2019—2021年邵阳市H5和H7亚型高致病性禽流感免疫效果评估统计与分析

刘桂喜，胡辉灿，方 琼，文银容，邓 辉，唐杰华，张金梁，孙 瑜※

（1.邵阳县动物疾病预防控制中心，湖南 邵阳 422000；2.邵阳市动物疾病预防控制中心，湖南 邵阳 422000）

禽流感（Avian influenza,AI）是由禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）引起的一种以感染禽类为主的急性、热性、高度接触性传染病，禽流感病毒属正黏病毒科，A型流感病毒属。根据病毒对禽类的致病性不同，可分为高致病性禽流感和中、低致病性禽流感。迄今为止，高致病性禽流感（HPAI）都是由H5和H7血清亚型引起的，我国H5亚型HPAI病毒中有H5N1和H5N6两种流行亚型；H7N9亚型HPAI感染病例仍有散发,但总体发病率显著下降[1-2]。除此以外，禽流感还具有公共卫生学意义，世界动物卫生组织（OIE）将HPAI列为A类疫病，我国将其列为一类动物疫病，进行强制免疫。自1997年香港暴发禽流感起，陆续有HPAI直接从禽类传染人并引起死亡的报道，自此以后该病引起了世界各国的高度重视。随着现代养禽业的迅速发展及食品安全意识的不断提升，如何科学有效地防控禽流感成为了目前区域性官方兽医机构的工作重点。本次研究收集了邵阳市各县市区2019年至2021年的鸡、鸭血清样本进行检测并分析，以系统评估邵阳市H5和H7亚型高致病性禽流感的强制免疫工作，现将结果分析如下。

1 材料与方法

1.1 样品来源及免疫背景介绍

分别于2019年、2020年和2021年春季三个时间段采集春季集中防疫且免疫注射20d以上的家禽血清，监测样本覆盖邵阳市各地区共计127个规模养禽场的1230份禽血清样本，见表1。2019年和2020年邵阳地区免疫的禽流感疫苗毒株为重组禽流感病毒三价灭活苗（H5N1Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株），2021年邵阳地区免疫的禽流感疫苗毒株为重组禽流感病毒三价灭活苗（H5N1Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re3株）。

表1 2019—2021年春季集中检测家禽采样汇总

1.2 主要试剂

禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原与阴、阳性血清（Re-12株）；H7亚型血凝抑制试验抗原与阴、阳性血清（Re-2株），用于检测2019年和2020年H7禽流感亚型血清抗体；H7亚型血凝抑制试验抗原与阴、阳性血清（Re-3株），用于检测2021年H7禽流感亚型血清抗体；均购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司；自制1%鸡红细胞悬液：采集健康并未免疫的成年公鸡血液，加入十分之一的抗凝剂，用0.1MPBS液反复洗涤3次，1000r/min离心5min，洗涤后用PBS配成1%的红细胞悬液，4℃保存备用。

1.3 检测方法及结果判定

依照国家《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T18936—2020）标准中血凝试验（HA试验）和血凝抑制试验（HI试验）方法进行血清抗体检测。HI效价＜51og2判定为阴性，HI效价≥5log2判为阳性。群体免疫抗体阳性率到达70%以上为免疫合格。

2 结果

2.1 2019—2021年邵阳市各年度禽流感抗体检测结果

经统计，2019—2021年邵阳市各年度的H5和H7亚型禽流感抗体群体阳性率均高于国家规定的最低标准。其中，H5亚型禽流感抗体合格率从2019年逐年呈下降趋势，到2021年已接近国家最低标准，为70.09%；H7亚型禽流感抗体合格率良好，稳定在90%左右，具体结果见图1。

图1 2019—2021年邵阳市各年度H5和H7亚型禽流感抗体统计结果

2.2 2019—2021年邵阳市各地区禽流感抗体检测结果

对2019至2021年内邵阳市各县市区送检结果进行综合统计分析，结果发现：各县市区的H5和H7亚型禽流感抗体群体阳性率均高于农业农村部规定的最低标准，其中，H5亚型禽流感抗体最高为新邵县，合格率为100%，最低为新宁县，合格率为70.26%；H7亚型禽流感抗体最高为双清区，合格率为95.80%，最低为新宁县，合格率为70.91%。按照H5和H7抗体合格率进行综合排名，从高到低依次为新邵县、隆回县、武冈市、邵阳县、邵东县、双清区、北塔区、洞口县、大祥区、城步县、绥宁县、新宁县。具体结果可见图2。

图2 2019—2021年邵阳市各地区H5和H7亚型禽流感抗体统计结果

2.3 2019—2021年邵阳市鸡、鸭禽流感抗体检测结果

对2019—2021年内邵阳市鸡、鸭血清样本检测结果进行统计分析，结果发现：鸡的禽流感抗体水平普遍高于鸭的禽流感抗体水平，鸡的H5亚型禽流感抗体阳性率为82.33%、鸭的H5亚型禽流感抗体阳性率为75.50%；鸡的H7亚型禽流感抗体阳性率为92.92%、鸭的H7亚型禽流感抗体阳性率为85.75%。具体结果可见图3。

图3 2019—2021年邵阳市鸡、鸭H5和H7亚型禽流感抗体统计结果

3 讨论

禽流感不仅给家禽养殖业造成了重大的损失，也对公共安全产生了巨大的威胁，我国兽医部门在防控禽流感方面做了大量的工作，包括对家禽的强制免疫、对养殖场和野生禽类全覆盖的监测、每年定期督查等关键性举措。邵阳市是一个养禽大市，也是湘西南地区重要的活禽交易中心。从本次实验结果来看，邵阳市2019年到2021年这三年H5和H7亚型禽流感的整体免疫合格率均达到了农业农村部规定的免疫抗体合格率不低于70%的标准，说明邵阳市实施禽流感强制免疫措施效果达标。但值得注意的是，2019年—2021年，H5亚型禽流感的整体免疫合格率呈现下降趋势，免疫接种存在缺口，加之外部受病毒感染的威胁，就易发生动物疫情，2020年1月，邵阳市双清区就发生了家禽感染H5N1亚型高致病性禽流感疫情[3-4]。从鸡、鸭的H5和H7亚型禽流感的检测结果来看，鸡的禽流感整体抗体水平均高于鸭，鸭作为水禽类动物更易与候鸟等AIV携带者接触感染风险更大，提示我们要加强鸭的禽流感免疫接种和定期监测的工作。

2017年中国推出了家禽H5+H7二价灭活苗并在家禽中施行强制免疫使中国不仅及时地控制住高致病性禽流感在家禽中的流行引发的疫情，也切断了病毒从家禽到人的传播过程，基本消除了人感染H7N9病毒的可能，成为中国传染病防控史上的标志性成功案例。根据农业农村部畜牧兽医局最新发布的公告通知，目前我国禽流感使用的疫苗为重组禽流感病毒三价灭活苗（H5N1Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re3株），实验室的结果显示该疫苗具有良好的免疫原性，能够完全抵御H7N9亚型AIV及H5N1和H5N6亚型AIV的攻击[5-6]。当前，高致病性禽流感属于禽类强制免疫和扑杀病种，接种H5和H7亚型高致病性禽流感疫苗仍是有效预防和控制禽流感的重要举措。在开展禽流感强制免疫过程中，应持续定期对家禽禽流感免疫抗体实施主动监测，及时发现和补救漏洞，建立有效的生物安全屏障。本次研究对邵阳市近三年的禽类血清样本进行检测分析，了解了H5和H7亚型高致病性禽流感的免疫情况，为科学防控该地区的禽流感提供了实验数据。