过程污染对食品中氯霉素检测的 影响及预防措施

◎ 缪 璐，黎德勇，陀雄信，蒙韦玲，吕仕军，黄 海

（广西壮族自治区产品质量检验研究院，广西 南宁 530200）

食品安全不仅关系着人们的身体健康和生命安全，还关系着民族的未来[1]。在“十三五”时期，农产品和食品抽检量实现每年4批次/千人的目标，在“十四五”时期，稳步实现农产品和食品抽检量每年5批次/千人目标，其中种养殖环节抽检量每年2批次/千人[2]。其中，食品检验检测机构为日常监督抽检、风险监测等提供了强有力的技术支撑，而每个环节都存在影响结果准确性的因素，如果影响因素得不到控制，则不能保证检测数据的准确性和可靠性，会使食品安全失去保障，威胁消费者的身体健康，也会影响检验机构的声誉。

我国农业农村部公告第250号公告中将氯霉素列为禁止使用的药物，要求在动物性食品中不得检出。但近年来动物性食品中检出氯霉素残留问题却时有发生[3]。根据《食品安全国家标准 动物性食品中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》（GB 31658.2—2021）， 氯霉素残留量的检出限为0.1 μg kg-1，因此对实验环境提出了更严格的要求。一旦过程污染，实验室容易出现氯霉素假阳性现象。如果检验检测机构将合格样品错判为不合格，不仅会给食品生产经营者造成一定的经济和声誉损失，还可能会引起消费者不必要的恐慌，影响人们对食品安全的信心[4]。因此，本文通过模拟实验研究氯霉素污染因素，提出预防措施，以期降低氯霉素假阳性的风险，提高检验工作的准确性。同时，为食品检验检测机构提供借鉴。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器

UPLC-QTRAP5500超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪（美国AB Sciex公司）；RKTS-23050-SNN快速溶剂蒸发仪（英国GeneVac公司）；TDL-40B离心机（上海安亭科学仪器厂）；WM-MT多管涡旋振荡器（广东省科寅实验室设备有限公司）；HS501 digital圆周振荡摇床（德国IKA公司）；GM200刀式研磨仪（德国Retsch GmbH公司）。

1.1.2 标准品

氯霉素标准物质（纯度≥99.8%，德国Dr. Ehrenstorfer GmbH公司）；氯霉素氘代内标（氯霉素-D5）（纯度≥94.89%，德国Dr. Ehrenstorfer GmbH公司）。

1.2 制样器具中污染物的提取

制样器具分别有食品级砧板（简称砧板）、刀和刀式研磨仪。分别用两张无尘纸蘸取无水乙醇擦拭砧板、刀、刀式研磨仪进行污染物收集，将擦拭后的无尘纸置于25 mL洁净离心管中，用20 mL乙腈进行浸泡溶解，超声10 min，转移出乙腈溶解液于40 ℃氮吹至近干，用2.0 mL 5%乙腈水溶液定容，涡旋混匀，过0.22 μm滤膜，上机待测。

1.3 环境中污染物的提取

样品流转过程中可能污染到制样间（样品流转车、样品框、丁腈手套、样品袋、制样员的手、制样间操作台面、水池和抹布）和实验室（前处理室操作台面、移液枪、移液器、检验员的手和抹布）。

分别用无尘纸蘸取无水乙醇擦拭污染物表面进行污染物收集，将擦拭后的无尘纸置于25 mL洁净比色管中，用20 mL乙腈进行浸泡，超声10 min，转移出乙腈溶解液于40 ℃氮吹至近干，用2.0 mL 5%乙腈水溶液定容，涡旋混匀，过0.22 μm滤膜，上机待测。

1.4 模拟实验

将3组制样所需用具、操作桌面、案板等用水清洗3次后，均用无水乙醇进行冲洗、擦拭、晾干。第1组将大头鱼样品制样，正常清洗制样工具后，制备未检出氯霉素的猪肉；第2组将花甲样品进行制样，清洗后，制备猪肉；第3组将芝麻螺样品制样，清洗后，制备猪肉。将6个样品进行检测分析。同时，将第1次制样清洗后的制样器具同时按照1.2进行采样。

2 结果与分析

通过模拟实验检测结果表明，第1、2组样品在常规清洗后再制样，并未污染到下一个样品。虽然清洗后的制样器具可能含有微量氯霉素，但不会导致样品中氯霉素含量达到方法检出限0.1 μg kg-1。第3组样品污染了下一个样品，含量为0.58 μg kg-1，高出检出限近6倍，说明氯霉素含量高的样品存在污染后续样品的可能性，检测结果见表1。同时将第1、2、 3组的第一个样品制完，用实验室用水清洗3次后的制样器具进行检测，发现第2、3组检出了氯霉素，说明实验用水清洗方法未能彻底去除氯霉素，检测结果 见表2。

表1 模拟样品及清洗后制样器具检测结果表

表2 清洗后制样器具的检测结果表

由表3可知，制样操作台面、样品框内壁、装含氯霉素样品的样品袋表面、水池和抹布等均检出不同含量的氯霉素，说明氯霉素具有累加性，一旦污染后采用一般清洁方式不易去除。其中，制样间操作台面及抹布的检测结果偏高，也可能是做模拟实验时用到氯霉素滴眼液，稀释后，氯霉素含量仍有2 mg/L，导致制样间受到不同程度的污染。同时说明高含量的样品存在污染实验环境的可能性，从而影响痕量分析的准确性。

表3 环境中污染物的氯霉素提取检测结果表

3 结论与讨论

对常量分析而言，实验室环境以及实验器具的轻微污染对实验结果影响不大。但对于微量、痕量分析来说，则会造成很大影响。食品中氯霉素的残留检测属于痕量分析，方法检出限为0.1 μg kg-1，因此对实验环境提出了更严格的要求。鉴于痕量分析对实验环境的要求较高，从实验结果来看，高含量的样品对实验室产生的污染可对其痕量分析产生干扰[5]。因此，建议食品痕量分析使用一次性实验器具；如果要重复使用，则应将常量分析与痕量分析的实验器具严格分开，一旦检出高含量的样品，应对实验室环境和器具进行采样分析，若器具和环境存在污染，除进行针对性地清洁外，还应对近期检测该项目的样品，重新制样检测，以免造成假阳性。

以氯霉素为例，通过研究过程污染影响实验室中痕量分析的关键指标，提出预防措施，以期降低痕量分析的风险，提高检验工作的准确性。人员防范意识、器具清洁程度具有随机性、隐蔽性，不容易被发现，对痕量分析影响较大，容易造成假阳性，将合格样品判定为不合格，因此是影响实验室中痕量分析的关键指标，其预防措施如下。①应对人员进行专项培训，加强防范意识，掌握制样的基本要求和技能。②制样器具的清洗应做到一样一清洗，通过研究痕量分析的特殊性，根据其性质制定不同的清洗方案，规范制样操作流程，以免污染其他样品。③加强监督检查，不断规范制样人员的操作。

食品检验是食品安全监管链条中的关键环节，其结果直接体现食品安全状况，是监管部门的重要执法依据。检验检测机构应高度重视检验结果及结论的准确性和科学性，在日常工作中须充分掌握影响结果判定的各个关键要素，增强风险意识，避免错判误判。