饲料中添加鱼蛋白水解物对三疣梭子蟹仔蟹生长性能的影响

2022-08-10类成通

水产养殖 2022年7期

类成通

（日照市东港区渔业技术推广站，山东日照 276800）

蛋白质在水生生物的生长发育中发挥着重要作用，水产饲料主要确定不同种类及同种水生生物不同发育阶段的蛋白质及氨基酸的需求量及需求模式。鱼蛋白水解物（FPH）是由鱼粉经过蛋白酶水解后加工制得，其中含有大量的小分子肽及游离氨基酸。卫育良等研究表明，水解鱼蛋白的适量添加能够促进仔稚鱼肠道上皮细胞的发育和成熟，提高氨基酸利用效率，并通过对胆囊收缩素、小肽转运载体和胰蛋白酶活性的调节，来增加对蛋白质的消化和吸收，从而促进仔稚鱼的生长和发育。相似的研究结果，也有金头鲷（Sparus aurata）、大西洋鳕（Gadus morhua）等种类的仔稚鱼的相关报道。目前有关三疣梭子蟹对蛋白质和必需氨基酸方面的研究报道相对较少。现以三疣梭子蟹为研究对象，在饲料中添加鱼蛋白水解物，探究其对三疣梭子蟹仔蟹生长、存活及体组成的影响，为三疣梭子蟹仔蟹培育、优质人工饲料的研制提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 地点、时间和材料

试验地点位于浙江渔业科技岛海水增养殖重点实验室。试验系统由小蟹笼和中型的水泥池（5 m×5 m×1 m）组成。试验所用的三疣梭子蟹[（8.4±0.1）mg]来自浙江渔业科技岛海水增养殖场。试验时间为8 周。

1.2 试验设计

将三疣梭子蟹仔蟹分为3 个处理组（对照组FH0、处理组FH5 和FH10），每组30 只三疣梭子蟹，分别投喂含有添加0%，5%和10%的鱼蛋白水解物的微颗粒饲料，每种饲料设3 个重复组。

1.3 试验饲料制备

试验饲料为3 组等脂肪（10.00%）、等蛋白的半纯化饲料。鱼粉和蛋白水解物作为蛋白源，玉米淀粉作为糖源，鱼油作为脂肪源。饲料组成（干质量）见表1。将各种原料粉按表1 配方，在孔径为0.250 mm 的搅拌机中充分搅拌，再添加淀粉和适宜的水混匀至面团状。通过双螺杆挤出机（华南理工大学科技实业总厂，CD4XITS 型多功能成型机）分别挤出直径为1.5 和2.5 mm 的颗粒饲料，经50 ℃负压（0.097 mPa）干燥，破碎，过筛，于-20 ℃冰箱中备用。

表1 饲料组成（干质量） %

续表

1.4 试验方法

在试验开始前，将三疣梭子蟹放在试验环境中养殖1 周，其间投喂三疣梭子蟹暂养饲料。在试验开始前，挑选体格相近，身体健康的三疣梭子蟹称质量并记录，随机分配到蟹笼中。每个蟹笼放一个梭子蟹，避免其自相残杀。所有三疣梭子蟹每天09：30和16：30 各投喂1 次，投喂量大约占体质量的8%。每隔2 个星期称体质量1 次，称质量后的投喂量也随体质量调整。整个试验期间每天清理蟹笼，检查蟹笼的完整性，防止逃跑；持续充氧，换水量为池水量的15%。每天记录梭子蟹蜕壳的壳长和死亡数，水温25～32℃，ρ（溶解氧）>7 mg/L，pH 值6.7～7.3，整个过程梭子蟹生长良好。试验结束时，样品采集前停止投喂24 h。统计塑料筐中的梭子蟹数量并称质量，然后用液氮冷冻后于-80 ℃保存，待分析。

