VEGF对冻融胚胎移植妊娠结果的预测及其影响因素分析

田国华，武 雁，宋 晖，滑 玮，李胜男，张建芳

(空军军医大学第一附属医院妇产科，陕西 西安 710032)

在过去的三十年中，冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer，FET)已被广泛使用，成为体外受精(in vitro fertilization，IVF)和胚胎移植的重要技术之一。胚胎植入是决定FET是否成功的最关键步骤之一。造成植入失败的原因有多种，主要包括配子/胚胎因素及子宫因素。子宫内膜血管生成是成功妊娠的先决条件。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是调节血管生成的最重要因素之一，这提示VEGF在围着床植入期中起着至关重要的作用[1]。基于此，本研究观察血清VEGF的变化与FET妊娠结局的相关性，并评估可能的潜在影响因素。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2020年4月至11月在空军军医大学第一附属医院生殖中心接受FET的147例患者为研究对象。纳入标准：①年龄≤39岁；②月经周期规律，周期27～32天；③3个月内无激素使用史；④基础内分泌正常。排除标准：①因各种因素不参与或退出移植治疗；②排除多囊卵巢综合征、子宫内膜异位症、肿瘤等。

妊娠的诊断标准：胚胎移植后28天行阴道超声检查见妊娠囊及胎芽、原始心管搏动或刮宫见绒毛者，诊断为妊娠。按妊娠结局将147例FET患者分为两组：妊娠组88例，年龄(30.47±5.33)岁，不孕年限(3.72±2.52)年；非妊娠组59例，年龄(31.66±4.76)岁，不孕年限(4.27±4.08)年。本研究严格遵守涉及人体受试者的《赫尔辛基医学研究宣言》，并在研究前获得了每个研究对象的知情同意。

1.2标本采集及监测指标

于FET周期中的月经第2天、移植日、移植14天后分别采集静脉血2mL，标本采集后均立即离心分装至-4℃保存待检测。监测指标：转化日内膜厚度、基础血清性激素。检测方法：采用化学发光法测定。主要试验试剂：血管内皮生长因子试剂盒。

1.3统计学方法

2结果

2.1两组一般资料比较

两组患者年龄、不孕年限、体质量指数(body mass index，BMI)、转化日内膜厚度等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组一般资料比较

2.2血清VEGF水平在不同时间的表达水平比较

妊娠组在移植日、移植14天后血清VEGF水平呈上升趋势，且均高于非妊娠组，差异有统计学意义(t值分别为9.75、18.48，P<0.05)，见表2。

表2 两组血清VEGF水平在不同时间的表达水平比较

2.3年龄、BMI与血清VEGF水平相关性分析

移植日及移植14天后，妊娠组血清VEGF水平与年龄、BMI呈显著负相关(r值分别为-0.728、-0.822、-0.730、-0.769，P<0.05)，非妊娠组血清VEGF水平也与年龄、BMI呈显著负相关(r值分别为-0.361、-0.538、-0.661、-0.542，P<0.05)，见表3。

表3 两组年龄、BMI与血清VEGF水平相关性分析(r)

3讨论

目前VEGF被认为是最重要的雌激素反应性血管原因子之一[2]，可以调节人体子宫内膜血管生成、增殖和分泌。VEGF家族由多种亚型组成，包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D和胎盘生长因子(placental growth factor，PGF)[3]。其中，VEGF-A刺激血管内皮细胞的增殖和迁移，用于血管结构的产生和维持[4]。

3.1 VEGF与胚胎种植关系

胚胎植入是决定IVF治疗成功与否的最关键步骤之一[5]。Licht等人2003年的一项研究调查了月经周期中子宫内VEGF-A的浓度，发现该浓度从胚胎植入期开始显著增加。近年也有研究发现，在子宫内膜的基质区室中，胚胎与母体循环紧密联系，且发现在成功妊娠的妇女中，VEGF-A的表达明显更高，推断出血管生成不足与植入障碍有关[6-7]。

关于VEGF能否影响胚胎着床，在对其预测胚胎的早期种植及妊娠结局方面，目前研究结果尚不一致。本研究发现，FET治疗后妊娠组和未妊娠组在种植的不同时间段血清VEGF水平存在显著差异。在妊娠组中，血清VEGF水平从移植当日增加到第14天，并且在第14天时高于非妊娠组。这些结果表明VEGF可能影响胚胎的着床，与Ntala等[8]的相关报道一致。但与Hafner等[9]研究结果相反，可能的原因为在这项研究中，作者使用的是自然IVF周期模型，推测外源性激素的使用可能诱导细胞因子和趋化因子的释放，从而导致内皮通透性增加。

3.2 VEGF与年龄、BMI关系

本研究进一步评估了血清VEGF水平与种植潜在影响因素的相关性，结果表明，患者年龄、BMI与FET后血清VEGF水平呈显著负相关，这与既往研究结果一致[10]。随着年龄的增长，血管生成会出现变化，VEGF与孕产妇年龄呈负相关，而且体重过轻或超重都会对生殖产生不利影响。推测BMI和年龄可能通过降低VEGF表达，从而导致低的种植率和高的流产率。提示在之后的临床工作中，应重视患者的年龄、BMI等临床特征，并根据这些特征调节胚胎植入过程，增加妊娠的成功率。

此外，本研究存在一定的局限性。研究初始拟选取172名女性进行FET，但其中有25名女性因多种因素未能移植，所以样本量相对较少，但即使样本量较少，两组之间的差异性结果也很显著，为提高胚胎种植成功率提供了方向和线索，提示之后可增加样本量进一步深入研究。

综上所述，本研究通过调查FET患者血清中的VEGF，表明FET治疗后妊娠和未妊娠的患者在种植前后血清VEGF水平存在显著差异。与非妊娠组相比，妊娠组患者的血清VEGF水平明显较高，在移植14天后妊娠组血清VEGF水平约比非妊娠组高2～3倍。另外，临床特征因素(年龄和BMI)与VEGF的浓度显著相关，VEGF的浓度随着年龄、BMI的增加而显著降低。建议未来可开展多中心大样本研究进一步探索证实，用以了解植入和母体血管生成的基础机制，通过可能的干预措施来改善胚胎移植的结果。