两种梅毒抗体检测方法在梅毒早期诊断中的应用

王虹力

（凤城市中心医院检验科，辽宁 凤城 118100）

梅毒是由苍白（梅毒）螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病[1]。主要通过性途径传播，临床上可表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天梅毒（胎传梅毒）等。近年来，由于人们思想、行为开放等因素，疾病发病率递增趋势，且主要通过性行为、血液、母婴等途径进行传播，严重危害人体健康状况。流行性数据调查指出，世界卫生组织估计，全球每年约有1 200万新发病例，集中在南亚、东南亚。在我国也呈现明显的增长速度，报告的梅毒中，潜伏梅毒、一期与二期梅毒、先天梅毒报告病例数均呈增加表现。基于疾病的不良预后，需尽早诊断、治疗[2]。梅毒患者的皮肤、黏膜中含梅毒螺旋体，未患病者在与梅毒患者的性接触中，皮肤或黏膜若有细微破损则可得病。极少数可通过输血或途径传染。获得性梅毒（后天）早期梅毒患者是传染源，95%以上是通过危险的或无保护的性行为传染，少数通过接亲吻、输血、污染的衣物等传染。胎传梅毒由患梅毒的孕妇传染，如果一、二期和早期潜伏梅毒的孕妇，传染给胎儿的概率相当高。梅毒抗体检测是常规筛查方法，在及时发现梅毒感染的基础上进行治疗，以促进患者预后、提升患者安全性[3]。由于梅毒临床表现不典型，梅毒螺旋体培养困难，为了确保检验结果的准确性，需要有效的鉴定梅毒抗体检测反应性较强标本、弱反应性标本[4]。本文就我院2019年10月至2020年10月期间梅毒患者与同期健康体检者为例，对比分析TRUST、TPPA检验价值，为临床工作的开展提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 从2019年10月至2020年10月来我院诊治的患者和健康体检者中选取梅毒螺旋体颗粒凝集试验（treponema pallidum particle assay，TPPA）阳性体检梅毒现症患者（n=117）、同期健康体检者（n=113）。纳入标准：①患者知情同意参与。②病历资料完整。③获得医院伦理委员会审核批准。④依从行为良好。排除标准：①重大疾病患者。②其他传染类疾病患者。③退出研究者。117例梅毒患者中，男性80例、女性37例；患者年龄最小50岁、最大80岁，平均年龄（71.50±6.50）岁。同期113例健康体检者中，男性79例、女性34例；患者年龄最小48岁、最大78岁，平均年龄（71.20±7.30）岁。两组受检者（梅毒现症患者、同期健康体检者）性别分布、平均年龄等基线资料比较，P＞0.05，其均衡具有研究可比性。

所有受检者对本研究知情同意并签署知情同意书，本研究已获得我院伦理委员会的批准。

1.2 方法 告知受检者空腹，于清晨、空腹情况下抽取静脉血（3 mL）进行离心分离3 000 r/min，应用TECAN全自动酶免仪进行筛检。TPPA检测应用日本株式会社生产的相关试剂，甲苯胺红不加热血清试验（tolulized red unheated serum test，TRUST）检测应用上海荣盛生物公司，检验操作严格按照说明性进行。TPPA检测：室温下，生理盐水稀释1∶32，各个孔滴心磷脂抗原，振荡器（100次/min）中震荡10 min，观察凝集结果。TRUST检测：室温下，U型板中稀释血清加致敏、未致敏明胶颗粒，于孵育2 h后观察结果。检验结果阳性情况下，进行双孔复试，若1、2孔阳性则证明为阳性结果。

1.3 观察指标 统计分析梅毒现症患者、同期健康体检者经TRUST和TPPA两种方法检测后疾病检出情况以及检验敏感度、特异度情况。

1.4 数据统计学分析 基于统计学软件（SPSS21.0版本）建立数据分析模型，对研究数据进行统计。检验敏感度、特异度、疾病检出率为计数资料，以例（n）、率（%）的形式描述，卡方（χ2）作对应检验值。P＜0.05情况下，相同观察指标数据比较存在显著性差异且具有统计学意义，反之差异无显著性。

2 结果

2.1 疾病检出情况分析 梅毒现症患者、同期健康体检者疾病检出情况详细数据见表1。健康体检者经TRUST、TPPA检测后无阳性表达，经TRUST检测后阳性患者99例（84.62%），TPPA检测后阳性患者117例（100.00%）。

表1 疾病检出情况分析（n）

2.2 诊断灵敏度、特异性分析 经TRUST、TPPA检测后的诊断灵敏度、特异性情况见表2。经统计学计算，TRUST、TPPA检测灵敏度（84.61%vs.100.00%）差异显著P＜0.05（具有统计学意义），特异度接近（100.00%vs.100.00%）P＞0.05。

