头孢克肟残留溶剂的测定

王喜军

【摘 要】建立一种气相色谱法同时测定头孢克肟中甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷的残留量。方法：本法采用外标法，在6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱上进行组分分离，效果良好。载气为氮气；检测器为FID；进样口温度250℃；柱温60℃；检测器温度300℃；结果：甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷的回收率分别为97.51%、97.44%、94.46%、94.10%，对照品在0.6到1.6倍浓度范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系，甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷重复性的RSD分别为1.58%、2.00%、1.67%、4.50%，甲醇定量限为3.60μg/ml，检测限为1.20μg/ml，丙酮定量限为0.61μg/ml，检测限为0.20μg/ml，乙腈定量限为1.39μg/ml，检测限为0.42μg/ml，二氯甲烷定量限为0.32μg/ml，检测限为0.09μg/ml。结论：该方法能同时检出甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷四种残留溶剂，重现性好，精度高。

【关键词】头孢克肟 外标法 甲醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷

【中图分类号】R927 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5158（2013）03-0371-01

头孢克肟，英文名Cefixime，中文别名氨噻肟烯头孢菌素、世伏素细粒，是广谱第三代头孢抗菌素。大多数革兰氏阴性（G-）需氧菌对CFX敏感，而产酶和不产酶的金葡菌、表皮萄葡球菌则不敏感。而头孢克肟则对β内酰胺酶高度稳定，与青霉素结合蛋白3、1a和1b有高度亲和力，使细菌细胞壁合成受阻，细菌迅速溶解、死亡。另外，头孢克肟对肠道球菌及拟杆菌属作用很弱，对假单孢菌属如绿脓杆菌基本无效。将头孢克肟与头孢氨苄头孢克罗以及奥格门汀等口服抗生素的抗菌作用进行了比较，头孢克肟对大肠杆菌、肺炎杆菌和伤寒杆菌的作用比头孢氨苄和奥格门汀强8～10倍。头孢克肟对各种细菌产生的β-内酰胺酶高度耐受，因而对粘膜炎布兰汉氏球菌及流感嗜血杆菌相当敏感。头孢克肟（cefixime）在其C7位上结合有苯甘氨酸类的基团，从而具备可口服吸收的结构，治疗下呼吸道感染有较高的疗效，因此开发头孢克肟新剂型、新工艺具有很好的前景。固体分散技术主要是通过微粉化、固体分散体和粉状溶液或溶剂沉积等技术达到高度分散，从而提高药物制剂生物利用度。头孢克肟适用于支气管炎、肺炎、肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎、胆囊炎、胆管炎、猩红热、中耳炎、鼻窦炎的治疗。

1.目的：

通过气相色谱法（中国药典2010年版二部附录Ⅷ P）检测头孢克肟中甲醇、丙酮、乙腈与二氯甲烷的残留量。

仪器：Agilent 7890。色谱柱：6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱为色谱柱。检测器：氢火焰离子化检测器（FID）柱温：60oC进样口温度：250oC；检测器温度：300oC；顶空瓶平衡温度：80oC；平衡时间：30分钟。

供试品溶液： 取头孢克肟约0.1g，精密称定，置顶空瓶中，加入pH7.0磷酸盐缓冲溶液4ml使溶解，再加入水1ml，摇匀，密封瓶口，作为供试品溶液。

对照品溶液：分别称取丙酮、乙腈、二氯甲烷、甲醇适量，加水制成每1ml中含丙酮500μg，乙腈41μg，二氯甲烷60μg，甲醇300μg的对照品储备液，精密量取pH7.0磷酸盐缓冲溶液4ml置顶空瓶中，再精密加入1ml对照品储备液，摇匀，密封瓶口，作为对照品溶液。

系统适用性：取对照品溶液顶空进样，记录色谱图，出峰顺序依次为：甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷与二氧六环（内标），各色谱峰间的分离度均应符合要求。

分析步骤：取供试品溶液和对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图，按外标法以峰面积进行计算头孢克肟中各溶剂的残留量，甲醇不得过0.3%、丙酮不得过0.5%、已经不得过0.041%、二氯甲烷不得过0.06%。

2.重复性试验

取对照品溶液按测定法测定，分别连续重复进样6次，记录色谱图，甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷峰面积的相对标准偏差应不得超过5.0%，结果RSD 为4.50%，表明本方法重复性较好。

3.线性试验

分别精密配制含甲醇3mg/ml，丙酮5mg/ml，乙腈410μg/ml，二氯甲烷600μg/ml的对照品溶液作为储备液，于储备液中分别精密量取0.6ml，0.8ml，1.0ml，1.2ml，1.4ml和1.6ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取pH7.0磷酸盐缓冲溶液4ml置20ml顶空瓶中，再分别精密加入上述各浓度对照品储备液1ml，混匀，密封。按测定法分别进行测定，记录色谱图。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，结果甲醇回归方程Y=7.4429+644.05X（r=0.999），丙酮回归方程Y=8.0695+6095.4X（r=0.999），乙腈回归方程Y=3641.1X-7.4095（r=0.999），二氯甲烷回归方程Y=10182X+19.879（r=0.999）。试验结果证明甲醇，丙酮，乙腈，二氯甲烷在0.6到1.6倍浓度范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系。

4.异丙醇的回收率试验

精密配制含甲醇3mg/ml，丙酮5mg/ml，乙腈410μg/ml，二氯甲烷600μg/ml的混合溶液，于储备液中量取0.8ml，1.0ml，1.2ml置于10ml量瓶中，用水稀释至刻度，作为对照品储备液。精密称取头孢克肟0.1g 9份，分别置9个20ml顶空瓶中，每个瓶中精密加入pH7.0磷酸盐缓冲溶液4ml，溶解，并从3瓶对照品储备液中各精密量取1ml溶液3份加入到9个顶空瓶中，混匀，密封，按测定法分别进行测定。同时取3个浓度对照品溶液和供试品溶液按测定法测定，记录色谱图，计算理论含量、测得含量及回收率，甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷的回收率分别为97.51%、97.44%、94.46%、94.10%，回收率良好。

5.定量限

精密配制不同浓度的甲醇、丙酮、乙腈和二氯甲烷对照品溶液，按测定法分别进行测定，记录峰高为10倍基线噪音时被测物的量，以此作为定量限，结果见表99. 记录峰高为3倍基线噪音时被测物的量，以此作为检测限，测定结果是甲醇定量限为3.60μg/ml，检测限为1.20μg/ml，丙酮定量限为0.61μg/ml，检测限为0.20μg/ml，乙腈定量限为1.39μg/ml，检测限为0.42μg/ml，二氯甲烷定量限为0.32μg/ml，检测限为0.09μg/ml。

6. 结论：

新建立的方法分离速度快，操作简便，灵敏度高，能精确检测头孢克肟中的甲醇、丙酮、乙腈和二氯甲烷四种残留溶剂。

参考文献：

2010年版中国药典