聚焦高中生物学试题中的电泳图
2022-07-29重庆赵德强罗立峰
重庆 赵德强 罗立峰
电泳是常用的分离、鉴定技术,其本质是带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程中,由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。电泳图是物质分离后呈现的结果图,常有DNA电泳图和蛋白质电泳图。新高考更加注重对能力和素养的考查,借用电泳图的高中生物学试题是近年高考命题的热点题型之一,如2021年河北卷第20题和2020年山东卷第17题。笔者现对此类型试题进行归类,并分析电泳图试题的解题技巧。
1.电泳与蛋白质结构和功能
【例1】为研究与植物生长相关的基因及其作用,科学家获得了基因A、B、C失活的多种突变体,电泳分析各植株中蛋白m和蛋白n的表达情况,结果如图1。据图分析错误的是 ( )
图1
A.基因B和C分别控制蛋白m和n的合成
B.蛋白m和蛋白n对植株生长起抑制作用
C.基因C比基因B对植株生长的抑制更强
D.基因A可能促进蛋白m和蛋白n的降解
【分析】图1显示野生型植株高,无蛋白质m和n,其他类型植株高矮和蛋白质种类情况一目了然。A+B双突变体中有蛋白n说明基因C与蛋白n的合成有关;A+C双突变体中有蛋白m说明基因B与蛋白m的合成有关,A项正确;根据野生型(有基因A+B+C)和A+B+C三突变体的植株均为高可知D项正确;根据图(b)(c)(d)植株矮小,可知B项正确;有基因C的植株比有基因B的植株高,说明基因B比基因C对植株生长的抑制能力更强,C项错误。试题的能力考查点为获取信息的能力及实验探究能力,学科核心素养考查点为生命观念中的物质与能量观、科学思维及科学探究。
【解题技巧】电泳图有关试题的特征是试题中呈现电泳结果图,解题的关键是读懂电泳图。不论是蛋白质电泳图还是DNA电泳图,其主要是绘制有不同的条带,而不同的条带代表分子量不同的蛋白质或DNA。图中有正负极(有的电泳图也忽略正负极),正极为“起点”,条带为“终点”,起点和终点之间的距离不同表示分子量不同的蛋白质或DNA,越重或越长的蛋白质或DNA跑得越慢,反之越快。电泳图旁边的长度不是代表DNA分子的长度,而是代表跑带的长度,与DNA分子的长度刚好相反。
2.电泳与限制酶
基因工程中用限制性核酸内切酶酶切DNA分子,电泳可以使酶切的不同DNA分子片段在凝胶中可视化。
【例2】现有一长度为3 000碱基对(bp)的线性DNA分子,用限制性核酸内切酶酶切后,进行凝胶电泳,使降解产物分开。用酶H单独酶切,结果如图2(a)图。用酶B单独酶切,结果如图2(b)图。用酶H和酶B同时酶切,结果如图2(c)图。该DNA分子的结构及其酶切图谱是 ( )
图2
【分析】本题考查限制酶的相关知识,须知一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,且只能在特定的位点切割DNA分子。图2中甲、乙、丙是用不同的限制酶酶切的结果,电泳条带表示不同长度的DNA片段,限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列,不同限制酶识别位点不同,切点也不完全一样。酶切后得到的各个片段长度之和一定与线性DNA分子的总长度相等,图2(a)图是用酶H单独酶切线性DNA分子经电泳后得到的2条条带,说明该线性DNA分子上有1个酶H的酶切位点,且酶切后得到2 000 bp和1 000 bp两种长度的2个片段。图2(b)图是用酶B单独酶切线性DNA分子后得到的结果图,有2 000 bp、600 bp和400 bp三种长度的3个片段,且3个片段的总长度与线性DNA分子总长度相等,说明该线性DNA分子有2个酶B的酶切位点。图2(c)图是用酶H和酶B同时酶切的结果图,其酶切的总长度为1 400 bp+600 bp+400 bp=2 400 bp,与线性DNA分子总长3 000 bp还相差600 bp,即酶切后的片段应该是1 400 bp+600 bp+600 bp+400 bp=3 000 bp,即有2个长度为600 bp的片段。据此分析,A项的切割位点符合,A项正确。B项所示的切割位点,酶B单独切割时,切割出的片段长度分别为600 bp、1 000 bp、1 400 bp,与图2结果不符,B项错误;C项所示的切割位点,酶B单独切割时,切割出的片段长度分别为400 bp、1 200 bp、1 400 bp,不符合图2,C项错误;D项所示的线性DNA分子上,两种酶的切割位点的数量不对,D项错误。
【解题技巧】要根据电泳图条带数和条带所代表的DNA分子总长度“一眼望穿”酶切割位点个数。限制酶切割DNA分子时,切割后得到的片段数比切割后得到的位点数多1,即有n个切割位点,就有n+1个切割片段。
3.电泳与遗传系谱图
【例3】(2020年,山东卷,第17题)图3表示甲、乙两种单基因遗传病的家系图和各家庭成员基因检测的结果。检测过程中用限制酶处理相关基因得到大小不同的片段后进行电泳,电泳结果中的条带表示检出的特定长度的酶切片段,数字表示碱基对的数目。下列说法正确的是 ( )
图3
A.甲病的致病基因位于常染色体上,乙病的致病基因位于X染色体上
