结直肠神经内分泌肿瘤中SATB2的表达及临床意义

李晓玲，周金钊，王 衡，黄 仲

目前神经内分泌肿瘤(neuroendocrine neoplasms, NEN)的发病率在全球范围内呈逐年升高趋势，其中以胃肠胰神经内分泌肿瘤(gastroenteropancreatic neuroendocrine neoplasms, GEP-NEN)最为常见。该肿瘤的组织学从高分化的神经内分泌瘤(neuroendocrine tumor, NET)到低分化的神经内分泌癌(neuroendocrine carcinomas, NEC)，生物学行为具有高度异质性，为临床治疗带来极大挑战。SATB2是一种参与成骨细胞和神经细胞分化的转录调节因子，是正常下消化道上皮组织及结直肠癌的高度敏感和特异性的标志物。本文旨在探讨SATB2在结直肠NEN中的表达及临床意义，以期为临床诊治提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料收集2016年1月～2020年12月广东医科大学附属医院诊治的136例消化道NEN，其中NET 113例，NEC 23例；男、女性各68例；年龄13～80岁。本实验获得我院伦理委员会批准，患者均知情同意。

1.2 方法标本均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋切片，HE染色，镜下观察，经两名病理医师复诊。根据WHO(2019)消化系统NEN的分类及分级标准进行肿瘤分级分型：高分化NET G1(低级别)、G2(中级别)、G3(高级别)及低分化NEC。采用DAKO Omnis公司最新型全自动免疫组化仪进行染色，一抗SATB2及二抗试剂盒均购自福州迈新公司。设阴、阳性对照，免疫组化染色结果由两位病理科医师采用双盲法独立阅片。

1.3 结果判读SATB2表达定位于细胞核，根据阳性细胞染色强度评分：无着色为0分，淡黄色为1分，浅褐色为2分，深褐色为3分。根据肿瘤细胞阳性百分比评分：阳性细胞数<25%为1分，25%～49%为2分，50%～75%为3分，>75%为4分。将两项得分相乘作为最终评分，其中0～3分为阴性，≥4分为阳性。

2 结果

2.1 临床特征本组136例消化道NEN中，NET 113例，NEC 23例，其中原发于食管NEC 5例，胃NET 9例、NEC 5例，胰腺NET 8例，小肠NET 10例，阑尾NET 3例，结肠NET 1例、NEC 6例，直肠NET 82例、NEC 7例。患者年龄13～80岁，平均(50.65±13.98)岁；其中男性68例，年龄13～80岁，平均(50.07±15.13)岁；女性68例，年龄19～76岁，平均(51.22±12.82)岁。96例结直肠NEN中NET 83例，无淋巴结转移78例，有淋巴结转移 5例；NEC 13例，无淋巴结转移2例，有淋巴结转移11例；年龄19～76岁，平均(48.85±13.07)岁。96例结直肠NEN中男性46例，年龄22～73岁，平均(47.20±12.93)岁；女性50例，年龄19～76岁，平均(50.38±13.14)岁；肿瘤转移与其分化程度密切相关，NEC组的转移率(11/13，84.61%)高于NET组(5/83，6.02%)，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 结直肠及结直肠外其他消化道NEN中SATB2的表达SATB2在结直肠(78/96、81.25%)及阑尾NEN(3/3，100%)中显示高阳性率，在结直肠外其他消化道NEN中SATB2均阴性[食管(0/5)、胃(0/14)、胰腺(0/8)、小肠(0/10)]。本组NEC中SATB2的阳性程度弱于内对照的正常隐窝上皮，NET中SATB2在肿瘤周边条索状浸润灶中的阳性程度弱于原肿瘤细胞巢团，HE染色显示形态良好的直肠NET G1腰椎骨转移灶中SATB2呈阴性(图1～6)。

图1 SATB2在直肠NET中呈阳性，EnVision法 图2 SATB2在胃NET中呈阴性，EnVision法 图3 SATB2在结肠低分化NEC肿瘤细胞巢中的阳性弱于正常隐窝上皮，EnVision法 图4 SATB2在直肠NET周边浸润灶中的阳性弱于中央原肿瘤细胞巢，EnVision法 图5 直肠NET G1骨转移灶，形态良好的肿瘤细胞巢团穿行在骨小梁之间 图6 直肠NET G1骨转移灶中肿瘤细胞巢SATB2呈阴性，内对照骨组织SATB2呈阳性，EnVision法