表2 诊断灵敏度以及特异性情况分析

3 讨论

梅毒属于性疾病，具有较强的传染性，属乙类传染病，危害性极大[5]。一期梅毒临床标志性临床特征是硬下疳。好发部位为阴茎、龟头、冠状沟、包皮、尿道口；大小阴唇、阴蒂、宫颈；肛门、肛管等。也可见于唇、舌、乳房等处。二期梅毒临床以二期梅毒疹为特征，有全身症状，一般在硬下疳消退后相隔一段无症状期再发生。TP随血液循环播散，引发多部位损害和多样病灶。侵犯皮肤、黏膜、骨骼、内脏、心血管、神经系统。梅毒进入二期时，梅毒血清学试验几乎100%阳性；全身症状发生在皮疹出现前，发热、头痛、骨关节酸痛、肝脾肿大、淋巴结肿大；男性发生率约25%；女性约50%；症状在3～5 d好转，接着出现梅毒疹，并有反复发生的特点。三期梅毒1/3的未经治疗的显性TP感染发生三期梅毒。其中，15%为良性晚期梅毒，15%～20%为严重的晚期梅毒。临床工作中发现，梅毒患者感染艾滋病的概率非常高，疾病发生与机体受到梅毒螺旋体感染关系密切[6]。早期阶段治疗、控制病情，可以控制病情蔓延，若治疗不及时，可导致病情加重、蔓延，严重损害患者的健康状况，造成机体组织器官严重损害、衰竭、死亡等问题，具有较高的危害性[6]。临床工作中发现，当前梅毒发病率呈递增趋势，疾病发生与人们思想开放，患者过早接触性生活、性生活不洁等有关[7]。显性梅毒、隐性梅毒均为传染源，感染后会伤害到机体各个器官[8]。基于疾病的传染性特点，需引起临床和社会的重视。为了提高患者的安全性、生活质量，要求尽早诊断、治疗。梅毒具有较高的传染性、一定潜伏期，主要临床表现无明显症状，大多为皮肤表现，常被患者忽视。实验室检查中的暗视野显微镜检查方法是取患者的可疑皮损（如硬下疳、扁平湿疣、湿丘疹等），在暗视野显微镜下检查，见到运动的梅毒螺旋体，可作为梅毒的确诊依据。血清学梅毒抗体检测是常用的检测梅毒的方法，患者感染1～2个月内血液中有抗类脂质抗原非特异性反应素、螺旋抗原特异性抗体，进而进行早诊断、早治疗[9]。梅毒血清学试验方法很多，所用抗原有非螺旋体抗原（心磷脂抗原）和梅毒螺旋体特异性抗原两类。前者有快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、TRUST等，可做定量试验，用于判断疗效、判断病情活动程度。后者有TPPA、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）等，特异性强，用于TP感染的确证。梅毒螺旋体IgM抗体检测：感染梅毒后，首先出现IgM抗体，随着疾病发展，IgG抗体随后才出现并慢慢上升。经有效治疗后IgM抗体消失，IgG抗体则持续存在。TP-IgM抗体不能通过胎盘，如果婴儿TP-IgM阳性则表示婴儿已被感染，因此，TP-IgM抗体检测对诊断婴儿的胎传梅毒意义很大。TRUST法在甲苯胺红溶液中放入VDRL炼制，检测血浆、血清中的反应素，操作简单方便、检出速度快，适用于大量人群筛查。充分治疗后，反应素消失。未治疗情况下，患者血清内反应素将长期存在。但是，TRUST法也存在一定的问题。TRUST检验中梅毒螺旋体造成的组织损伤、释放抗原性心磷脂，可能影响患者的机体抗体反应素，进而可能有生物学假阳性，降低了疾病诊断的准确性、特异性[10]。另外，急性发热性传染病、妊娠、吸毒，具有较高的漏诊、误诊风险，从而影响患者早期治疗和预后，增加了医疗纠纷风险。所以，梅毒潜伏期情况下体内组织破坏小，为了确保检验结果的准确性，只能作为疾病的初筛方法[11]。TPPA检测方法将提纯的梅毒螺旋体抗原包被在明胶颗粒上，抗原、血清中间抗体发生特异性反应情况下产生颗粒凝集情况，凝集的强弱程度、抗体浓度关系密切，呈正相关关系。TPPA检验具有较高的特异性、敏感性，从标本处理到出具检测结果一般2 h即可[12]。但是，该检验成本高，加上检验过程烦琐、周期长等因素影响，限制了临床应用。鉴于TRUST、TPPA检测各自的优劣势，TRUST检测可以用于疾病筛查，TPPA检测可以作为初筛之后的确诊方法，以减少疾病误诊、漏诊风险，助于患者早期治疗[13]。

本文结果：经TRUST检测后阳性率为84.62%、TPPA检测后阳性率为100.00%。经统计学计算，检测灵敏度差异显著P＜0.05。由此说明，TPPA检测可以用于疑似患者确诊，TRUST检测可以用于疾病筛查，助于患者早期诊治、预后。

综上所述，近年来我国梅毒发病率一直呈递增趋势，梅毒是人类独有疾病，显性、隐性梅毒患者是传染源。梅毒螺旋体通过胎盘传给胎儿，早期梅毒孕妇传染给胎儿风险性非常高。性接触是梅毒的主要传播途径，感染梅毒的早期传染性最强。关于梅毒疾病需尽早筛查、确诊，治疗以提高患者的安全性、生活与生存质量。TRUST、TPPA检测均可用于梅毒疾病诊断中，其中，TRUST检测的灵敏度不高，但是成本低、操作简单。TPPA检测具有较高的灵敏度，但检测成本较高、操作复杂。所以，TPPA检测可以用于疑似患者确诊，TRUST检测可以用于疾病筛查，两种检测方法各有优势和不足，可以视患者情况合理进行检测。