1.5 计算及统计方法

质量增加率（%）=（W-W/W×100；

成活率（%）=n/n×100；

特定生长率（%·d）=（1nW-lnW/t×100；

饲料转化率（%）=Q/（W-W×100；

全蟹水分（%）=m/m。

式中：W——试验末均质量，mg；

W——试验初均质量，mg；

n——试验验初数量，只；

t——试验时间，d；

Q——消耗的饲料量，mg；

m——样品烘干前质量，mg；

m——样品烘干恒重后的质量，mg。

试验结果以饲料鱼蛋白水解物为独立变量进行回归分析。基于三疣梭子蟹的质量增加率，运用SPSS 18.0（IBM.Chicago, USA）的统计方法中的二阶多项式回归模型，测定鱼蛋白水解物水平，P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

不同水平鱼蛋白水解物对三疣梭子蟹仔蟹生长，存活及体组成的影响见表2。

表2 不同水平鱼蛋白水解物对三疣梭子蟹仔蟹生长，存活及体组成的影响①

由表2 可见，FH0 组三疣梭子蟹仔蟹质量增加率显著高于其他2 个处理组（P<0.05），而FH5 组和FH10 组之间没有差异（P>0.05）；同样的FH0 组三疣梭子蟹仔蟹特定生长率显著高于其他2 个处理组（P<0.05），而FH5 组和FH10 组之间特定生长率没有差异（P>0.05）；3 个处理组之间比较得出三疣梭子蟹仔蟹存活率没有显著差异（P>0.05），而FH0 组和FH10明显高于FH5 组。体组成检测结果显示，FH0 组三疣梭子蟹全蟹水分含量显著低于其他2 个处理组（P<0.05），而FH5 组和FH10 组之间没有差异（P>0.05）。

3 讨论

水产动物幼体前期被发现消化酶活性不及成鱼，对完整蛋白的利用能力不高。鱼粉经蛋白酶水解后产生小分子肽以及游离氨基酸，有利于水产动物的消化吸收，并提高饲料的利用效率。文献[4-5]研究发现，鱼蛋白水解物的过量添加会导致仔稚鱼生长受限。

本研究结果显示，FH5 组和FH10 组三疣梭子蟹仔蟹的质量增加率以及特定生长率均显著低于FH0组（P<0.05），说明三疣梭子蟹仔蟹无法及时吸收鱼粉经水解产生的小分子肽及游离氨基酸，引起营养缺乏导致生长性能下降。FH0 组三疣梭子蟹全蟹水分含量显著低于其他2 个处理组（P<0.05），表明饲料中鱼蛋白水解物的添加不利于三疣梭子蟹仔蟹体内营养物质的积累。甲壳动物生长有蜕壳的过程，而体内物质的积累速度与蜕壳的频率直接相关，因此鱼蛋白水解物的添加不利于三疣梭子蟹仔蟹的生长。Zheng 等通过比较不同分子质量的鱼蛋白水解物在微颗粒饲料中的应用，发现大分子质量的鱼蛋白水解物更有利于大菱鲆（Scophthalmusmaximus）稚鱼的生长及饲料利用。而通过大黄鱼（Larimichthys crocea）稚鱼的一项营养研究结果表明，相对于水解鱼粉超滤保留物和未处理的鱼蛋白水解物，经过超滤的鱼蛋白水解物更易于消化吸收，并促进消化酶相关基因的表达。

本试验中，FH0 组生长性能最好，表明三疣梭子蟹仔蟹的消化酶能较好地适应完整蛋白，而不是小分子肽及游离氨基酸。鱼蛋白水解物的添加能影响仔稚鱼体能生长因子（IGF-1）的表达量，从而影响其生长发育。Cai 等研究结果发现，由于分子质量的不同，鱼蛋白水解物对消化酶的活性及其表达量具有很大的影响。这或许是鱼蛋白水解物对仔稚鱼生长发育以及消化吸收能力影响的主要原因。但在本研究中，添加鱼蛋白水解物反而影响了三疣梭子蟹仔蟹的生长，或许是甲壳动物的酶系统与鱼类有所不同，具有较强的消化完整蛋白的能力。