2.3 结直肠NEN各组中STAB2的表达在96例结直肠NEN中，SATB2在NET组的阳性率(74/83，89.16%)高于NEC组(4/13，30.77%)，无淋巴结转移组的阳性率(72/80，90.00%)高于有淋巴结转移组(6/16，37.50%)，差异均有统计学意义(P<0.05，表1)。SATB2在结直肠NEN转移组中的NET组(3/5，60.00%)与NEC组(3/11，27.27%)、结直肠NET中的转移组(3/5，60.00%)与无转移组(71/78，91.03%)、结直肠NEC中的转移组(3/11，27.27%)与无转移组(1/2，50.00%)的阳性率，差异均无统计学意义(P>0.05，表1)。

表1 结直肠NEN各组中SATB2的表达

3 讨论

NEN是一组起源于肽能神经元和神经内分泌细胞的高度异质性肿瘤，全身多器官组织均可发生，以胃肠道NEN最为常见[1-2]。该肿瘤生物学特性复杂，临床诊治富于挑战性。部分病例以转移为首发临床表现，甚至在原发病灶隐匿的情况下已发生肝脏、骨、肺转移，通过组织学形态难以确定其来源部位，免疫组化检查成为重要的鉴别手段。因此，寻找兼具敏感性与器官特异性的免疫组化标志物，有效地指导临床治疗和评估预后具有重要意义。

SATB2基因定位于染色体2q32-q33，其编码的SATB2蛋白是重要的核基质相关蛋白。SATB2通过与核基质附着区结合改变染色质构象，参与染色质转录和重塑调控，从而发挥调控基因转录的功能[3-4]。有研究表明，SATB2在下消化道上皮组织中高表达，且在恶性肿瘤中的表达谱相对较窄，主要在结直肠与阑尾腺癌、成骨细胞肿瘤和尿路上皮癌中表达[5]。程凯等[6]报道SATB2在结直肠腺癌中的阳性率为81.5%，在胃腺癌中的阳性率为8.7%，SATB2在结直肠癌与胃癌鉴别诊断中的阳性预测值是81.5%，阴性预测值是89.9%，提示SATB2或可用于鉴别结直肠癌与胃癌。何晓兰等[7]、苟思琪等[8]研究结果也提示SATB2是鉴别肺转移性结直肠腺癌与肺肠型腺癌的高度特异性免疫组化标志物。Eberhard等[9]通过组织芯片及免疫组化法检测结直肠正常黏膜及结直肠癌组织中SATB2的表达，认为其在肿瘤组织中的表达低于正常黏膜，SATB2高表达提示较好的预后及对化疗、放疗有较高的敏感性。Qaseem等[10]研究认为SATB2可作为判断结直肠癌分化程度相对特异的肿瘤标志物，从而明确未知原发部位腺癌的来源。另有文献报道SATB2可能在结直肠癌发生、发展与浸润转移中发挥重要作用，其低表达与肿瘤进程密切相关[11]。嵇晓辉等[12]研究发现SATB2在结肠癌组织中的表达低于正常结肠组织，并与肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关。最新研究显示，SATB2 /Snail轴缺失可促进结直肠癌的进展[13]；SATB2-AS1调节TH1型趋化因子表达和免疫细胞密度，通过影响肿瘤免疫调节SATB2在结直肠癌细胞微环境中的作用[14]。Hoskoppal等[15]报道263例NEN，发现SATB2对于直肠/直乙交界处高分化NEN、阑尾高分化NEN是高度敏感且特异性的标志物；在低分化NEN中SATB2的表达显著低于高分化NEN(P<0.001)。本组SATB2在结直肠外其他消化道NEN中不表达，而在结直肠及阑尾NEN中的表达具有高度特异性与敏感性，并且NET组的阳性率(74/83，89.16%)高于NEC组(4/13，30.77%)，无淋巴结转移组的阳性率(72/80，90.00%)高于有淋巴结转移组(6/16，37.50%)，差异均有统计学意义(P<0.05)。但在结直肠NEN转移组中NET组(3/5，60.00%)与NEC组(3/11，27.27%)、结直肠NET中转移组(3/5，60.00%)与无转移组(71/78，91.03%)、结直肠NEC中转移组(3/11，27.27%)与无转移组(1/2，50.00%)的阳性率，差异均无统计学意义(P>0.05)，可能与本组病例数较少有关。本组低分化NEC中SATB2的阳性程度弱于内对照的正常隐窝上皮，高分化NET中SATB2在肿瘤周边条索状浸润灶中的阳性程度弱于原发灶中央部的肿瘤细胞巢团，提示在肿瘤发生、发展及浸润转移中，SATB2可能扮演重要角色发挥作用。

综上所述，SATB2是诊断结直肠NEN的敏感而特异的标志物，对鉴别结直肠来源的NEN具有重要意义。SATB2在肿瘤的发生、发展及浸润转移中发挥重要作用，其表达降低或丢失与肿瘤分化及进程密切相关。