B.甲病可能由正常基因发生碱基对的替换导致,替换后的序列可被MstⅡ识别
C.乙病可能由正常基因上的两个BamHⅠ识别序列之间发生碱基对的缺失导致
D.Ⅱ4不携带致病基因、Ⅱ8携带致病基因,两者均不患待测遗传病
【分析】本题以电泳图结合家系图为情境考查遗传规律,解题时需要综合题目中的多种信息做出判断。由Ⅱ3患病而Ⅰ1和Ⅰ2均正常可知,甲病致病基因位于常染色体上且是隐性遗传病。据乙病家系图,结合DNA电泳图Ⅰ6和Ⅰ7只有一条条带,Ⅰ5和Ⅱ8有两条条带,可知Ⅰ5和Ⅱ8为杂合子,乙病可能为常染色体隐性遗传病,当然乙病基因可能位于X、Y染色体同源区段上,A项错误;根据电泳结果,Ⅱ3只有1 350一条条带,而Ⅰ1和Ⅰ2除具有1 350的条带外还有1 150和200两条条带,可推知甲病可能由正常基因发生碱基对的替换导致,替换前的序列能被MstⅡ识别,替换后的序列则不能被MstⅡ识别,B项错误;Ⅰ6为隐性纯合子,故1.0×104为隐性基因的条带,1.4×104为显性基因的条带,患病基因片段比正常基因片段少0.4×104碱基对,所以乙病可能由正常基因上的两个BamHⅠ识别序列之间发生碱基对的缺失导致,C项正确;Ⅱ4电泳结果只有1 150和200两条条带,为显性纯合子,不携带致病基因;Ⅱ8电泳结果有两条条带,携带致病基因,二者都不患待测遗传病,D项正确。
【解题技巧】“一眼望穿”电泳图中个体条带长度与纯合子、杂合子的关系,再分析遗传家系图中个体的基因型是解题的关键。此题电泳图中,条带数只有一条的个体一定是纯合子,如题中Ⅱ3、Ⅰ6、Ⅱ7;条带数不止一条但代表的长度之和与最短的个体也应该是纯合子,如Ⅱ4;条带数长度之和是最少的2倍的个体一定是杂合子,如个体Ⅰ1和Ⅰ2。因为基因在个体中是成对存在的,如果个体是纯合子,用限制酶处理,基因有相同切割位点,电泳结果显示条带数量之和构成该基因;如果个体是杂合子,用限制酶处理,两个基因可能存在不同切割位点,每个基因形成不同片段,电泳结果显示不同条带,每个基因片段需要结合相同基因进一步判断。如果最长的个体与最短个体的条带长度之和不是呈现2倍关系,则说明显性基因与隐性基因的长度不相等,一定有基因发生了碱基对的增添或缺失,如Ⅰ5和Ⅰ6。掌握了这个技巧就能“一眼望穿”个体基因电泳图。
4.电泳与DNA指纹和亲子鉴定
DNA亲子鉴定原理:采集生物检测样本并提取其中的DNA,沉淀DNA后通过PCR技术扩增出完整的基因组DNA,用限制性核酸内切酶将DNA样本切成特定的小片段,放进凝胶内,其带电荷和性质、电荷量及分子大小各不相同,在电场力的作用下泳动速率也不同,用电泳推动DNA小片段分离,再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起,然后利用特别的染料在X光下,便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码,每个人的条码一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合。反复几次该过程,每一种探针用于寻找DNA的不同部位并形成独特的条码,只要在十几至几十个DNA位点做检测,如果全部一样,就可以确定亲子关系,如果有3个以上的位点不同,则可排除亲子关系,有一两个位点不同,则应考虑基因突变的可能,可以加做一些位点的检测进行辨别。
【例4】图4为某男子X,其两任妻子M、N以及四个战乱中走失的孤儿的DNA样品的指纹图,哪两个孩子可能是该男子的子女及他们的母亲是 ( )
图4
A.M的孩子是b,N的孩子是c
B.M的孩子是c,N的孩子是b
C.M的孩子是d,N的孩子是a
D.M的孩子是d,N的孩子是b
【分析】1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针,同人体核DNA的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为“DNA指纹”,意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的。众多“DNA指纹”组成“DNA指纹图谱”。从DNA指纹图分析,a、d的DNA指纹各有与X相同的部分,说明他们可能是X的孩子。a的另一指纹与N相同,d的另一指纹与M相同,说明a、d分别是N、M与X所生的子女。
【解题技巧】此题的难点是对图示信息理解不到位。对图示信息的理解是解答本题的关键。如何理解图示信息呢?试题中所说的指纹图本质就是由不同基因组成。根据电泳条带比对,同源染色体一条来自父亲,一条来自母亲。子女的遗传物质来自父方和母方,比如b、c没有与男子X相同的DNA指纹图,说明一定不是其生物学意义上的孩子。
5.电泳与PCR
【例5】为检测目的基因是否成功导入植株,用PCR方法扩增相应植株的DNA样本后,经电泳得到以下图谱(图5)。其中1号为DNA标准样液(含标准长度的DNA片段),10号标本为蒸馏水。据此做出分析不合理的是 ( )
图5
A.3号植株未成功导入相应的目的基因序列
B.PCR产物的分子大小在250至500 bp之间
C.9号样品对应植株不是所需的转基因植株
D.10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