统计学分析 用SPSS 22.0 统计软件进行。计量资料用M（P25，P75）表示，组间比较采用Mann-Whitney U检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般性状特征 88例强直性脊柱炎患者的关节液外观浑浊占比98.8%（87／88），异常颜色变化（淡红色、红色、黄色等）占63.2%（56／88），黏稠度降低 占88.6%（78／88），检 出 凝 块 占26.13%（23／88），检出红细胞占81.8%（72／88），检出结晶占12.5%（11／88），黏蛋白凝集试验阴性（即凝块形成不良）占80.6%（71／88）。

2.2 白细胞计数和生化指标特征 88例强直性脊柱炎患者关节液白细胞计数中位数为19.89×109／L，高于外周血白细胞数中位数8.60×109／L（Z ＝-5.010，P＜0.05）；总蛋白中位数为47.70 g／L，低于外周血水平（Z ＝-9.274，P＜0.05）；尿酸中位数为285.50 μmol／L，较同期血清尿酸水平稍低（Z ＝-2.911，P＜0.05）；关节液葡萄糖、类风湿因子和腺苷脱胺酶中位数分别为5.26 mmol／L、6.10 U／L 和20.37 U／L。见表1。

表1 88例强直性脊柱炎患者关节液与外周血检测结果

2.3 形态学特征 88例强直性脊柱炎患者关节腔积液有形成分可见软骨素背景，中性粒细胞占比76.5%（64.25%，86.00%），淋巴细胞占比12.0%（5.00%，22.75%），与外周血中性粒细胞、淋巴细胞占比大致相同；单核-巨噬细胞占比7.0%（3.00%，15.00%），其胞体较大且不规则，胞质呈泡沫样，胞核不规则，常偏位。滑膜细胞形态多样与浆膜腔间皮细胞相似，胞体大，圆形，胞质丰富，淡蓝色，含有大小不等的空泡和紫红色颗粒，细胞核规则，染色质致密，可见小核仁（图1）。赖特细胞为单核巨噬细胞吞噬了变性的中性粒细胞或吞噬了1 ～3 个的嗜碱性物质（图2），88例关节液中赖特细胞阳性率为28.4%（25／88）。

图1 强直性脊柱炎关节腔积液瑞氏-吉姆萨染色查见滑膜细胞（×1 000）

图2 强直性脊柱炎关节腔积液瑞氏-吉姆萨染色查见赖特细胞（×1 000）

2.4 赖特细胞阳性组与阴性组的比较 以是否检出赖特细胞分组，赖特细胞阳性组白细胞计数和总蛋白均高于阴性组（P 均＜0.05），其他指标差异均无统计学意义（P均＞0.05），见表2。

表2 赖特细胞阳性组与赖特细胞阴性组关节液检查结果比较

3 讨论

关节腔由位于关节表面的软骨和周围的滑膜所组成。滑膜没有基底层或上皮细胞，但有丰富的血管网，靠近更浅表的滑膜内衬细胞的毛细血管有孔，具有分泌功能，血浆经毛细血管网过滤后扩散到关节腔，加上滑膜细胞合成的透明质酸、糖蛋白等，共同构成成分复杂、外观类似蛋清（淡黄色、透明、黏稠）的关节液，具有关节润滑、滑膜营养、关节清洁和防御等作用。

强直性脊柱炎以脊柱和骶髂关节病变为特征。当炎症进一步进展，累及外周关节，特别是膝关节时，关节腔内滑膜内衬细胞的毛细血管通透性增加，滑膜细胞分泌透明质酸含量减少，关节液量明显增多，同时关节内炎症反应促使中性粒细胞、单核吞噬细胞进入关节腔，释放的溶酶体活性增高，使透明质酸降解增加［3］。因此，强直性脊柱炎患者关节液外观为淡黄色到淡红色、浑浊、黏稠度降低，黏蛋白凝集试验不良。与类风湿性关节炎、化脓性关节炎、痛风性关节炎急性发作等高炎症反应性关节炎的关节液［4-5］相比，本研究发现强直性脊柱炎患者关节白细胞计数中位数为19.89×109／L，中性粒细胞百分比为78.0%，因此倾向于本病为中炎症反应性关节炎。

赖特细胞由已脱颗粒死亡的中性粒细胞完全分解后被单核吞噬细胞吞噬后形成。赖特细胞常见于赖特综合征，其具有关节炎、尿道炎、结膜炎三联症，赖特综合征与HLA-B27 具有强相关性［7］。本研究在强直性脊柱炎患者赖特细胞阳性组，其HLA-B27阳性率为88%，HLA-B27 阴性的强直性脊柱炎患者关节液中赖特细胞检出率仅有18%。赖特细胞阳性组中白细胞计数和总蛋白明显升高，提示赖特细胞阳性强直性脊柱炎时关节炎症严重程度更高。

强直性脊柱炎患者关节液生化分析中其尿酸及类风湿因子水平未见升高，可明显区别于痛风性关节炎和类风湿性关节炎，总蛋白和腺苷脱氨酶水平升高，结合高白细胞数，明确提示炎症性关节炎的存在。关节液中蛋白质高低可反映关节炎症的程度，当关节出现炎症时，由于血液流动性增加及通透性能力改变，会有许多大分子量的蛋白质进入关节液中，使得关节液中蛋白质浓度升高［7］。腺苷脱氨酶是腺苷的水解酶，可通过催化腺苷的降解调控免疫反应和炎症过程［8］，高水平的腺苷脱氨酶可以加剧炎症反应，反映炎症的严重性，并在某种程度上参与了关节部位软骨组织的损伤［9-10］。